桔小實蠅Bactrocera dorsalis（Hendel）是一種世界性檢疫害蟲,具有寄主范圍廣、擴散速度快、適應力強等特點,對我國水果和蔬菜等重要經(jīng)濟作物構成嚴重威脅。輻照不育技術能夠一定程度上控制桔小實蠅種群,但經(jīng)輻射的昆蟲存在穩(wěn)定性差、交配競爭力低、生活史短等缺點。轉基因不育技術是近幾年提出的防控害蟲的新思路,結合piggyBac的轉座功能和四環(huán)素調控系統(tǒng),通過驅動載體（driver）中的胚胎早期表達基因的啟動子調控效應載體（effector）中細胞凋亡基因的表達,在不存在四環(huán)素時可以啟動昆蟲胚胎期“死亡開關”,使其在胚胎期死亡,從而達到“不育”目的。在果蠅上首次獲得了胚胎條件致死品系后,該系統(tǒng)已被成功轉移到實蠅科的地中海實蠅和加勒比按實蠅上,這說明在桔小實蠅上建立轉基因不育技術體系具有可行性。本研究首次克隆得到了構建桔小實蠅胚胎條件致死品系所需的基本分子元件：與胚胎期囊胚細胞化相關的serendipity alpha （srya）基因的cDNA全長及其5’端上游序列和與細胞凋亡相關的頭部退化缺陷基因（head involution defective, hid）,并利用得到的... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學院北京市

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

四環(huán)素可抑制的雙元件致死系統(tǒng)及單元件致死系統(tǒng)(GongeZfl/.，2005)

Schetelig et a/.(2009)以piggyBac為轉座子利用地中海實繩的srya基因與hid基因分別構建了驅動載體與效應載體(圖1.2)。5

產(chǎn)生tTA蛋白，該蛋白可結合TRE引發(fā)下游致死基因的表達，使子代昆蟲在胚胎期死亡。但是，在有四環(huán)素的情況下，tTA蛋白無法作用于TRE,致死基因的表達被抑制(圖1.3)。目前在實驗室，依靠向昆蟲詞料中添加四環(huán)素來維持轉基因品系。無四環(huán)素條件下_ “[‘ V [一 ?參胚胎時—異 子 ITA四環(huán)素四環(huán)素條件下 i[^ il H ‘ ^ ? [ >胚胎時期特、一tTA ..圖1.3基于四環(huán)素可抑制的雙元件系統(tǒng)的胚胎條件致死Fig. 1.3 Embryonic conditional lethality based on tetracycline-repressible two-component system值得一提的是，在果繩中，若將交配前的驅動品系與效應品系成蟲用含四環(huán)素的飼料喂養(yǎng)，由于母體傳遞效應，交配后產(chǎn)生的子代受殘余四環(huán)素影響關閉了胚胎致死系統(tǒng)，卵期沒有致死效果。但是在地中海實繩中，母體的殘余四環(huán)素對子代胚胎致死系統(tǒng)的關閉不起作用，依然能達到胚胎致死的效果(Schetelig and Handler, 2012a)。這就為害蟲的野外釋放試驗提出了新的要求，艮口釋放前最后一代成蟲是否需要在四環(huán)素培養(yǎng)基上飼養(yǎng)，或者需要用多大濃度的四環(huán)素飼養(yǎng)取決于不同的昆蟲，甚至同種昆蟲的不同品系也有區(qū)別。目前該系統(tǒng)的致死效應已在果繩及實幡屬的兩種昆蟲上驗證

【參考文獻】：
期刊論文
[1]橘小實蠅誘殺及不育技術的研究進展[J]. 張小亞,黃振東,陳國慶.  浙江柑橘. 2012(03)
[2]橘小實蠅蛋白餌劑的生物測定[J]. 王波,季清娥,楊建全,黃居昌,陳家驊.  云南農(nóng)業(yè)大學學報(自然科學版). 2010(04)
[3]輻射不育技術在害蟲防治中的應用[J]. 王建斌.  西南林學院學報. 2010(S1)
[4]松墨天牛輻射不育效應研究[J]. 牟建軍,吾中良,陳衛(wèi)平,張永安,蔣平.  中國森林病蟲. 2009(01)
[5]桔小實蠅研究進展[J]. 張彬,劉映紅,趙嵐嵐,周旭.  中國農(nóng)學通報. 2008(11)
[6]轉基因昆蟲的應用研究進展[J]. 周秀娟,牛長纓,雷朝亮.  昆蟲知識. 2008(03)
[7]橘小實蠅遺傳性別品系的建立及雄性不育技術[J]. 季清娥,侯偉榮,陳家驊.  昆蟲學報. 2007(10)
[8]利用GARP生態(tài)位模型預測桔小實蠅（Bactrocera dorsalis）在中國的適生區(qū)域[J]. 周國梁,陳晨,葉軍,胡白石,劉鳳權.  生態(tài)學報. 2007(08)
[9]橘小實蠅復合體分類學研究進展[J]. 陳鵬,葉輝.  昆蟲知識. 2007(01)
[10]桔小實蠅生物學特點及其防治研究概述[J]. 謝琦,張潤杰.  生態(tài)科學. 2005(01)



本文編號：3246407