本文關鍵詞：基于PtTFPP磷光氧氣納米傳感器對PDT誘導的腫瘤細胞損傷的研究

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【摘要】：光動力治療作為一種新興的治療腫瘤的方法,因其特異性好、毒副作用小和操作簡單等優(yōu)點受到越來越多的關注。就體外光動力實驗而言,通常是利用MTT檢測法對其毒性進行評估。本文利用一種可以檢測細胞內(nèi)氧含量變化的磷光氧氣納米傳感器對光動力誘導的細胞損傷進行評估。基于這種方法,獲得與MTT檢測法相一致的測試結果,并且成功檢測到光動力治療對細胞線粒體的直接損傷,這是MTT法所不具備的。本論文的主要研究內(nèi)容和具體工作如下：1.首先利用MTT檢測手段,從原卟啉鈉濃度和光照劑量兩個方面對體外光動力實驗條件進行探索,初步掌握了不同光動力條件下HepG2細胞的死傷程度,并為后續(xù)研究提供了合適的實驗條件。2.利用再沉淀-包覆法,分別制備了靶向細胞外和細胞內(nèi)的兩種氧氣傳感器。這兩種氧氣傳感器都是以聚苯乙烯-有機硅氧烷為基質,將疏水性的氧氣分子探針PtTFPP和熒光參比分子C6隨機封裝到納米顆粒內(nèi),不同的是,用于檢測細胞內(nèi)氧含量變化的納米顆粒表層用帶正電的PLL殼層包覆,基于MTT法毒性檢測和共聚焦成像驗證了這種具有核殼結構的氧氣納米傳感器具有較低的毒性和較好的細胞攝取率。利用時間分辨熒光法檢測PDT作用后HepG2細胞的呼吸速率,發(fā)現(xiàn)細胞內(nèi)氧氣濃度變化要快于細胞外氧氣濃度變化,其測試結果值更為精確,因此在后續(xù)研究中,利用細胞內(nèi)氧氣濃度變化來對光敏劑藥效進行評估。接著,一系列的基于細胞呼吸檢測PDT療效的實驗證明這種測試手段與MTT法得到的結果相似,其結果的可靠性得到證實。此外,基于這種測試方法也成功檢測到了PDT對細胞線粒體的直接損傷,這是MTT法所不具備的。
【關鍵詞】：光動力治療 氧氣傳感器 線粒體 MTT檢測法 細胞活性
【學位授予單位】：北京交通大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R730.5;TP212
【目錄】：

• 致謝5-6
• 摘要6-7
• ABSTRACT7-11
• 1 引言11-23
• 1.1 光動力治療的研究概況11-17
• 1.1.1 光動力治療的研究背景11
• 1.1.2 光動力治療的作用機理11-13
• 1.1.3 光敏劑的發(fā)展13-15
• 1.1.4 光動力治療對腫瘤細胞線粒體的損傷15-16
• 1.1.5 光動力治療效果的評估手段及其存在的問題16-17
• 1.2 氧氣傳感器在生物領域的應用17-21
• 1.2.1 氧含量檢測在生物領域中的意義17-18
• 1.2.2 細胞氧含量檢測的技術與方法18-20
• 1.2.3 熒光氧氣納米傳感器的生物應用20-21
• 1.3 論文選題及主要研究內(nèi)容21-23
• 2 基于MTT法對肝癌細胞光動力參數(shù)的篩選23-32
• 2.1 細胞培養(yǎng)23-26
• 2.1.1 細胞實驗試劑與儀器23-24
• 2.1.2 細胞培養(yǎng)24-25
• 2.1.3 MTT細胞毒性檢測法25-26
• 2.2 基于MTT法對肝癌細胞光動力參數(shù)的篩選26-31
• 2.2.1 光源的選擇26-27
• 2.2.2 光敏劑劑量的選擇27-28
• 2.2.3 光照劑量的選擇28-31
• 2.3 小結31-32
• 3 基于細胞呼吸速率對肝癌細胞光動力損傷的評估32-48
• 3.1 引言32-35
• 3.2 PtTFPP摻雜PS-DTS基質的氧氣傳感器的制備與表征35-41
• 3.2.1 實驗試劑與設備35
• 3.2.2 樣品制備方法與步驟35-37
• 3.2.3 氧氣納米傳感器的表征37-39
• 3.2.4 氧氣納米傳感器的生物兼容性39-41
• 3.3 細胞內(nèi)納米顆粒溶氧量標定曲線的繪制41-43
• 3.4 基于磷光氧氣納米傳感器對細胞內(nèi)外溶氧梯度的檢測43-44
• 3.5 基于呼吸速率對PDT后腫瘤細胞損傷的評估44-46
• 3.5.1 PDT產(chǎn)生的細胞毒性評估44-45
• 3.5.2 PDT對細胞呼吸直接損傷的研究45-46
• 3.6 小結46-48
• 結論及展望48-49
• 參考文獻49-53
• 作者簡歷53-55
• 學位論文數(shù)據(jù)集55

