AgN03和納米銀是對(duì)細(xì)菌具有良好抑菌效果的抑菌劑,但是其對(duì)細(xì)菌的抑菌機(jī)理尚沒有準(zhǔn)確的定論。而原子力顯微鏡(AFM)能提供前所未有的洞察力可視化細(xì)胞壁、膜結(jié)構(gòu),跟蹤細(xì)胞生長和分裂或與藥物作用后的動(dòng)態(tài)變化以及測量細(xì)胞的表面力學(xué)性質(zhì)。在過去的幾十年里,AFM已經(jīng)成為微生物學(xué)研究的一種強(qiáng)有力的工具,其納米級(jí)的成像與皮牛頓級(jí)的力學(xué)測量為更好地理解細(xì)胞表面組分的結(jié)構(gòu)和功能提供了新的途徑,有助于闡明AgN03、納米銀與細(xì)菌相互作用的機(jī)理,為推動(dòng)AgN03和納米銀在醫(yī)藥領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用打下基礎(chǔ)。本論文通過AFM成像與力曲線測定,輔助靜置培養(yǎng)、生長曲線以及β-半乳糖苷酶活性的生物測定,研究AgN03和納米Ag分別作用于大腸桿菌與金黃色葡萄球菌時(shí)的抑菌機(jī)理。主要結(jié)果如下:1.AgN03作用于大腸桿菌12h后,菌體表面出現(xiàn)了囊泡,桿狀結(jié)構(gòu)發(fā)生塌陷,內(nèi)容物外泄,表面平均粗糙度(Ra)由11.4nm增至17.0nm,均方根粗糙度(Rq)由14.2nm增至21.0nm;力曲線斜率由-1.40降至-1.74,細(xì)胞表面的彈性降低,黏附力增加1 nN,楊氏模量由277 Mpa增大至880 Mpa;在48 h內(nèi)完全抑制了大腸桿菌的生長,細(xì)胞膜通透性增大。2.AgNO3作用于金黃色葡萄球菌12 h后,細(xì)菌表面出現(xiàn)了不同程度的凹陷破損,內(nèi)容物外泄,Ra由16.4 nm降至12.5 nm,Rq由20.4 nm降至15.7 nm;力曲線斜率由-24.12升高至-18.23,細(xì)胞表面的彈性升高,黏附力增加42 nN,楊氏模量由1812 Mpa降至882 Mpa;在4h內(nèi)完全抑制了金黃色葡萄球菌的生長,48 h內(nèi)菌量少于對(duì)照組,細(xì)胞膜通透性增大。3.納米Ag作用于大腸桿菌12 h后,細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)出現(xiàn)不同程度的塌陷與隆起,內(nèi)容物外泄,Ra由10.7 nm降至7.0 nm,Rq由13.7 nm降至8.8 nm;力曲線斜率由-1.44降至-3.95,細(xì)胞表面的彈性降低,黏附力增加8 nN,楊氏模量由334 Mpa升至3113 Mpa;在48 h內(nèi)完全抑制了大腸桿菌的生長,細(xì)胞膜通透性增大。4.納米Ag作用于金黃色葡萄球菌12h后,使其表面發(fā)生了不同程度的凹陷破損,內(nèi)容物外泄,Ra由15.9 nm降至13.9 nm,Rq由19.4 nm降至17.6nm;力曲線斜率由-26.41降至-19.62,細(xì)胞表面的彈性升高,黏附力增加38 nN,楊氏模量由1797 Mpa降低至1019 Mpa;在6 h內(nèi)完全抑制了金黃色葡萄球菌的生長,24 h后菌量大于對(duì)照組,細(xì)胞膜通透性基本沒有變化。
【學(xué)位單位】：廣西大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：TH742;TQ421
【部分圖文】：

會(huì)導(dǎo)致生理特性的不同，特別是面對(duì)抑菌物質(zhì)時(shí)的自我保護(hù)機(jī)制。??１．２．１革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌的表層結(jié)構(gòu)差異??由圖１－２可以對(duì)比看出，革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌的表層結(jié)構(gòu)主要為細(xì)胞壁與??細(xì)胞膜，其中結(jié)構(gòu)的差異主要來自細(xì)胞壁的不同。革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁主要是由肽聚糖??層與磷壁酸構(gòu)成１４９］。革蘭氏陽性菌的肽聚糖層厚度大約為２０？８０?ｎｍ，并且結(jié)構(gòu)緊密扎??實(shí)；磷壁酸具有作為革蘭氏陽性菌特異性表面抗原用于菌種鑒定、使細(xì)菌黏附至宿主細(xì)??胞等功能革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁除了肽聚糖層之外還有特殊成分外膜，因此革蘭氏??陰性菌細(xì)胞壁是多層結(jié)構(gòu)，由內(nèi)向外分為肽聚糖層、脂蛋白／周質(zhì)層、磷脂層和脂多糖層??［５１］。革蘭氏陰性菌肽聚糖層比革蘭氏陽性菌的肽聚糖層層數(shù)少并且更薄，厚度大約為??１０－１５?ｎｍ〇??７??

