納米傳感界面的構(gòu)建及其上的轉(zhuǎn)基因DNA成分的檢測研究
發(fā)布時間:2021-05-13 22:40
轉(zhuǎn)基因生物(GMO)可增加作物產(chǎn)量,增強作物抗蟲害、抗病毒等能力,提高農(nóng)產(chǎn)品耐貯性。同時,其安全性及對環(huán)境的潛在威脅引起了國際社會和人民群眾的廣泛關(guān)注。因此,多個國家出臺相關(guān)政策對轉(zhuǎn)基因生物和食品加強了監(jiān)管而對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的簡單和快速的定性、定量分析方法是監(jiān)管不可或缺的工具。由于大多數(shù)轉(zhuǎn)基因植物是將花椰菜花葉病毒啟動子(Ca MV35S)或根癌農(nóng)桿菌胭脂堿合酶終止子(NOS)基因序列整合到自身的基因組內(nèi)。因此,本研究以轉(zhuǎn)基因作物DNA中的Ca MV35S啟動子以及NOS終止子的基因序列作為檢測的目標物,基于納米復(fù)合材料來構(gòu)建納米傳感界面,對目標序列進行定量檢測。本研究內(nèi)容主要包括以下兩個部分:一、基于Fe3O4@Au NP@c DNA@H-GN納米復(fù)合物傳感界面的構(gòu)建及比色法檢測轉(zhuǎn)基因植物中的NOS終止子序列這項工作設(shè)計了一種簡單且無標簽的比色生物傳感器,用于檢測轉(zhuǎn)基因植物中的終止子胭脂堿合酶。我們制備了一種納米復(fù)合材料用來構(gòu)建生物傳感界面,該復(fù)合材料由金納米顆粒摻雜磁性Fe3O4納米顆粒(Fe
【文章來源】:合肥工業(yè)大學(xué)安徽省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:71 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
致謝
摘要
abstract
第一章 緒論
1.1 轉(zhuǎn)基因及轉(zhuǎn)基因食品
1.2 基于核酸檢測的轉(zhuǎn)基因成分的檢測
1.2.1 基于PCR/多重PCR的方法
1.2.2 基于核酸生物傳感界面構(gòu)建的檢測方法
1.2.3 光學(xué)傳感器
1.2.4 電化學(xué)傳感器
1.2.5 電化學(xué)與光學(xué)傳感器的檢測方法
1.3 基于納米材料構(gòu)建生物傳感界面
1.3.1 金屬及金屬氧化物納米粒子
1.3.2 導(dǎo)電高分子聚合物
1.3.3 碳納米材料
1.4 DNA傳感器中核酸輔助擴增策略
1.4.1 滾環(huán)擴增
1.4.2 雜交鏈反應(yīng)
1.4.3 DNA步行器
1.4.4 點觸發(fā)鏈置換反應(yīng)
1.5 本論文研究的目的與意義
第二章 基于Fe_3O_4@AuNP@cDNA@H-GN 納米復(fù)合物傳感界面的構(gòu)建及比色法檢測轉(zhuǎn)基因植物中的 NOS
2.1 引言
2.2 實驗部分
2.2.1 材料與試劑
2.2.2 實驗儀器
2.2.3 H-GN的合成
2.2.4 Fe_3O_4和Fe_3O_4@Au納米材料的合成
2.2.5 DNA生物功能化的Fe_3O_4@Au納米復(fù)合材料的合成
2.2.6 Fe_3O_4@Au@cDNA@H-GN納米復(fù)合材料的合成
2.2.7 比色檢測NOS基因序列
2.2.8 實際樣品的制備和檢測
2.3 實驗結(jié)果與討論
2.3.1 Fe_3O_4@Au@cDNA@H-GN納米復(fù)合材料的表征
2.3.2 NOS基因序列檢測策略的可性分析
2.3.3 實驗參數(shù)的優(yōu)化
2.3.4 檢測目標NOS序列的分析性能
2.3.5 選擇性和穩(wěn)定性
2.3.6 實際樣品中NOS序列的檢測
2.4 小結(jié)
第三章 基于cPPy-hemin和點觸發(fā)鏈置換反應(yīng)的電化學(xué)CaMV35S轉(zhuǎn)基因序列生物傳感器
3.1 引言
3.2 實驗部分
3.2.1 材料與試劑
3.2.2 實驗儀器
3.2.3 cPPy-hemin的制備
3.2.4 DNA-cPPy-hemin納米信標的制備
3.2.5 DNA生物傳感器的制備
3.2.6 電化學(xué)測量
3.3 結(jié)果與討論
3.3.1 納米材料與傳感器組裝的表征
3.3.2 傳感原理和可行性分析
3.3.3 實驗條件的優(yōu)化
3.3.4 生物傳感器的分析性能
3.3.5 傳感器的選擇性
3.4 小結(jié)
第四章 結(jié)論和展望
4.1 結(jié)論
4.2 展望
參考文獻
攻讀碩士學(xué)位期間的學(xué)術(shù)活動及成果情況
