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地衣芽孢桿菌的分離和鑒定

發(fā)布時(shí)間:2022-05-06 21:05
  為了從土壤中分離得到地衣芽孢桿菌,開展后續(xù)研究,試驗(yàn)采集塔里木盆地的土壤進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng),采用臺(tái)盼藍(lán)平板方法,對(duì)分離培養(yǎng)得到的單菌落進(jìn)行生物學(xué)特性研究、生理生化試驗(yàn)和16S r DNA鑒定。根據(jù)《伯杰細(xì)菌鑒定手冊(cè)》,初步鑒定為芽孢桿菌,提取DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增并送測序。結(jié)果表明,從塔里木盆地土壤中分離得到的細(xì)菌為地衣芽孢桿菌,說明該土壤中存在地衣芽孢桿菌,并為后續(xù)進(jìn)一步研究及應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。 

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
1 材料
    1.1 樣品采集
    1.2 主要試驗(yàn)儀器
    1.3 試驗(yàn)藥品
2 方法
    2.1 細(xì)菌的分離處理
        2.1.1 制樣品稀釋液
        2.1.2 培養(yǎng)
        2.1.3 分離單菌落
        2.1.4 純化
    2.2 生物學(xué)特性研究
        2.2.1 菌落培養(yǎng)特征
        2.2.2 菌體形態(tài)觀察
        2.2.3 革蘭染色[7]
        2.2.4 孔雀石綠染色[8]
        2.2.5 血平板試驗(yàn)
    2.3 細(xì)菌的生化鑒定
        2.3.1 檸檬酸鹽利用試驗(yàn)
        2.3.2 丙酸鹽利用試驗(yàn)
        2.3.3 淀粉水解試驗(yàn)
        2.3.4 卵黃卵磷脂酶試驗(yàn)
        2.3.5 硝酸鹽還原試驗(yàn)
        2.3.6 吲哚試驗(yàn)
    2.4 地衣芽孢桿菌16S r DNA的鑒定
        2.4.1 基因組DNA的提取
        2.4.2 16S r DNA基因擴(kuò)增
        2.4.3 純化和測序
3 結(jié)果與分析
    3.1 細(xì)菌的培養(yǎng)
    3.2 細(xì)菌形態(tài)
    3.3 菌落形態(tài)及血平板毒力測試
    3.4 生理生化實(shí)驗(yàn)鑒定結(jié)果
        3.4.1 丙酸鹽利用、檸檬酸鹽利用實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.2 淀粉、卵黃卵磷脂、硝酸鹽還原試驗(yàn)結(jié)果
        3.4.3 生化試驗(yàn)鑒定結(jié)果
    3.5 16S r DNA的鑒定結(jié)果
        3.5.1 16S r DNA的擴(kuò)增結(jié)果
        3.5.2 16S r DNA克隆鑒定結(jié)果
        3.5.3 16S r DNA的序列進(jìn)化樹同源性分析結(jié)果
4 結(jié)論與討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]芽孢染色實(shí)驗(yàn)中枯草桿菌最佳培養(yǎng)條件探索[J]. 樊佳,韓煦,陶榆瑋,徐璕,楊富強(qiáng),汪紅,鄭冬超.  實(shí)驗(yàn)技術(shù)與管理. 2018(03)
[2]微課“革蘭染色”的教學(xué)設(shè)計(jì)[J]. 黃荔豐.  課程教育研究. 2017(41)
[3]可抑制致病菌的益生菌篩選及抑菌物質(zhì)的初步確定[J]. 王利杰,余曉斌,方銀兵,顧秋亞.  生物技術(shù)通報(bào). 2017(11)
[4]地衣芽孢桿菌原生質(zhì)體的制備、再生及轉(zhuǎn)化研究[J]. 莫靜燕,陳獻(xiàn)忠,王正祥.  生物技術(shù). 2009(05)



本文編號(hào):3651213

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