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生物3D打印制備SA/Ge凝膠支架探究淫羊藿苷對軟骨細胞增殖、分泌的影響

發(fā)布時間:2022-02-19 01:38
  軟骨缺損在運動損傷中是最常見的,容易導致形成骨性關節(jié)炎,引發(fā)疼痛、關節(jié)畸形等癥狀。存在于關節(jié)中的軟骨細胞分化完全、成熟度高,致使其非常弱的再生能力,外加在軟骨周圍沒有神經(jīng)、血管及淋巴組織,所以靠自身來修復的可能性顯得微乎其微。隨著組織工程技術的發(fā)展,修復軟骨損傷這一難題將逐漸得到解決。本論文利用生物3D打印技術,首先考察實驗儀器參數(shù)對組織支架結(jié)構(gòu)以及孔徑的影響。以2 g海藻酸鈉和6 g明膠作為打印基材,制備出的復合凝膠呈現(xiàn)透明狀、粘度適中且材料的流體性能良好。通過考察打印氣壓、打印速度、打印針頭直徑和打印間距對支架形貌的影響,確定出0.30 Mpa、16 mm/s、300μm和0.8 mm是最優(yōu)的制備參數(shù),制備出的支架結(jié)構(gòu)規(guī)整、孔孔貫通性良好。其次,對制備出的SA/Ge復合凝膠支架的性能進行簡單的研究。熱穩(wěn)定性實驗表明,復合支架相比純海藻酸鈉支架具有更好的穩(wěn)定性能;支架溶脹結(jié)果發(fā)現(xiàn),復合凝膠支架在4 h內(nèi)就達到其最大溶脹率,為713%;從復合支架的降解實驗結(jié)果得出,Ca Cl2對海藻酸鈉交聯(lián)度較低且主要交聯(lián)支架的外部結(jié)構(gòu);對支架的浸提液做毒性分析,與正常培養(yǎng)基相比沒有顯著性差異,表明制... 

【文章來源】:華僑大學福建省

【文章頁數(shù)】:74 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
主要符號對照表
第1章 緒論
    1.1 組織工程原理
    1.2 組織工程支架制備方法
        1.2.1 靜電紡絲法
        1.2.2 相分離技術
        1.2.3 微球燒結(jié)技術
        1.2.4 纖維黏結(jié)
    1.3 生物 3D打印
    1.4 骨軟骨缺損研究現(xiàn)狀
    1.5 本論文研究意義與主要內(nèi)容
第2章 SA/Ge支架制備及優(yōu)化
    2.1 引言
    2.2 實驗材料和儀器
        2.2.1 實驗試劑
        2.2.2 實驗設備
    2.3 實驗方法
        2.3.1 復合膠體溶液配制及打印前預處理
        2.3.2 打印壓力對支架精確度的影響
        2.3.3 打印速度對支架精確度的影響
        2.3.4 打印針頭直徑對支架精確度的影響
        2.3.5 打印線條間距對支架精確度的影響
    2.4 實驗結(jié)果
        2.4.1 打印氣壓對支架的影響
        2.4.2 打印速度對支架的影響
        2.4.3 打印針頭直徑對支架的影響
        2.4.4 打印間距對支架的影響
    2.5 小結(jié)
第3章 復合支架性能研究及毒性測試
    3.1 引言
    3.2 實驗材料和儀器
        3.2.1 實驗試劑
        3.2.2 實驗設備
    3.3 實驗方法
        3.3.1 復合支架熱穩(wěn)定性測試
        3.3.2 支架溶脹率測定
        3.3.3 支架降解速率測定
        3.3.4 支架毒性測定
    3.4 實驗結(jié)果
        3.4.1 熱穩(wěn)定性分析
        3.4.2 溶脹率檢測
        3.4.3 降解速率測定
        3.4.4 毒性檢驗
    3.5 小結(jié)
第4章 軟骨細胞培養(yǎng)、性能鑒定及ICA對其生長影響
    4.1 引言
    4.2 實驗材料和儀器
        4.2.1 實驗試劑
        4.2.2 實驗設備
    4.3 實驗方法
        4.3.1 軟骨細胞形態(tài)觀察
        4.3.2 軟骨細胞生長曲線
        4.3.3 軟骨細胞組織學染色
        4.3.4 ICA對平面培養(yǎng)細胞的增殖影響
        4.3.5 ICA對平面培養(yǎng)細胞分泌GAG影響
        4.3.6 ICA對軟骨細胞凋亡影響
    4.4 實驗結(jié)果
        4.4.1 軟骨細胞形態(tài)
        4.4.2 細胞生長曲線
        4.4.3 軟骨細胞組織學染色
        4.4.4 ICA對軟骨細胞增殖的影響
        4.4.5 ICA對細胞分泌GAG的影響
        4.4.6 ICA對細胞凋亡的觀察
    4.5 小結(jié)
第5章 細胞在支架上生長狀態(tài)及ICA對其影響
    5.1 引言
    5.2 實驗材料和儀器
        5.2.1 實驗試劑
        5.2.2 實驗儀器
    5.3 實驗方法
        5.3.1 細胞在支架上的粘附
        5.3.2 細胞在支架上的分布
        5.3.3 細胞在支架不同層厚的死活
        5.3.4 梯度ICA對細胞在支架上的增殖作用
        5.3.5 梯度ICA對細胞在支架分泌GAG測定
    5.4 實驗結(jié)果
        5.4.1 細胞在支架上粘附
        5.4.2 細胞在支架上的分布
        5.4.3 細胞在支架不同層厚上的死活觀察
        5.4.4 ICA對支架上細胞的促增殖作用
        5.4.5 ICA對支架上細胞分泌GAG影響
    5.5 小結(jié)
第6章 總結(jié)
    6.1 實驗總結(jié)
    6.2 后續(xù)實驗建議
參考文獻
致謝
個人簡歷、在學期間發(fā)表的學術論文與研究成果