【參考文獻】:
期刊論文
[1]轉(zhuǎn)基因的“前世今生”[J]. 湖南省農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因管理公眾號. 湖南農(nóng)業(yè). 2017(09)
[2]熒光納米生物傳感器研究進展[J]. 肖正鳳,陸璐,馬珂珂,錢云霞,王文珍. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展. 2014(29)
[3]轉(zhuǎn)基因食品檢測技術(shù)探討[J]. 施向東,林新勤,梁惠寧,龍兮. 中國公共衛(wèi)生管理. 2008(01)
本文編號:3184831
【文章來源】:合肥工業(yè)大學(xué)安徽省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:71 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
致謝
摘要
abstract
第一章 緒論
1.1 轉(zhuǎn)基因及轉(zhuǎn)基因食品
1.2 基于核酸檢測的轉(zhuǎn)基因成分的檢測
1.2.1 基于PCR/多重PCR的方法
1.2.2 基于核酸生物傳感界面構(gòu)建的檢測方法
1.2.3 光學(xué)傳感器
1.2.4 電化學(xué)傳感器
1.2.5 電化學(xué)與光學(xué)傳感器的檢測方法
1.3 基于納米材料構(gòu)建生物傳感界面
1.3.1 金屬及金屬氧化物納米粒子
1.3.2 導(dǎo)電高分子聚合物
1.3.3 碳納米材料
1.4 DNA傳感器中核酸輔助擴增策略
1.4.1 滾環(huán)擴增
1.4.2 雜交鏈反應(yīng)
1.4.3 DNA步行器
1.4.4 點觸發(fā)鏈置換反應(yīng)
1.5 本論文研究的目的與意義
第二章 基于Fe_3O_4@AuNP@cDNA@H-GN 納米復(fù)合物傳感界面的構(gòu)建及比色法檢測轉(zhuǎn)基因植物中的 NOS
2.1 引言
2.2 實驗部分
2.2.1 材料與試劑
2.2.2 實驗儀器
2.2.3 H-GN的合成
2.2.4 Fe_3O_4和Fe_3O_4@Au納米材料的合成
2.2.5 DNA生物功能化的Fe_3O_4@Au納米復(fù)合材料的合成
2.2.6 Fe_3O_4@Au@cDNA@H-GN納米復(fù)合材料的合成
2.2.7 比色檢測NOS基因序列
2.2.8 實際樣品的制備和檢測
2.3 實驗結(jié)果與討論
2.3.1 Fe_3O_4@Au@cDNA@H-GN納米復(fù)合材料的表征
2.3.2 NOS基因序列檢測策略的可性分析
2.3.3 實驗參數(shù)的優(yōu)化
2.3.4 檢測目標NOS序列的分析性能
2.3.5 選擇性和穩(wěn)定性
2.3.6 實際樣品中NOS序列的檢測
2.4 小結(jié)
第三章 基于cPPy-hemin和點觸發(fā)鏈置換反應(yīng)的電化學(xué)CaMV35S轉(zhuǎn)基因序列生物傳感器
3.1 引言
3.2 實驗部分
3.2.1 材料與試劑
3.2.2 實驗儀器
3.2.3 cPPy-hemin的制備
3.2.4 DNA-cPPy-hemin納米信標的制備
3.2.5 DNA生物傳感器的制備
3.2.6 電化學(xué)測量
3.3 結(jié)果與討論
3.3.1 納米材料與傳感器組裝的表征
3.3.2 傳感原理和可行性分析
3.3.3 實驗條件的優(yōu)化
3.3.4 生物傳感器的分析性能
3.3.5 傳感器的選擇性
3.4 小結(jié)
第四章 結(jié)論和展望
4.1 結(jié)論
4.2 展望
參考文獻
攻讀碩士學(xué)位期間的學(xué)術(shù)活動及成果情況
【參考文獻】:
期刊論文
[1]轉(zhuǎn)基因的“前世今生”[J]. 湖南省農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因管理公眾號. 湖南農(nóng)業(yè). 2017(09)
[2]熒光納米生物傳感器研究進展[J]. 肖正鳳,陸璐,馬珂珂,錢云霞,王文珍. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展. 2014(29)
[3]轉(zhuǎn)基因食品檢測技術(shù)探討[J]. 施向東,林新勤,梁惠寧,龍兮. 中國公共衛(wèi)生管理. 2008(01)
本文編號:3184831
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