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1 武凌;;澳大利亞:納米傳感器對付“細菌戰(zhàn)”[J];人人健康;2002年02期

2 ;美國發(fā)明快速檢測癌癥的納米傳感器[J];中國醫(yī)藥導報;2010年01期

3 張偉;石大友;陶麗;花慶嶺;杜瀛瀛;張靜;莊亞麗;劉虎;;納米傳感器對卵巢癌患者呼氣的分析研究[J];安徽醫(yī)科大學學報;2014年05期

4 ;納米傳感器芯片讓藥物開發(fā)提速[J];生物醫(yī)學工程與臨床;2011年04期

5 張陽德,李堅;光纖型納米傳感器生物測量進展[J];中國醫(yī)學工程;2003年06期

6 ;用DNA制造納米傳感器[J];中國醫(yī)療器械雜志;2011年05期

7 ;[J];;年期

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1 閆強;康燕;袁金穎;;雙響應互動式共聚物納米傳感器[A];中國化學會第27屆學術年會第18分會場摘要集[C];2010年

2 吳文玉;唐瑜;;基于二氧化硅納米顆粒的多功能納米傳感器的設計、合成與生物應用[A];第六屆全國物理無機化學會議論文摘要集[C];2012年

3 王峰會;;納米傳感器技術研究[A];慶祝中國力學學會成立50周年暨中國力學學會學術大會’2007論文摘要集（下）[C];2007年

4 逯樂慧;;基于譜學技術的納米傳感器設計及應用[A];第十五屆全國光散射學術會議論文摘要集[C];2009年

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1 徐錚奎;納米傳感器有廣闊應用前景[N];中國醫(yī)藥報;2011年

2 記者 毛黎;美首次完成太空納米感應器試驗[N];科技日報;2007年

3 陳列歡;新型納米傳感器 捕捉基因“蛛絲馬跡”[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2003年

4 何屹;納米傳感器芯片讓藥物開發(fā)提速[N];科技日報;2011年

5 編譯 徐錚奎;納米傳感器：醫(yī)械業(yè)質變的因素[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2012年

6 劉霞;科學家首次用DNA合成出納米傳感器[N];科技日報;2011年

7 常麗君;新傳感器能迅速檢測隱秘病原體[N];科技日報;2012年

8 莊愉;藥物輸送未來亮點[N];中國醫(yī)藥報;2004年

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1 馬宏茹;基于PtTFPP磷光氧氣納米傳感器對PDT誘導的腫瘤細胞損傷的研究[D];北京交通大學;2016年

2 王燕;基于硅殼熒光納米顆粒的納米傳感器的制備及應用[D];湖南大學;2006年

3 孫立;無線納米傳感器網(wǎng)絡低能耗編碼方案研究[D];浙江工業(yè)大學;2015年

4 高豐嶺;吸附和溫度對微—納米傳感器靜動力學響應的理論研究及有限元分析[D];天津大學;2011年

5 祝維豪;無線納米傳感器網(wǎng)絡低沖突數(shù)據(jù)通信機制[D];浙江工業(yè)大學;2015年

6 傅亮;新型碳納米傳感器及其在重金屬檢測中的應用研究[D];華南理工大學;2013年

7 張偉;納米傳感器對卵巢癌患者呼氣的分析研究[D];安徽醫(yī)科大學;2014年

8 原艷霞;基于有機染料芘的熒光氧氣納米傳感器的制備及性能研究[D];北京交通大學;2015年

9 趙家偉;DFT計算在熒光分子印記納米傳感器中應用[D];南京醫(yī)科大學;2013年

10 劉丹;表面修飾的水滑石功能材料的制備及性能研究[D];北京化工大學;2015年

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本文編號：710171