刺吸式口器害蟲是農(nóng)業(yè)和林業(yè)中的重要害蟲。這些害蟲通常具有繁殖力快,世代多,蟲口易反彈,抗藥性強(qiáng)和分布廣。昆蟲病原真菌從昆蟲體壁直接侵入的方式,使得其被認(rèn)為在刺吸式口器害蟲的防治上可作為化學(xué)殺蟲劑的替代物。本文從安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)安徽省微生物防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室菌種庫中篩選出一株昆蟲病原真菌玫煙色棒束孢菌株Ifu-13-a,通過雙相發(fā)酵研究其發(fā)酵技術(shù)。每8h定期取樣,檢測(cè)其菌絲生物量和生長(zhǎng)狀態(tài)。結(jié)果顯示,該菌株在SDY液體培養(yǎng)基中于25℃下液體發(fā)酵,在第104h菌絲生物量達(dá)到最大值,然后逐漸下降。此時(shí)顯微形態(tài)觀察也證實(shí)此時(shí)發(fā)酵液中出現(xiàn)大量形態(tài)清晰的長(zhǎng)菌絲體及大量芽生孢子,因此確定Ifu-13-a在該培養(yǎng)條件下的最佳液體發(fā)酵時(shí)間為104h,并且此時(shí)的發(fā)酵液可以在隨后的固體發(fā)酵中用作液體種子。在固體發(fā)酵工藝研究中,前期通過罐頭瓶發(fā)酵對(duì)培養(yǎng)基配方進(jìn)行了篩選,篩選獲得的最優(yōu)基礎(chǔ)培養(yǎng)基為11%麥麩、76%棉籽殼,其產(chǎn)孢量可達(dá)2.15×10~9孢子/g。在后繼的淺盤發(fā)酵工藝中,增加了江西天人生態(tài)的企業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)培養(yǎng)基進(jìn)行對(duì)照比較,結(jié)果表明,篩選得到的最優(yōu)固體培養(yǎng)基其在產(chǎn)孢能力上要高于企業(yè)生產(chǎn)培養(yǎng)基,單位面積的固體發(fā)酵效率提高了21.8%。另外,研究發(fā)現(xiàn)固體培養(yǎng)的堆量極大影響著培養(yǎng)基的料溫,2cm和4cm堆量有著完全不同的料溫曲線。在環(huán)境溫度18℃下,4cm堆量的淺盤發(fā)酵工藝中,其發(fā)酵溫度最高上升了5-6℃。從室內(nèi)生物測(cè)定結(jié)果來看,Ifu-13-a菌株對(duì)多目標(biāo)刺吸式口器害蟲具有很高的毒力水平,但仍存在較明顯的寄主�；�。在1.0×10~6孢子/ml接種濃度下,Ifu-13-a菌株對(duì)溫室白粉虱、棉蚜和小綠葉蟬成蟲的累積死亡率均達(dá)100%,顯示出了Ifu-13-a菌株對(duì)這3種目標(biāo)害蟲的高致病力;從致死中時(shí)LT_(50)來看,Ifu-13-a菌株對(duì)溫室白粉虱、小綠葉蟬和棉蚜成蟲的致死中時(shí)均在4-5d;而梨冠網(wǎng)蝽、繡線菊蚜和紫薇長(zhǎng)斑蚜在1.0×10~8孢子/ml濃度下,累積死亡率才達(dá)到81.25%、61.4%和86.36%,致死中時(shí)在6-8d。在環(huán)境相對(duì)濕度低的溫室試驗(yàn)中,采用1.0×10~7個(gè)孢子/ml的施用量通過低量噴霧來控制兩種目標(biāo)害蟲:溫室白粉虱和棉蚜。試驗(yàn)期間對(duì)照區(qū)的棉蚜的蟲口密度一直處于上升狀態(tài);初始蟲口密度為40頭/株,到第13d時(shí),增長(zhǎng)至118頭/株,而處理區(qū)蟲口密度則從40頭/株下降至36頭/株,校正防效為46.39%。與棉蚜不同,Ifu-13-a菌株對(duì)溫室白粉虱的防治使得蟲口密度下降明顯。溫室白粉虱在噴霧防治第4d時(shí),其蟲口密度由150頭/株下降到36頭/株,然后就處于一定的蟲口波動(dòng)狀態(tài);在第13d,其蟲口密度為78頭/株,校正防效為92.86%。玫煙色棒束孢Ifu-13-a菌株在環(huán)境相對(duì)濕度較高的的田間試驗(yàn)中,在1.0×10~7孢子/ml濃度下噴霧防治棉蚜,棉蚜種群在第10d時(shí)的蟲口減退率和校正防效分別達(dá)到96.2%和95.9%,表現(xiàn)出優(yōu)異的田間防治效果。溫室試驗(yàn)與田間開放地試驗(yàn)的不同防治效果進(jìn)一步確證了環(huán)境濕度是影響真菌侵染過程與防治效率的重要性。室內(nèi)生測(cè)和田間試驗(yàn)驗(yàn)證了玫煙色棒束孢Ifu-13-a菌株在對(duì)多種刺吸式害蟲表現(xiàn)出的高毒力水平,證明了其對(duì)粉虱、葉蟬、蚜蟲等多目標(biāo)害蟲的巨大控制潛力,適合作為生物殺蟲劑開發(fā)。
【學(xué)位單位】：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：S476.12
【部分圖文】：

