土壤微生物總DNA經(jīng)試劑盒提取,使用CODEHOP引物進(jìn)行木聚糖酶基因編碼區(qū)核心序列進(jìn)行擴(kuò)增,根據(jù)所擴(kuò)增序列設(shè)計(jì)hiTAIL-PCR特異性引物,最終克隆了1個(gè)編碼區(qū)長(zhǎng)度為1 284 bp的新穎木聚糖酶基因。生物信息學(xué)分析表明,該基因編碼蛋白質(zhì)氨基酸序列長(zhǎng)度為427 aa,分子量為47 398.91 Da,理論等電點(diǎn)（pI）為8.99,是一個(gè)不含跨膜區(qū)域的親水性蛋白。 

【文章來(lái)源】：生物化工. 2020,6(01)

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

蛋白質(zhì)跨膜區(qū)域分析

土壤中因富含腐殖酸、多酚等雜質(zhì)，其高質(zhì)量微生物總DNA的提取頗有困難困難較大。本研究使用試劑盒法提取總DNA。所提樣品經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，結(jié)果如圖1所示。發(fā)現(xiàn)其條帶單一，泳道內(nèi)無(wú)彌散、降解現(xiàn)象，初步認(rèn)為可滿足PCR擴(kuò)增對(duì)模板質(zhì)量的要求。為了進(jìn)一步驗(yàn)證模板質(zhì)量，以微生物16S rRNA通用引物27F/1525R擴(kuò)增，PCR產(chǎn)物經(jīng)電泳檢測(cè)，結(jié)果如圖2所示�？梢钥吹綌U(kuò)增產(chǎn)物條帶清晰、符合預(yù)期大小，因此所提取DNA可滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求。2.2 木聚糖酶基因核心序列的PCR擴(kuò)增

16S rRNAPCR檢測(cè)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3233250