miRNA作為一類輔助腫瘤診斷的生物標(biāo)志物,開發(fā)對(duì)其高靈敏性和選擇性的檢測(cè)方法對(duì)于相關(guān)疾病的診斷至關(guān)重要。本文工作中,我們結(jié)合了具有特殊酶切活性的雙鏈特異性核酸酶及納米材料的優(yōu)點(diǎn),構(gòu)建了兩種用于miRNA超靈敏檢測(cè)的電化學(xué)傳感方法。具體研究?jī)?nèi)容如下:1.基于雙鏈特異性核酸酶及橋聯(lián)DNA-金納米顆粒結(jié)構(gòu)的miRNA電化學(xué)傳感器首先通過(guò)金-巰反應(yīng)將金納米顆粒與兩條末端巰基化的DNA序列（DNA探針1和2）混合,制備出多功能金納米顆粒。接著,通過(guò)兩個(gè)部分互補(bǔ)序列（橋式DNA探針1和2）的雜交,形成具有雙鏈中間部分及四個(gè)末端單鏈結(jié)構(gòu)的橋聯(lián)DNA。這四條單鏈中的兩條可以與DNA探針1雜交,第三條可以與DNA探針2雜交。此外,第四條單鏈可用于進(jìn)一步電極定位。因此,橋聯(lián)DNA結(jié)構(gòu)可以將三個(gè)金納米顆粒綁定在一起,形成橋聯(lián)DNA-金納米顆粒復(fù)合結(jié)構(gòu)。接下來(lái),在金電極上修飾捕獲探針。其發(fā)夾結(jié)構(gòu)無(wú)法直接捕獲橋聯(lián)DNA-金納米顆粒。當(dāng)存在目標(biāo)miRNA時(shí),發(fā)夾結(jié)構(gòu)會(huì)打開,形成的DNA/RNA部分可以被雙鏈特異性核酸酶識(shí)別并進(jìn)一步降解其中的DNA。捕獲探針余留單鏈區(qū)域可以用于與橋聯(lián)DNA第四條單鏈雜交,從而將復(fù)... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)安徽省 211工程院校 985工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 緒論
    1.1 miRNA簡(jiǎn)介及檢測(cè)方法
    1.2 雙鏈特異性核酸酶介導(dǎo)的信號(hào)放大
    1.3 電化學(xué)技術(shù)及納米技術(shù)
    1.4 生物燃料電池
    1.5 本論文研究?jī)?nèi)容概述
第2章 基于雙鏈特異性核酸酶及橋聯(lián)DNA-金納米顆粒結(jié)構(gòu)的miRNA電化學(xué)傳感器
    2.1 檢測(cè)原理
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
    2.3 結(jié)果與討論
    2.4 結(jié)論
第3章 基于雙鏈特異性核酸酶及DNA功能化多孔磁性納米顆粒的miRNA電化學(xué)傳感器
    3.1 檢測(cè)原理
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
    3.3 結(jié)果與討論
    3.4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與取得的其他研究成果



本文編號(hào)：3472452