【參考文獻】:
期刊論文
[1]淫羊藿苷促進軟骨細胞體外3-D培養(yǎng)下生成軟骨[J]. 王鵬珍,萬超.  中國老年學雜志. 2015(10)
[2]大鼠膝關節(jié)軟骨細胞體外培養(yǎng)去分化時間的實驗研究[J]. 丁萬軍,劉世清,賀斌,鄧明.  武漢大學學報(醫(yī)學版). 2012(01)
[3]微球在組織工程中的應用[J]. 崔代超,范田園.  國際藥學研究雜志. 2010(04)
[4]淫羊藿苷對骨髓間充質(zhì)干細胞骨向誘導的實驗研究[J]. 吳昊,查振剛,姚平,熊高鑫,郇松瑋,束志勇.  中國中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2010(04)
[5]淫羊藿苷元脂質(zhì)體的制備及其對大鼠骨髓基質(zhì)細胞增殖分化影響的研究[J]. 賈東升,賈曉斌,施峰,薛璟,孫娥,陳玲玲,張振海.  中國藥學雜志. 2010(05)
[6]熱致相分離法制備聚合物微孔膜的研究進展[J]. 蘇儀,李永國,陳翠仙,李繼定.  膜科學與技術. 2007(05)
[7]Icariin promotes expression of PGC-1α,PPARα,and NRF-1 during cardiomyocyte differentiation of murine embryonic stem cells in vitro[J]. Ling DING,Xing-guang LIANG,Dan-yan ZHU,Yi-jia LOU~2Institute of Pharmacology and Toxicology and Biochemical Pharmaceutics,College of Pharmaceutical Sciences,Zhejiang University,Hangzhou 310058,China.  Acta Pharmacologica Sinica. 2007(10)
[8]靜電紡絲技術及其研究進展[J]. 楊恩龍,王善元,李妮,趙叢濤.  產(chǎn)業(yè)用紡織品. 2007(08)
[9]葛根素和淫羊藿甙對成骨細胞生物學作用的比較研究[J]. 殷曉雪,陳仲強,黨耕町.  中國骨與關節(jié)損傷雜志. 2007(03)
[10]淫羊藿甙對成骨細胞Smad4 mRNA作用的實驗研究[J]. 雪原,王沛,齊清會,倪虹,馬信龍,郭世紱.  中華骨科雜志. 2005(02)

博士論文
[1]仿生組裝淫羊藿苷控釋型骨修復材料的構(gòu)建與應用基礎研究[D]. 吳濤.南方醫(yī)科大學 2009

碩士論文
[1]亞臨界二氧化碳燒結(jié)共載細胞多孔微球組織工程支架及其性能的研究[D]. 馬騰.華僑大學 2015
[2]淫羊藿甙對關節(jié)軟骨細胞增殖、分泌及MAPKs通路的影響[D]. 史冰楠.華中農(nóng)業(yè)大學 2013



本文編號:3631950

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