赭曲霉毒素A（OTA）是由曲霉屬和青霉屬等真菌產生的一種次級代謝產物,廣泛存在于各類食品及飼料中。研究表明,OTA不僅具有強烈的肝臟和腎臟毒性,還具有致癌、致畸、致突變和免疫抑制作用,嚴重危害著人類和動物的生命安全和身體健康。目前,我國OTA檢測主要以高效液相色譜法和高效液相色譜串聯(lián)質譜法為主。雖然這兩種方法具有良好的靈敏性和選擇性,但是這兩種檢測方法的操作流程較復雜,且需要昂貴的儀器和專業(yè)的技術人員,在一定程度上限制了它們在日常檢測中的應用。因此,開發(fā)靈敏、快速、便捷的新型檢測技術用于OTA現(xiàn)場檢測分析對于保障食品安全和人類健康具有十分重要的重要意義。本文利用核酸適配體作為識別分子,結合酶催化信號放大策略,構建了新型適配體傳感器用于OTA的可視化檢測分析。具體的研究內容如下:（1）基于納米酶級聯(lián)催化信號放大策略的適配體傳感器用于OTA的可視化檢測在本工作中開發(fā)了一種基于納米酶級聯(lián)催化信號放大策略的適配體傳感器用于OTA的可視化檢測。為了實現(xiàn)對OTA的檢測,設計了一個由磁珠（MBs）、OTA適配體、與適配體部分互補的寡核苷酸（cDNA）以及堿性磷酸酶（ALP）組成的復合探針MBs-DN... 

【文章來源】：西南大學重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

（A）基于適配體構象變化調控GQD的聚集/解聚策略的熒光適配體傳感器用于OTA的

西南大學碩士學位論文12解離，通過磁分離，PP-DNA1-GO將存在于上清液中，向上清液中滴加NaOH溶液時，GO上修飾的PP在堿性環(huán)境中成粉紅色，使上清液的顏色發(fā)生明顯變化，根據顏色變化的深淺可以有效判斷OTA的含量。由于該方法僅采用普通的顯色分子作為指示劑，可以方便地用于OTA檢測，其在花生樣品中檢測限低至10ng/mL（10.0μg/kg），線性范圍10-250ng/mL。圖1.3（A）基于AuNPs二聚體的解聚策略的比色適配體傳感器用于OTA的檢測(Xiaoetal.2015)。（B）基于脂質體信號放大策略的比色適配體傳感器用于OTA的高靈敏度檢測(Linetal.2018a)。（C）基于納米酶Au@Fe3O4的比色適配體傳感器用于OTA的檢測(Wangetal.2016a)。（D）基于HCR信號放大策略的免標記比色適配體傳感器用于OTA的檢測(Wangetal.2015)。Fig1.3(A)DisassemblyofgoldnanoparticledimersforcolorimetricdetectionofochratoxinA(Xiaoetal.2015).(B)HighlysensitivecolorimetricaptasensorforochratoxinAdetectionbasedonenzyme-encapsulatedliposome(Linetal.2018a).(C)ColorimetricaptasensorforochratoxinAdetectionusingAu@Fe3O4nanoparticlesassignalindicatorandmagneticseparator(Wangetal.2016a).(D)Label-freecolorimetricaptasensorforsensitivedetectionofochratoxinAutilizinghybridizationchainreaction(Wangetal.2015).1.3.3化學發(fā)光適配體傳感器化學發(fā)光（CL）是物質在進行化學反應過程中伴隨的一種光輻射現(xiàn)象(Joetal.2016)。CL測定技術具有極高的靈敏度，且具有操作簡單、成本低等優(yōu)點，已經被廣泛應用于環(huán)境監(jiān)測、食品安全、醫(yī)療診斷等領域。

第1章緒論13圖1.4（A）基于SPCM的高通量低背景化學發(fā)光適配體傳感器用于OTA的檢測(Shenetal.2017)。（B）基于CRET的適配體傳感器用于咖啡中OTA的檢測(Joetal.2016)。Fig1.4(A)High-throughputlow-backgroundG-quadruplexchemiluminescenceaptasensorbasedonsinglephotoniccrystalmicrospherefordetectionofochratoxinA(Shenetal.2017).(B)Chemiluminescenceresonanceenergytransfer-basedaptasensorfordetectionofochratoxinAincoffee(Joetal.2016).過氧化物酶可以催化H2O2氧化魯米諾產生化學發(fā)光。Li等(Shenetal.2017)利用單分散二氧化硅光子晶體微球（SPCM），結合DNA過氧化物酶構建了一個背景信號低的化學發(fā)光分析方法用于OTA的高通量、高靈敏檢測（圖1.4A）。在此方法中，將包含血紅素適配體和OTA適配體序列的DNA1固定在SPCM的表面上，加入DNA2，由于DNA2與DNA1部分堿基互補配對，從而將血紅素適配體和OTA適配體進行封閉。無OTA時，DNA過氧化物酶無法形成，表現(xiàn)為無化學發(fā)光信號

【參考文獻】：
碩士論文
[1]適配體生物傳感技術用于檢測赭曲霉毒素A的研究[D]. 趙陽陽.吉林農業(yè)大學 2018
[2]基于新型納米材料信號放大的生物傳感界面的構筑及其在赭曲霉毒素A檢測中的研究[D]. 黃亞培.江西師范大學 2018
[3]基于適配體技術的化學發(fā)光體系檢測谷物中赭曲霉毒素A[D]. 沈鵬.南京師范大學 2017
[4]基于上轉換發(fā)光納米探針的赭曲霉毒素A檢測方法研究[D]. 戴邵亮.江南大學 2016



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