煙粉虱Bemisia tabaci （Gennadius）屬同翅目（半翅目）,粉虱科,粉虱亞科,小粉虱屬,是一種危害多種農(nóng)業(yè)系統(tǒng)的農(nóng)業(yè)害蟲。自二十世紀(jì)八十年代以來,大量殺蟲劑用于防治煙粉虱,頻繁且不合理的使用殺蟲劑,導(dǎo)致該害蟲對多種殺蟲劑產(chǎn)生抗性。煙粉虱對殺蟲劑抗性產(chǎn)生機(jī)制主要是增強(qiáng)解毒酶活性和靶標(biāo)不敏感性（target insensitivity）。細(xì)胞色素P450系統(tǒng)在煙粉虱對相關(guān)殺蟲劑抗性中起重要作用。 NADPH-細(xì)胞色素P450還原酶（EC1.6.2.4, NADPH-cytochrome P450reduetase, CPR）和NADH-細(xì)胞色素b5還原酶（EC.1.6.6.2, NADH-cytochrome b5reduetase, CBR）都是細(xì)胞色素P450氧化還原酶系的重要組成部分,在細(xì)胞色素P450介導(dǎo)的氧化還原反應(yīng)中起著電子傳遞鏈的作用。本文采用反轉(zhuǎn)錄庫策略得到煙粉虱CPR的全長cDNA序列與RACE策略得到CBR的全長cDNA序列,探索了CPR和CBR基因在煙粉虱不同身體部位、不同發(fā)育階段及不同抗性品系的表達(dá)量差異,以期為深入研究細(xì)胞色素P450酶系在... 

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略表
目錄
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 細(xì)胞色素P450
    1.2 NADPH—細(xì)胞色素P450還原酶
    1.3 NADH-細(xì)胞色素b5還原酶
    1.4 昆蟲P450基因(蛋白)技術(shù)研究進(jìn)展
    1.5 本實(shí)驗(yàn)研究的目的和意義
第二章 煙粉虱CPR與CBR基因的克隆
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試?yán)ハx、寄主植物和養(yǎng)蟲籠
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 總RNA的提取及檢測
        2.1.4 第一條cDNA鏈的合成
        2.1.5 煙粉虱CPR與CBR cDNA片段擴(kuò)增
        2.1.6 CPR基因全長CDS克隆
        2.1.7 CBR基因RACE及全長CDS克隆
    2.2 結(jié)果與分析
第三章 煙粉虱CPR與CBR基因生物信息學(xué)分析
    3.1 序列分析
    3.2 系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建
    3.3 CPR 3D結(jié)構(gòu)模型的構(gòu)建
    3.4 CBR 3D結(jié)構(gòu)模型的構(gòu)建
第四章 CPR與CBR基因在不同發(fā)育階段及不同組織部位的表達(dá)量差異分析
    4.1 供試?yán)ハx
    4.2 試驗(yàn)方法
        4.2.1 RNA的提取
        4.2.2 cDNA第一鏈的合成
        4.2.3 引物設(shè)計
        4.2.4 實(shí)時熒光定量PCR反應(yīng)條件
        4.2.5 引物擴(kuò)增效率及擴(kuò)增產(chǎn)物的熔解曲線
    4.3 結(jié)果分析
    4.4 小結(jié)與討論
第五章 不同藥劑處理CPR與CBR基因的表達(dá)量差異
    5.1 供試煙粉虱
    5.2 試驗(yàn)方法
        5.2.1 RNA的提取
        5.2.2 cDNA第一鏈的合成
        5.2.3 引物設(shè)計
        5.2.4 實(shí)時熒光定量PCR的反應(yīng)條件
    5.3 結(jié)果分析
    5.4 小結(jié)與討論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]微粒體多功能氧化酶系與棉鈴蟲對氰戊菊酯抗藥性的關(guān)系[J]. 邱立紅,張文吉.  昆蟲學(xué)報. 2001(04)
[2]棉鈴蟲不同發(fā)育階段微粒體P450酶系組成和活性的比較[J]. 邱星輝,李薇,冷欣夫.  昆蟲學(xué)報. 2001(02)
[3]NADH-細(xì)胞色素b5還原酶與散發(fā)性甲狀腺腫的關(guān)系[J]. 黃國良,林芬,高妍.  中國地方病學(xué)雜志. 2000(04)
[4]棉鈴蟲幼蟲加單氧酶活性的組織分布[J]. 邱星輝,冷欣夫.  生態(tài)學(xué)報. 2000(02)
[5]棉鈴蟲微粒體多功能氧化酶系組分含量及酶活性在不同生長發(fā)育階段的變化規(guī)律研究[J]. 邱立紅,張文吉,李曉薇.  農(nóng)藥學(xué)學(xué)報. 1999(01)



本文編號：3719671