本研究以轉(zhuǎn)Psc-AFP基因抗病煙草(T-PA)、轉(zhuǎn)LJAMP2基因抗病煙草(T-Lj)、野生型親本煙草(WT)和轉(zhuǎn)空載質(zhì)粒煙草(T-Vi)根圍土樣為研究對(duì)象,研究煙草根際土壤可培養(yǎng)微生物數(shù)目、土壤酶活性、理化性質(zhì)和細(xì)菌群落多樣性的變化。同時(shí),還探討了連作2年、10年和15年甘藍(lán)根圍土壤微生物的變化。其研究結(jié)果如下:1.轉(zhuǎn)抗病基因煙草對(duì)土壤微生態(tài)的影響1.1轉(zhuǎn)抗病基因煙草對(duì)土壤可培養(yǎng)微生物數(shù)量、土壤酶活和理化性質(zhì)的影響(1)轉(zhuǎn)抗病煙草對(duì)土壤可培養(yǎng)微生物的影響根際土壤微生物數(shù)量隨著煙草的生長(zhǎng)發(fā)育而變化,在旺長(zhǎng)期或者成熟期達(dá)到最大。同一時(shí)期不同處理煙草微生物數(shù)量有所不同。前三個(gè)時(shí)期,T-PA抗病煙草與WT煙草比較,細(xì)菌、真菌和放線菌的數(shù)量均未達(dá)到顯著性差異,只在成熟期達(dá)顯著性差異;T-Lj抗病煙草在旺長(zhǎng)期達(dá)到顯著性差異,其他三個(gè)時(shí)期差異不大。表明T-PA、T-Lj抗病煙草對(duì)根際土壤可培養(yǎng)微生物數(shù)量具有影響,但是這種影響并不是持續(xù)不變的,會(huì)隨著生長(zhǎng)發(fā)育的不同而發(fā)生改變。.(2)T-PA抗病煙草對(duì)根際土壤酶活性的影響過氧化氫酶、蔗糖酶、酸性磷酸酶和脲酶隨著煙草的生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期不同而變化,在同一生...

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【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 轉(zhuǎn)基因植物的發(fā)展概況
        1.1.1 轉(zhuǎn)基因技術(shù)
        1.1.2 轉(zhuǎn)基因作物種植現(xiàn)狀
        1.1.3 轉(zhuǎn)補(bǔ)骨脂植物的研究進(jìn)展
        1.1.4 轉(zhuǎn)LJAMP2植物的研究進(jìn)展
    1.2 轉(zhuǎn)基因植物的安全性研究
    1.3 轉(zhuǎn)基因植物對(duì)土壤生態(tài)系統(tǒng)的影響
        1.3.1 GM植物對(duì)土壤理化性質(zhì)的影響
        1.3.2 GM植物對(duì)土壤酶活性的影響
        1.3.3 GM植物對(duì)土壤微生物的影響
    1.4 植物連作障礙
    1.5 連作植物對(duì)土壤生態(tài)系統(tǒng)的影響
    1.6 土壤微生物多樣性研究方法
        1.6.1 微生物平板培養(yǎng)法
        1.6.2 Biolog微平板法
        1.6.3 磷脂脂肪酸方法
        1.6.4 單鏈構(gòu)象多態(tài)性
        1.6.5 變性梯度凝膠電泳
2 引言
    2.1 論文立題依據(jù)
    2.2 論文技術(shù)路線
    2.3 研究?jī)?nèi)容及目的意義
        2.3.1 研究?jī)?nèi)容
        2.3.2 研究目的及意義
3 轉(zhuǎn)Psc-AFP抗病煙草不同生長(zhǎng)期對(duì)根際土壤環(huán)境的影響
    3.1 試驗(yàn)材料
        3.1.1 煙草的種植
        3.1.2 土壤的采集與保存
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 煙草根際土壤微生物數(shù)量的測(cè)定
        3.2.2 煙草根際土壤酶活的測(cè)定
        3.2.3 煙草根際土壤理化性質(zhì)的測(cè)定
        3.2.4 數(shù)據(jù)處理
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        3.3.1 微生物數(shù)量的變化
        3.3.2 土壤酶活性變化
        3.3.3 土壤理化性質(zhì)變化
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
4 PCR-DGGE分析轉(zhuǎn)Psc-AFP抗病煙草根際土壤細(xì)菌多樣性
    4.1 實(shí)驗(yàn)方法
        4.1.1 土壤微生物總DNA的提取
        4.1.2 土壤細(xì)菌16S rRNA基因的PCR擴(kuò)增
        4.1.3 變性梯度凝膠電泳DGGE
        4.1.4 染色
        4.1.5 DGGE條帶回收DNA片段并擴(kuò)增
        4.1.6 16S rRNA V3區(qū)基因片段克隆
        4.1.7 16S rRNA V3區(qū)基因片段(陽(yáng)性克隆)序列測(cè)定
        4.1.8 數(shù)據(jù)分析
    4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        4.2.1 土壤微生物總DNA的檢測(cè)
        4.2.2 細(xì)菌16S rRNA V3基因的PCR擴(kuò)增
        4.2.3 DGGE圖譜及特異條帶回收
        4.2.4 DGGE圖譜相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析
    4.3 討論
    4.4 小結(jié)
5 PCR-SSCP分析轉(zhuǎn)LJAMP2抗病煙草對(duì)土壤微生物的影響
    5.1 實(shí)驗(yàn)材料
    5.2 實(shí)驗(yàn)方法
        5.2.1 煙草根際土壤微生物數(shù)量的測(cè)定
        5.2.2 土壤微生物總DNA的提取
        5.2.3 細(xì)菌16S rRNA及V3區(qū)基因的PCR擴(kuò)增及檢測(cè)
        5.2.4 單鏈構(gòu)象多態(tài)性(SSCP)
    5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        5.3.1 土壤微生物數(shù)量的測(cè)定
        5.3.2 PCR-SSCP圖譜相關(guān)分析
    5.4 討論
    5.5 小結(jié)
6 PCR-DGGE分析武隆甘藍(lán)連作根際土壤細(xì)菌多樣性變化
    6.1 研究材料
    6.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果和分析
        6.2.1 土壤理化性質(zhì)
        6.2.2 甘藍(lán)連作對(duì)土壤酶活性的影響
        6.2.3 甘藍(lán)連作對(duì)土壤可培養(yǎng)微生物的影響
        6.2.4 甘藍(lán)連作土壤中細(xì)菌16S rDNA多態(tài)性分析
        6.2.5 細(xì)菌16S rDNA片段的序列分析
    6.3 討論
    6.4 小結(jié)
7 結(jié)論
    7.1 轉(zhuǎn)Psc-AFP抗病煙草對(duì)根際土壤環(huán)境及細(xì)菌多樣性的影響
    7.2 轉(zhuǎn)LJAMP2抗病煙草對(duì)根際土壤微生物的影響
    7.3 連作甘藍(lán)對(duì)根際土壤環(huán)境及細(xì)菌多樣性的影響
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
研究生期間發(fā)表論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3544211