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納米技術(shù)及生物放大技術(shù)應(yīng)用于結(jié)核分枝桿菌DNA與抗原檢測的電化學(xué)傳感器研究

發(fā)布時間:2020-06-22 20:30
【摘要】:目的結(jié)核病由結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群(Mycobacterium tuberculosis complex)引起,對公眾健康造成了極大威脅。在目前全球結(jié)核病負(fù)擔(dān)下,結(jié)核分枝桿菌檢測面臨著巨大挑戰(zhàn)。本研究旨在使用新型夾心型電化學(xué)傳感器,對結(jié)核分枝桿菌DNA和抗原分別進(jìn)行快速、靈敏的測定。方法本研究中首次合成了由富勒烯納米粒子、石墨烯和氮雜化碳納米管組成的幾種新型碳納米復(fù)合材料,具有比表面積大、導(dǎo)電性優(yōu)異的特點(diǎn),同時也具有突出的內(nèi)在電活性,因此可以同時作為納米載體和氧化還原納米探針應(yīng)用于電化學(xué)傳感器構(gòu)建。通過上述各種納米復(fù)合材料以及納米金粒子等納米材料組合進(jìn)行電化學(xué)傳感器的構(gòu)建,其中引入生物素-親和素系統(tǒng)以增加靶標(biāo)分子識別量,引入適配體識別系統(tǒng)或通過堿基互補(bǔ)配對以完成典型的夾心型識別。識別完成后,使用四正辛基溴化銨(TOAB)激發(fā)示蹤標(biāo)記的固有電活性,即可對電流響應(yīng)進(jìn)行測量,進(jìn)而對靶標(biāo)分子進(jìn)行定量檢測。電化學(xué)傳感器構(gòu)建成功后,進(jìn)行了重復(fù)性和穩(wěn)定性測試,采用不同濃度的靶標(biāo)分子溶液測量其線性范圍和檢出限,使用干擾物質(zhì)檢測其選擇性,之后收集臨床標(biāo)本檢驗(yàn)其在臨床檢測中使用的可行性。結(jié)果使用四正辛基溴化銨(TOAB)激發(fā)示蹤標(biāo)記的固有電活性后,形成了可識別的峰值電流。該電化學(xué)傳感器檢測線性范圍寬,檢出限低,并且具有出色的重復(fù)性、選擇性和穩(wěn)定性。在臨床標(biāo)本檢測中,與傳統(tǒng)方法相比,該電化學(xué)傳感器也顯示出優(yōu)異的檢驗(yàn)性能,可對結(jié)核病患者與非結(jié)核病患者的臨床標(biāo)本進(jìn)行良好的區(qū)分。結(jié)論成功構(gòu)建了用于結(jié)核分枝桿菌DNA和抗原檢測的電化學(xué)傳感器,其在臨床標(biāo)本中進(jìn)行初步應(yīng)用檢測效果明確,有望在臨床實(shí)踐中進(jìn)一步應(yīng)用。
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:R52;TP212.2
【圖文】:

示意圖,電化學(xué)生物傳感器,構(gòu)建過程,適配體


圖 1. 電化學(xué)生物傳感器構(gòu)建過程的示意圖。Figure 1. Schematic illustration of the stepwise fabrication process of the proposedelectrochemical biosensor.另外,本研究團(tuán)隊構(gòu)建了一種基于適配體識別系統(tǒng)的電化學(xué)適配體傳感器(信號材料使用 C60、石墨烯和氮雜化碳納米管合成的納米復(fù)合材料),對結(jié)核分枝桿

吸收光譜,表征圖,復(fù)合材料,電鏡


16圖 2. 碳納米復(fù)合材料的電鏡表征圖:(A) NGS,(B) nano-C60-NGS,(C) Au-nano-C60/NGS。(D) 上述碳納米復(fù)合材料的 UV-vis 吸收光譜。Figure 2. FE-SEM of (A) NGS, (B) nano-C60-NGS and (C)Au-nano-C60/NGS.(D) UV-vis absorption spectra of (a) nano-C60-NGS and (b) Au-nano-C60/NGS.

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本文編號:2726201

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