圖 3-1 菌株室內(nèi)致病力測(cè)定Fig.3-1 Laboratory assessment on fungal pathogenicity注：左圖是人工氣候箱，右圖是聚乙烯盒。Note: The left picture is an artificial climate box, and the right picture is a polyethylene box.3.2.7 玫煙色棒束孢 Ifu-13-a 菌株的溫室試驗(yàn)3.2.7.1 溫室試驗(yàn)設(shè)計(jì)于九月中旬對(duì)棉蚜和溫室白粉虱成蟲進(jìn)行溫室試驗(yàn)。每個(gè)處理設(shè)置 6 組重復(fù)，分別對(duì)棉蚜、溫室白粉虱成蟲設(shè)置兩個(gè)處理組：對(duì)照組：噴灑 0.05%吐溫 80 作為空白對(duì)照（CK）。處理組：噴灑 1.0×107孢子/ml 孢子懸浮液。

圖 3-1 菌株室內(nèi)致病力測(cè)定Fig.3-1 Laboratory assessment on fungal pathogenicity注：左圖是人工氣候箱，右圖是聚乙烯盒。Note: The left picture is an artificial climate box, and the right picture is a polyethylene box.3.2.7 玫煙色棒束孢 Ifu-13-a 菌株的溫室試驗(yàn)3.2.7.1 溫室試驗(yàn)設(shè)計(jì)于九月中旬對(duì)棉蚜和溫室白粉虱成蟲進(jìn)行溫室試驗(yàn)。每個(gè)處理設(shè)置 6 組重復(fù)，分別對(duì)棉蚜、溫室白粉虱成蟲設(shè)置兩個(gè)處理組：對(duì)照組：噴灑 0.05%吐溫 80 作為空白對(duì)照（CK）。處理組：噴灑 1.0×107孢子/ml 孢子懸浮液。

繞每棵植株噴霧兩圈。噴霧接種后第二天開始每天觀察棉蚜和溫室白粉虱，記錄蟲口數(shù)，并將死蟲挑出，放在培養(yǎng)皿中保濕培養(yǎng)，以確定真菌侵染情在溫室內(nèi)放置溫濕度計(jì)，每天觀察并記錄溫度和濕度，記錄完畢后進(jìn)行校零.8 玫煙色棒束孢 Ifu-13-a 菌株的田間試驗(yàn).8.1 田間試驗(yàn)設(shè)計(jì)于九月下旬對(duì)棉蚜進(jìn)行田間試驗(yàn)。每個(gè)處理設(shè)置 10 組重復(fù)，每組 50 只棉對(duì)棉蚜成蟲設(shè)置兩個(gè)處理組：對(duì)照組：噴灑 0.05%吐溫 80 作為空白對(duì)照（CK）。處理組：噴灑 1.0×107孢子/ml 孢子懸浮液。
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2851353