基于散射信號的超分辨光學(xué)相減顯微鏡
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【摘要】:現(xiàn)有的光學(xué)超分辨顯微成像技術(shù)主要依賴于特殊的熒光標(biāo)記物,其對于大多數(shù)非熒光樣品的超分辨成像就變得無能為力。因此我們提出將光學(xué)相減顯微技術(shù)應(yīng)用到非熒光樣品的成像當(dāng)中,利用普通共聚焦光斑和面包圈型光斑分別激發(fā)樣品的散射光成像,從而得到樣品同一區(qū)域的兩幅圖像,再通過圖像相減的方法提高了圖像空間分辨率。不同于一般的超分辨成像方法,這種光學(xué)相減顯微鏡不需要特殊的樣品預(yù)處理過程,同時兩次成像的激發(fā)光強度可以保持在一個較低水平,避免了樣品損傷的影響。隨后金納米小球和有機聚合物微絲的散射成像實驗證明了光學(xué)相減顯微鏡可以將空間分辨率提高到215 nm(0.33λ,1λ=650 nm),并且通過探測散射信號得到更多的樣品細節(jié)信息。
【作者單位】: 四川大學(xué)物理學(xué)系;高能量密度物理及技術(shù)教育部重點實驗室;中國科學(xué)院化學(xué)研究所分子納米結(jié)構(gòu)與納米技術(shù)實驗室;北方工業(yè)大學(xué)理學(xué)院;中國科學(xué)院化學(xué)研究所高分子物理與化學(xué)實驗室;中國科學(xué)院化學(xué)研究所活體分析化學(xué)實驗室;
【基金】:國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展規(guī)劃項目(973)(2013CB933701) 國家自然科學(xué)基金(21127901;91413119) 中國科學(xué)院“關(guān)鍵技術(shù)人才”項目資助~~
【分類號】:TH742
【正文快照】: 1引言幾個世紀(jì)以來,光學(xué)顯微鏡的發(fā)展極大地提高了人們對細胞結(jié)構(gòu)和細胞功能的認(rèn)識,但由于光學(xué)衍射極限的存在,光學(xué)顯微鏡空間分辨率通常在數(shù)百納米左右,這使得其在細胞器和分子水平的細胞生物學(xué)探測中受到了極大的限制。近來,一些基于熒光探針的超分辨光學(xué)顯微鏡打破了光學(xué)衍
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