本文以渤海海泥生境細菌TCS001為研究對象,研究其生理生化性質(zhì)與系統(tǒng)分類地位,探討最佳發(fā)酵條件,揭示TCS001抑菌活性、生防作用及其初步作用機理,以期為TCS001微生物農(nóng)藥開發(fā)利用提供實驗依據(jù)。1、結(jié)合形態(tài)學、生理生化試驗與gyrA分子鑒定技術(shù),對菌株TCS001進行菌種鑒定;測定不同培養(yǎng)時間TCS001的OD₆₃₀,繪制細菌生長曲線。結(jié)果顯示TCS001為革蘭氏陽性菌,系芽孢桿菌科（Bacillaceae）芽孢桿菌屬貝萊斯芽孢桿菌（Bacillus velezensis）;TCS001適宜生長期為0-52 h,對數(shù)生長期為10-20 h。2、采用平板對峙法檢測TCS001的抑菌譜,發(fā)現(xiàn)TCS001有廣譜的抑菌活性,其對黃瓜灰霉病菌（Botrytis cinerea,BC）抑菌活性最強,為84.12±0.19%;采用單因素試驗和響應(yīng)面分析法對TCS001的發(fā)酵條件進行優(yōu)化,優(yōu)化后的最佳條件為牛肉浸膏4.0 g,轉(zhuǎn)速164 rpm,溫度25℃,該條件下培養(yǎng)得到的發(fā)酵濾液,稀釋20倍后,對BC生長抑制率仍然可達89.27±2.06%。3、制備不同濃度TCS001... 

【文章來源】：浙江農(nóng)林大學浙江省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

我國微生物農(nóng)藥登記情況匯總Figure1-1SummaryofmicrobialpesticideregistrationinChina注：數(shù)據(jù)摘自2019年4月4日中國農(nóng)藥工業(yè)協(xié)會《穎態(tài)分析》

圖 2-1 TCS001 在光學顯微鏡下的形態(tài)e 2-1 Morphology of strain TCS001 under an optical mic芽孢時的細胞形態(tài)；B-TCS001 產(chǎn)生芽孢后的形態(tài)；C-TCS001 游離征果見表 2-2，表明菌株 TCS001 能分解利用葡萄糖，可水解淀粉和明膠，能利用葡萄糖產(chǎn)酸，原反應(yīng)和接觸酶反應(yīng)均呈陽性，甲基紅試驗和 H2SS001 的培養(yǎng)性狀、形態(tài)及生理生化特征，初步鑒108,109]。表 2- 2 生理生化試驗結(jié)果e 2-2 The results of physiological and biochemical identif結(jié) 果 項 目 驗 + 接觸酶試驗葡萄糖 + 硝酸鹽還原試驗乳糖 + V-P 試驗 蔗糖 + H2S 產(chǎn)氣試驗果糖 + 明膠液化 木糖 - 甲基紅試驗

甲基紅試驗和 H2S 反應(yīng)呈陰性（圖2-2）。根據(jù)菌株 TCS001 的培養(yǎng)性狀、形態(tài)及生理生化特征，初步鑒定其為芽孢桿菌屬（Bacillus）細菌[108,109]。表 2- 2 生理生化試驗結(jié)果Table 2-2 The results of physiological and biochemical identification項 目 結(jié) 果 項 目 結(jié) 果葡萄糖氧化發(fā)酵試驗 + 接觸酶試驗 +碳源利用試驗葡萄糖 + 硝酸鹽還原試驗 +乳糖 + V-P 試驗 +蔗糖 + H2S 產(chǎn)氣試驗 -果糖 + 明膠液化 +木糖 - 甲基紅試驗 -麥芽糖 + 氧化酶試驗 +甘露醇+淀粉水解試驗 +檸檬酸鹽試驗 -注：a：“+”表示陽性；注：b：“-”表示陰性。

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號：3585583