廣西大學(xué)頓士學(xué)位論文?原■子力顯微後研究硝酸銀■和納米銀對(duì)細(xì)菌的抑菌機(jī)理??凸不平，并且細(xì)胞周邊有內(nèi)容物外泄。由圖２－１Ｄ可以更清晰地觀察到顆粒狀隆起物，??測量隆起物大小約為６７？１２６ｎｍ，推測其為外膜囊泡（ＯＭＶｓ）。ＯＭＶｓ是普遍存在于??革蘭氏陰性菌中的包含生物學(xué)活性物質(zhì)的囊泡狀結(jié)構(gòu)，其大小在２０？２５０?ｎｍ之間〃１２］。??細(xì)菌生長環(huán)境的改變，如抑菌物質(zhì)的添加，會(huì)導(dǎo)致ＯＭＶｓ的大量產(chǎn)生，而ＯＭＶｓ分泌??的周質(zhì)內(nèi)容物如Ｐ－內(nèi)酰胺酶等抑菌物質(zhì)的滅活酶能有效抵抗抑菌物質(zhì)對(duì)菌體的破壞，從??而提高了細(xì)菌的生存機(jī)會(huì)在本研究中，ＯＭＶｓ的存在使得大腸桿菌在短時(shí)間內(nèi)??仍能保持桿狀形態(tài)，但細(xì)胞表面＋再光滑。??ｒｎａｒｎｍ??鼸：：１??圖２－１?ＡｇＮＯ．，作用前后的大腸桿菌的振幅誤差圖（Ａ、Ｃ）與超微結(jié)構(gòu)圖（Ｂ、Ｄ）??Ｆｉｇ．?２－１?ｌ?ｈｃ?ａｍｐｌｉｔｕｄｅ?ｅｒｒｏｒ?ｉｍａｇｅｓ?（Ａ．?Ｃ）?ａｎｄ?ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ?ｉｍａｇｅｓ?（Ｂ．?Ｄ）?ｏｆ?７／．．?ｃｏｌｉ?ｂｅｆｏｒｅ?ａｎｄ?ａｌｔｅｒ??ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ＡｇＮＯｓ??２．３．２?ＡｇＮＣｂ對(duì)大腸桿菌形貌的影卩向??圖２－２是ＡｇＮＣｈ作用前后大腸桿菌的３Ｄ圖、高度圖與剖面分析圖。高度圖反映丫??細(xì)菌的形貌

廣西大學(xué)頓士學(xué)位論文?原■子力顯微後研究硝酸銀■和納米銀對(duì)細(xì)菌的抑菌機(jī)理??凸不平，并且細(xì)胞周邊有內(nèi)容物外泄。由圖２－１Ｄ可以更清晰地觀察到顆粒狀隆起物，??測量隆起物大小約為６７？１２６ｎｍ，推測其為外膜囊泡（ＯＭＶｓ）。ＯＭＶｓ是普遍存在于??革蘭氏陰性菌中的包含生物學(xué)活性物質(zhì)的囊泡狀結(jié)構(gòu)，其大小在２０？２５０?ｎｍ之間〃１２］。??細(xì)菌生長環(huán)境的改變，如抑菌物質(zhì)的添加，會(huì)導(dǎo)致ＯＭＶｓ的大量產(chǎn)生，而ＯＭＶｓ分泌??的周質(zhì)內(nèi)容物如Ｐ－內(nèi)酰胺酶等抑菌物質(zhì)的滅活酶能有效抵抗抑菌物質(zhì)對(duì)菌體的破壞，從??而提高了細(xì)菌的生存機(jī)會(huì)在本研究中，ＯＭＶｓ的存在使得大腸桿菌在短時(shí)間內(nèi)??仍能保持桿狀形態(tài)，但細(xì)胞表面＋再光滑。??ｒｎａｒｎｍ??鼸：：１??圖２－１?ＡｇＮＯ．，作用前后的大腸桿菌的振幅誤差圖（Ａ、Ｃ）與超微結(jié)構(gòu)圖（Ｂ、Ｄ）??Ｆｉｇ．?２－１?ｌ?ｈｃ?ａｍｐｌｉｔｕｄｅ?ｅｒｒｏｒ?ｉｍａｇｅｓ?（Ａ．?Ｃ）?ａｎｄ?ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ?ｉｍａｇｅｓ?（Ｂ．?Ｄ）?ｏｆ?７／．．?ｃｏｌｉ?ｂｅｆｏｒｅ?ａｎｄ?ａｌｔｅｒ??ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ＡｇＮＯｓ??２．３．２?ＡｇＮＣｂ對(duì)大腸桿菌形貌的影卩向??圖２－２是ＡｇＮＣｈ作用前后大腸桿菌的３Ｄ圖、高度圖與剖面分析圖。高度圖反映丫??細(xì)菌的形貌
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2864066