在本課題中,我們構建了一個簡單的基于GR-5 DNAzyme和催化發(fā)卡自組裝（CHA）無蛋白酶信號遞增型電化學生物傳感器,用于超靈敏檢測鉛離子。在鉛離子的存在下,GR-5 DNAzyme可以特異性與鉛離子反應,切割底鏈為兩條游離的DNA片段,其中的一條DNA片段可以打開固定在金電極上的發(fā)卡捕獲探針,觸發(fā)CHA反應。通過CHA反應,大量標記著兩個亞甲藍分子的發(fā)卡信號探針被捕獲到金電極上,促進電子轉移,從而產生一個大的亞甲藍電流。通過這個方法檢測鉛離子,檢測范圍為4×10^-11–3×10^-6 M,檢測限低至2.7×10^-11 M（S/N=3）。實驗結果表明,構建的生物傳感器對鉛離子具有高度特異性并具有良好的分析性能。該生物傳感器還采用加標法檢測血清中添加的鉛離子,其檢測結果具有良好的回收率。該傳感器的優(yōu)越性能有望應用于輔助臨床診斷鉛中毒。 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】：41 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

基于GR–5DNAzyme和催化發(fā)夾自組裝無蛋白酶信號遞增型電化學傳感器超靈敏檢測鉛離子原理示意圖

曲線的半圓增大，電荷轉移阻力增加，這是由于 DNA 帶負電荷的磷酸鹽骨架阻礙了電荷的轉移[59]，說明 Hc 已經通過 Au-S 鍵組裝到了金電極的表面。當 MCH 組裝到電極表面后(曲線 c)，Ret 進一步增加，這是由于 MCH 的生物分子特性，阻礙了電荷在金電極表面轉移，這說明 MCH 成功的結合到了金電極表面，并起到了封閉電極的作用。隨后，在無鉛離子的條件下加入鉛離子特異性DNAzyme 和信號發(fā)卡 DNA 的混合物，Ret 只是輕微增大（曲線 d）；而在鉛離子特異性 DNAzyme 與鉛離子反應后，加入信號發(fā)卡 DNA 反應，Ret 則大大增加（曲線 e）。這說明在沒有鉛離子的條件下，CHA 反應不能進行，只有極少量的 Hc-Hs復合物形成；而在鉛離子存在的情況下，CHA 反應可以進行，大量的 Hc-Hs 復合物形成。這也證明了本試驗對鉛離子的具有高度識別作用。CV 檢測結果（圖 2B）與 EIS 檢測結果一致，氧化還原峰隨每一步的修飾過程發(fā)生相應變化。EIS 和 CV圖證明了傳感器的每一步修飾過程均按照圖 1 進行。

（.A）每一步的修飾后的電極在20mMTris-HCl、140mMNaCl和5mMMgCl2溶液(pH


本文編號：3538337