G-四鏈體是一種特殊的DNA二級結(jié)構(gòu),是由富含鳥嘌呤（G）的核酸通過四個Hoogsteen氫鍵結(jié)合形成G-四分體,進(jìn)而發(fā)生π-π堆疊形成的特殊結(jié)構(gòu)。某些蛋白質(zhì)、金屬離子及有機(jī)染料都可誘導(dǎo)G-四鏈體的形成,并與其結(jié)合成穩(wěn)定的復(fù)合物。硫黃素T（Thioflavin-T,ThT）是一種具有高度特異性的G-四鏈體熒光探針,可嵌入G-四鏈體并發(fā)射較強(qiáng)熒光,為高靈敏度生物傳感器的設(shè)計提供了新的思路。水溶性共軛聚合物具有很強(qiáng)的光吸收性能、高的熒光量子產(chǎn)率和良好的光穩(wěn)定性,在化學(xué)/生物傳感和熒光成像領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。蛋白質(zhì)是生物體中含量最高,功能最重要的一類生物大分子,許多疾病的產(chǎn)生都與蛋白質(zhì)的異常表達(dá)有關(guān)。因此,特定蛋白質(zhì)的檢測在生物、醫(yī)學(xué)領(lǐng)域和臨床研究中都具有非常重要的意義。本課題基于G-四鏈體探針ThT和具有高亮度的熒光共軛聚合物,設(shè)計了兩種高靈敏度的光學(xué)生物傳感策略,實現(xiàn)了對γ-干擾素和端粒酶活性的簡便、快速檢測。γ-干擾素（interferon-gamma,INF-γ）是一種重要的細(xì)胞因子蛋白,具有抗病毒、抗增殖、分化誘導(dǎo)和免疫調(diào)節(jié)特性。其核酸適配體為一段特殊的富G序列,在ThT存在時... 

【文章來源】：南京郵電大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

A）G-四分體的結(jié)構(gòu)；B）G-四鏈體的混合型結(jié)構(gòu)（左）、反平行結(jié)構(gòu)（中）、平行結(jié)構(gòu)（右）；C）NMM的分子式（1）ThT（Thioflavin-T）

圖 1.2 基于 ThT 與 G-四鏈體結(jié)構(gòu)變化對 Hg2+檢測原理圖，Wu 課題組構(gòu)建了以一種靈敏的、擴(kuò)增的和無標(biāo)記的 RNase H 活性測定 所示，RNA 酶 H 釋放 DNA，降解 RNA/DNA 雜交雙鏈體的 RNA 鏈，觸發(fā)并產(chǎn)生大量的富含 G 的序列。最后，形成 G-四鏈體/ThT 復(fù)合物結(jié)構(gòu)，導(dǎo)從而實現(xiàn)對 RHase H 活性的測定。

3圖 1.3 基于 ThT 與切口酶實現(xiàn)檢測 RNase H 活性的原理示意圖（N-methylmesoporphyrin IX）（N-methylmesoporphyrin IX）是一種水溶性的、化學(xué)穩(wěn)定的質(zhì)的可商購的分子。同時，NMM（圖 1.1 B）是血紅素生物，因此是亞鐵螯合酶的有效抑制劑。在此期間開發(fā) NMM 13]，Sen 及其同事分離了能夠采用 G-四鏈體結(jié)構(gòu)的 NMM 適和力（Kd= 0.5-1.0 mM）結(jié)合[14]。這些結(jié)果提供了第一個


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