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桃蚜報(bào)警信息素結(jié)合蛋白的鑒定及功能分析

發(fā)布時(shí)間:2021-04-27 16:52
  桃蚜(Myzus persicae)是一種具有嚴(yán)重破壞性的多食性害蟲。除直接取食為害外,可以傳播100多種植物病毒病,包括馬鈴薯卷葉病毒,黃瓜花葉病毒。目前防治蚜蟲主要利用廣譜性的殺蟲劑,主要是有機(jī)磷酸酯,擬除蟲菊酯和新煙堿類殺蟲劑。殺蟲劑的過(guò)度使用不僅會(huì)使桃蚜產(chǎn)生抗藥性,而且會(huì)造成環(huán)境污染。因此,需要開(kāi)發(fā)一種新型的蚜蟲防控技術(shù)。昆蟲利用它們靈敏的嗅覺(jué)器官,主要是觸角來(lái)感知世界。同其他昆蟲一樣,蚜蟲利用植物揮發(fā)物和物種間的特異性化學(xué)信號(hào)來(lái)定位寄主植物,交配和躲避天敵。如當(dāng)蚜蟲受到外界攻擊時(shí)會(huì)釋放報(bào)警信息素來(lái)通知周圍其他的蚜蟲進(jìn)行有效躲避,甚至攻擊捕食者。在嗅覺(jué)識(shí)別過(guò)程中,氣味結(jié)合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)和化學(xué)感受蛋白(chemosensory proteins,CSPs)扮演著重要角色。因此,我們可以通過(guò)挖掘桃蚜的嗅覺(jué)基因,闡明蚜蟲的嗅覺(jué)機(jī)制,從而阻斷蚜蟲的化學(xué)通訊達(dá)到害蟲防治的目的。本研究首先開(kāi)發(fā)了桃蚜的人工飼料,并能成功飼養(yǎng)10代,這為開(kāi)展后續(xù)試驗(yàn)提供了統(tǒng)一化的標(biāo)準(zhǔn)試蟲。通過(guò)桃蚜的基因組和轉(zhuǎn)錄組分析,鑒定到OBPs和CSPs基因各9個(gè)。通過(guò)... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】:83 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 昆蟲人工飼料的研究概況
    1.2 昆蟲觸角感受氣味分子的機(jī)制
    1.3 昆蟲氣味結(jié)合蛋白的研究進(jìn)展
        1.3.1 氣味結(jié)合蛋白的鑒定
        1.3.2 氣味結(jié)合蛋白的結(jié)構(gòu)和分布
        1.3.3 氣味結(jié)合蛋白的功能研究
    1.4 昆蟲化學(xué)感受蛋白的研究進(jìn)展
        1.4.1 化學(xué)感受蛋白的鑒定
        1.4.2 化學(xué)感受蛋白的結(jié)構(gòu)和分布
        1.4.3 化學(xué)感受蛋白的功能研究
    1.5 研究目的和意義
    1.6 研究?jī)?nèi)容
第二章 桃蚜人工飼料的開(kāi)發(fā)
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 供試?yán)ハx
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器設(shè)備
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 飼料配方
        2.2.2 飼蚜裝置
        2.2.3 人工飼料和煙草飼養(yǎng)的桃蚜對(duì)EBF的行為學(xué)測(cè)定
        2.2.4 人工飼料和煙草飼養(yǎng)的桃蚜對(duì)EBF的觸角EAG電生理反應(yīng)測(cè)定
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 桃蚜人工飼料飼養(yǎng)效果評(píng)價(jià)
        2.3.2 行為學(xué)測(cè)定結(jié)果
        2.3.3 EAG電生理反應(yīng)測(cè)定結(jié)果
    2.4 討論
第三章 桃蚜OBPs和CSPs基因的鑒定及比較分析
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 供試?yán)ハx
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 主要儀器設(shè)備
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 桃蚜OBPs和CSPs基因在轉(zhuǎn)錄組中的鑒定
            3.2.1.1 樣品的收集
            3.2.1.2 總RNA提取
            3.2.1.3 CDNA文庫(kù)的構(gòu)建和測(cè)序
            3.2.1.4 生物信息學(xué)分析
            3.2.1.5 桃蚜OBPS和CSPS基因在轉(zhuǎn)錄組和基因組中的鑒定
            3.2.1.6 桃蚜OBPS和CSPS基因的克隆驗(yàn)證
        3.2.2 序列和進(jìn)化分析
        3.2.3 桃蚜OBPs和CSPs基因在不同組織的表達(dá)分析
        3.2.4 桃蚜OBPs和CSPs的基因結(jié)構(gòu)分析
        3.2.5 Motif分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序及功能注釋
        3.3.2 桃蚜OBPs和CSPs基因在轉(zhuǎn)錄組和基因組中的鑒定
        3.3.3 序列和進(jìn)化分析
        3.3.4 桃蚜OBPs和CSPs基因在不同組織中的表達(dá)分析
        3.3.5 桃蚜OBPs和CSPs的基因結(jié)構(gòu)分析
        3.3.6 Motif分析
    3.4 討論
第四章 桃蚜氣味結(jié)合蛋白MperOBPs的克隆、表達(dá)及結(jié)合特性分析
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.1 供試?yán)ハx
        4.1.2 主要試劑
        4.1.3 主要儀器設(shè)備
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 cDNA模板的制備
        4.2.2 目的基因的克隆和表達(dá)
        4.2.3 蛋白純化
        4.2.4 熒光競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合實(shí)驗(yàn)
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 桃蚜氣味結(jié)合蛋白MperOBPs的克隆、表達(dá)和純化
        4.3.2 桃蚜氣味結(jié)合蛋白MperOBPs結(jié)合特性分析
    4.4 討論
第五章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]中國(guó)蚜蟲類昆蟲物種多樣性與分布特點(diǎn)(半翅目,蚜總科)[J]. 劉征,黃曉磊,姜立云,喬格俠.  動(dòng)物分類學(xué)報(bào). 2009(02)
[2]蚜蟲寄主植物與取食部位的多樣性[J]. 方燕,喬格俠,張廣學(xué).  動(dòng)物分類學(xué)報(bào). 2006(01)
[3]昆蟲觸角氣味結(jié)合蛋白的研究進(jìn)展[J]. 王桂榮,郭予元,吳孔明.  昆蟲學(xué)報(bào). 2002(01)
[4]麥長(zhǎng)管蚜全純?nèi)斯わ暳系难芯縖J]. 陳巨蓮,倪漢祥,丁紅建,孫京瑞.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2000(03)
[5]以化學(xué)純飼料飼養(yǎng)北京的桃蚜[J]. 柯禮道,欽俊德.  昆蟲學(xué)報(bào). 1983(01)
[6]昆蟲的人工飼料[J]. 忻介六.  昆蟲知識(shí). 1976(02)

碩士論文
[1]苜蓿盲蝽嗅覺(jué)相關(guān)基因的發(fā)掘及功能分析[D]. 谷少華.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2010



本文編號(hào):3163822

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