本研究從長期受六六六污染的土壤中分離到3株能以y-HCH為唯一碳源生長的六六六降解菌,分別命名為BHC-B、BHC-C 和 BHC-D。測定了此三株六六六降解菌的16S rRNA基因序列,提交至GenBank,其登陸號分別為No.KC191573, No. KC191574和No.KC191575。系統(tǒng)發(fā)育分析顯示,菌株BHC-B, BHC-C 和 BHC-D聚成一枝,表現(xiàn)出很高的相似性;與該菌株16S rRNA基因序列相似性較高的菌株都是研究得較多的六六六降解菌株,分別是Sphingobium japonicum UT26T, Sphingobium francense Sp+T 和 Sphingobium indicum B90AT,相似性都大于99%（99.10%到99.72%）。綜合它們的形態(tài)和生理生化特征,以及系統(tǒng)進化分析,將菌株BHC-B、BHC-C和BHC-D皆鑒定為鞘脂菌屬（Sphingobium sp.）。由于這些菌株相互之間的16S rRNA基因序列相似性大于99%,因此從這個層面上區(qū)分它們比較困難。ERIC-PCR是一種常用于分析腸道微生物菌群結構的方法,我們嘗試... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
符號與縮略語說明
前言
文獻綜述
    第一章 有機氯農(nóng)藥的污染及生物修復
        1. 有機氯農(nóng)藥的污染及殘留狀況
        2 生物修復
            2.1 生物修復的概念
            2.2 生物修復的主要主力軍——微生物
            2.3 微生物降解的機制
    第二章 六六六生物降解研究進展
        1. 六六六的理化性質(zhì)
        2 六六六的微生物降解
            2.1 六六六微生物降解研究情況
            2.2 六六六好氧微生物降解途徑研究
    第三章 微生物多樣性分析及ERIC-PCR技術應用
        1 ERIC概述
        2 ERIC-PCR的建立
        3 ERIC-PCR在微生物分類鑒定中的應用
實驗部分
    第一章 六六六降解菌的分離篩選
        1 材料與方法
            1.1 培養(yǎng)基與試劑
            1.2 六六六降解菌的分離和篩選
            1.3 降解菌株的生理生化指標測定
            1.4 降解菌株16S rRNA基因的擴增與分析
            1.5 降解菌株的系統(tǒng)發(fā)育分析
            1.6 HCH降解菌的ERIC-PCR分析
            1.7 六六六氣相色譜檢測
        2 結果與分析
            2.1 六六六降解菌株的分離篩選
            2.2 降解菌株的形態(tài)
            2.3 六六六降解菌株的生理生化特征
            2.4 降解菌株的16S rRNA基因擴增
            2.5 六六六降解菌株的系統(tǒng)進化分析
            2.6 環(huán)境條件對降解菌株生長的影響
        3 本章小結
    第二章 六六六降解菌降解特性研究
        1 材料和方法
            1.1 菌株、培養(yǎng)基和試劑
            1.2 六六六降解菌中l(wèi)in基因分析
            1.3 六六六含量的測定
        2 結果與分析
            2.1 溫度對BHC-B,BHC-C和BHC-D降解γ-HCH的影響
            2.2 pH值對BHC-B,BHC-C和BHC-D降解γ-HCH的影響
            2.3 通氣量對菌株BHC-B、BHC-C和BHC-D降解γ-HCH的影響
            2.4 接種量對BHC-B,BHC-C和BHC-D降解γ-HCH的影響
            2.5 菌株BHC-B,BHC-C和BHC-D菌株對六六六4種主要異構體(α-、β-γ-和δ-HCH)的降解
            2.6 降解菌株BHC-B、BHC-C和BHC-D的lin基因分析
        3 本章小結
    第三章 菌株Sphingomonas sp.BHC-A降解δ-六六六的代謝途徑的研究
        1 材料與方法
            1.1 試劑與培養(yǎng)基
            1.2 菌株與質(zhì)粒
            1.3 菌株BHC-A中l(wèi)inA基因的敲除
            1.4 BHC-A中l(wèi)inB和敲除菌株BHC-A-△linA粗酶液的制備
            1.5 粗酶反應條件與提取
            1.6 氣質(zhì)聯(lián)機實驗
            1.7 基因序列的測定與分析
        2 結果與分析
            2.1 菌株Sphingomonas sp.BHC-A中l(wèi)inA基因敲除載體的構建
            2.2 敲除BHC-A菌株的linA基因
            2.3 敲除菌株Sphingomonas sp.BHC-A-AlinA降解δ-HCH的產(chǎn)物檢測
            2.4 BHC-A中與降解δ-HCH相關基因的分析
            2.5 與δ-HCH降解相關的可能基因的驗證
        3. 本章小結
參考文獻
全文總結
本論文主要創(chuàng)新點
附錄 文中所用培養(yǎng)基及試劑配方
攻讀碩士學位期間發(fā)表的論女
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3309451