本文關(guān)鍵詞：豬生長激素抗獨(dú)特型抗體的制備及其生物特性的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】： 豬生長激素(porcine growth hormone，pGH)是豬垂體前葉分泌的長為191個(gè)氨基酸的單鏈多肽類激素。生長激素是調(diào)節(jié)機(jī)體正常生長和發(fā)育的主要激素之一，它促進(jìn)氨基酸進(jìn)入細(xì)胞以及RNA的生物合成，從而加速蛋白質(zhì)的合成，不僅促進(jìn)骨的生長，且影響許多組織的生長；GH促進(jìn)脂肪的分解以及脂肪酸氧化供能，加速脂類的代謝，顯著提高豬的生長速度、飼料報(bào)酬和瘦肉率。研制開發(fā)豬生長激素類飼料添加劑具有較高的商業(yè)價(jià)值和科研價(jià)值。 豬生長激素最早從豬的垂體組織中提取，不僅費(fèi)時(shí)費(fèi)工，而且產(chǎn)量有限，無法在生產(chǎn)中推廣應(yīng)用。隨著科技發(fā)展，國外最早于1983年用大腸桿菌生產(chǎn)出pGH后，人們開始通過生物工程方法制備豬生長激素。用生物工程方法制備豬生長激素，涉及基因調(diào)控、表達(dá)及蛋白質(zhì)分離純化等多項(xiàng)技術(shù)。目前生物工程生產(chǎn)的豬生長激素由于蛋白質(zhì)生物活性低、產(chǎn)量低、成本高、并且需連續(xù)、大劑量多次肌肉注射或皮下包埋等不足之處，限制了其應(yīng)用。激素免疫學(xué)的興起，使有目的的改變內(nèi)分泌平衡并產(chǎn)生有意義的生理學(xué)效應(yīng)成為可能，許多學(xué)者對此已進(jìn)行了大量的實(shí)驗(yàn)研究，已經(jīng)取得很大成功。 本實(shí)驗(yàn)采用純化的豬生長激素單克隆抗體作為抗原，免疫山羊，獲得羊抗豬生長激素抗獨(dú)特型抗體，并對其免疫特性進(jìn)行鑒定。還以異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記所獲得豬生長激素抗獨(dú)特型抗體作為探針，使之與豬肝細(xì)胞上生長激素受體結(jié)合，應(yīng)用共聚焦激光掃描顯微鏡，觀察免疫熒光標(biāo)記的豬生長激素抗獨(dú)特型抗體在豬肝細(xì)胞的結(jié)合情況，對生長激素抗獨(dú)特型抗體在結(jié)構(gòu)上模擬生長激素的結(jié)合特性進(jìn)行定位研究，第三，在小白鼠上驗(yàn)證其的促生長活性。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，所獲得豬生長激素抗獨(dú)特型抗體具有與生長激素相似的免疫學(xué)特性。標(biāo)記的生長激素抗獨(dú)特型抗體能夠與豬肝細(xì)胞膜生長激素受體特異性的結(jié)合。試驗(yàn)證明所獲得的豬生長激素抗獨(dú)特型抗體作為豬生長激素的模擬物在結(jié)構(gòu)上存在著與豬生長激素相似性。且在小白鼠的促生長活性試驗(yàn)中證明豬生長激素抗獨(dú)特型抗體作為豬生長激素的模擬物對小白鼠具有促生長活性。 本實(shí)驗(yàn)的研究結(jié)果為應(yīng)用抗獨(dú)特型抗體促進(jìn)豬的生長提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，也為進(jìn)一步探討免疫調(diào)控激素促生長作用的機(jī)理，研制開發(fā)安全有效的新型生長激素替代物奠定理論和技術(shù)基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：豬生長激素 抗獨(dú)特型抗體 免疫熒光 促生長 活性
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：S852.4
【目錄】：

• 摘要6-7
• Abstract7-8
• 前言8-15
• 一 豬生長激素的研究概況8-11
• 二 抗獨(dú)特型抗體的研究概況11-15
• 實(shí)驗(yàn)一 豬生長激素抗獨(dú)特型抗體(Ab_2)的制備和鑒定15-25
• 1 材料與方法15-19
• 1.1 材料15-16
• 1.2 方法16-19
• 2 結(jié)果與分析19-23
• 2.1 單克隆抗體腹水及培養(yǎng)上清效價(jià)的測定19-20
• 2.2 豬生長激素單克隆抗體的純化結(jié)果20
• 2.3 羊抗豬生長激素單克隆抗體血清效價(jià)測定20
• 2.4 羊抗豬生長激素單抗血清純化結(jié)果20-21
• 2.6 競爭抑制實(shí)驗(yàn)結(jié)果21-23
• 3 討論23-24
• 4 小結(jié)24-25
• 實(shí)驗(yàn)二 豬生長激素抗獨(dú)特型抗體(Ab_2)結(jié)構(gòu)特性的研究25-31
• 1 材料與方法25-27
• 1.1 材料25
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法25-27
• 2 結(jié)果27-29
• 2.1 肝細(xì)胞的分離和培養(yǎng)結(jié)果27
• 2.2 激光共聚焦掃描顯微鏡觀察肝細(xì)胞熒光染色結(jié)果27-29
• 3 討論29-30
• 4 小結(jié)30-31
• 實(shí)驗(yàn)三 豬生長激素抗獨(dú)特型抗體對小白鼠的促生長活性研究31-36
• 1 材料與方法31-32
• 1.1 動(dòng)物與藥品31
• 1.2 實(shí)驗(yàn)分組及處理31
• 1.3 統(tǒng)計(jì)分析31-32
• 2 結(jié)果32-35
• 2.1 各種處理對小鼠體重等項(xiàng)指標(biāo)的影響32-33
• 2.2 各種處理后的小鼠各周體重的變化情況33-35
• 3 討論35
• 4 小結(jié)35-36
• 結(jié)論36-37
• 參考文獻(xiàn)37-42
• 附錄42-45
• 致謝45-46
• 作者簡歷46

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  本文關(guān)鍵詞：豬生長激素抗獨(dú)特型抗體的制備及其生物特性的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：310610