發(fā)布時間：2020-10-20 10:29

　　 核盤菌(Sclerotinia sclerotiorum)和指狀青霉菌(Penicillium digitatum)都屬于危害極大的死體營養(yǎng)型植物病原真菌,核盤菌引起油菜、花生、大豆等作物的菌核病,指狀青霉菌引起柑橘綠霉病的發(fā)生。目前丙環(huán)唑在我國僅以混劑形式登記用于油菜菌核病的防治,對柑橘綠霉病的防治尚未登記。本論文主要研究了丙環(huán)唑?qū)吮P菌和指狀青霉菌的生物活性和對生理方面的影響,對科學利用丙環(huán)唑防治這兩種病原菌具有一定的理論和實踐指導意義。測定了丙環(huán)唑?qū)Σ勺园不帐〉暮吮P菌的有效中濃度(EC_(50))值,建立了核盤菌對丙環(huán)唑的相對敏感性基線。2008年(N=75)和2014年(N=75)菌株EC_(50)值的頻率分布均符合正態(tài)分布,K-S正態(tài)檢驗P值分別為0.119和0.502。2008年和2014年菌株的EC_(50)平均值分別為0.338±0.174μg/mL(SD)和0.315±0.135μg/mL(SD),兩年之間無顯著差異(P=0.375)。40μg/mL丙環(huán)唑?qū)ε柙杂筒司瞬”Ｗo作用防效為82.4%,80μg/mL的丙環(huán)唑?qū)ε柙杂筒松暇瞬〉闹委熥饔梅佬?0.7%。光學顯微鏡觀察顯示在含0.4μg/mL丙環(huán)唑的PDA上生長的菌絲與對照相比頂端分支增多,節(jié)間縮短。丙環(huán)唑可以顯著(P0.05)提高核盤菌菌絲細胞膜的通透性和菌絲細胞內(nèi)甘露聚糖的含量。丙環(huán)唑?qū)?18株指狀青霉菌EC_(50)自然對數(shù)值的頻率分布表明18株菌株已對丙環(huán)唑產(chǎn)生抗藥性,抗性頻率為15.25%,抗性倍數(shù)為2.7~6.5倍。丙環(huán)唑相對敏感菌株的EC_(50)平均值為0.104±0.039μg/mL(SD)。丙環(huán)唑和抑霉唑?qū)χ笭钋嗝咕腅C_(50)值之間相關(guān)性顯著(R~2=0.7537,P0.001)。200和400μg/mL丙環(huán)唑浸果處理后的柑橘儲存40 d對綠霉病的防效分別為63.1%和84.3%。40和100μg/mL丙環(huán)唑浸果處理顯著(P0.05)降低孢子產(chǎn)量和孢子的致病力。碘化丙啶對孢子染色觀察結(jié)果顯示在含有0.1μg/mL丙環(huán)唑的PDA上形成的孢子細胞膜完整性破壞率為25.6%。孢子萌發(fā)過程中丙環(huán)唑?qū)е骆咦蛹毎麅?nèi)活性氧累積。透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)經(jīng)丙環(huán)唑處理的菌絲細胞壁增厚。與敏感菌株HBWH-22(EC_(50)=0.049μg/mL)和HBWH-26(EC_(50)=0.051μg/mL)相比,抗性菌株JXGZ-2(EC_(50)=0.429μg/mL)和JXGZ-179(EC_(50)=0.675μg/mL)丙環(huán)唑作用靶標酶基因CYP51的序列沒有發(fā)現(xiàn)突變或重復序列插入,但CYP51基因的相對表達量分別是敏感菌株的1.57倍(P=0.029)和1.63倍(P=0.007)。
【學位單位】：華中農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：TQ455.4;S432.44
【部分圖文】：

O2，化學結(jié)構(gòu)式見圖1-1所示，丙環(huán)唑原藥為淡黃色粘稠液體，易溶于有機溶劑。丙環(huán)唑具有很好的內(nèi)吸輸導作用，可以被根莖葉吸收并傳導，其主要作用機制為抑制病原菌麥角甾醇合成從而影響細胞膜的正常結(jié)構(gòu)與功能。丙環(huán)唑的殺菌譜非常廣，對大多數(shù)的真菌都有理想的防治效果（李新杰和劉曉鵬 2005）。丙環(huán)唑1990年就開始在我國用于小麥全蝕病的防治（張炳炎等 1994），根據(jù)我國農(nóng)藥信息網(wǎng)（http://www.icama.org.cn/hysj/index.jhtml）上登記情況顯示丙環(huán)唑已經(jīng)應(yīng)用于水稻紋枯病、稻瘟病、稻曲病、銹病，小麥白粉病、根腐病，香蕉葉斑病，蓮藕葉斑病，蘋果樹褐斑病，玉米大斑病、小斑病，馬鈴薯早疫病，油菜菌核病等病害的防治中。丙環(huán)唑抗性發(fā)展比較緩慢

華中農(nóng)業(yè)大學 2019 屆碩士研究生（畢業(yè)）論文新鮮菌絲的 PDA 切成約 1 cm 1 cm 大小的菌塊，用鑷子輕，在光學顯微鏡下觀察菌絲形態(tài)。環(huán)唑?qū)吮P菌菌絲甘露聚糖含量的影響參照陳志穎等（2016）甘露聚糖含量測定的方法，稍有改動作：稱取 0.040 g 甘露聚糖標準品，用 400mL 的無菌水溶 的甘露聚糖標準溶液。用移液槍分別吸取 0、0.2、0.3、0.9 mL的上述甘露聚糖標準溶液于10mL具塞試管中，以無菌%苯酚溶液，渦旋振蕩，使反應(yīng)體系充分混勻，立刻加入 5 液后將試管放在沸水中水解 20 min，取出冷卻至室溫，在波值，以甘露聚糖含量為橫坐標，吸光值為縱坐標，繪制標準曲

2.2.1 核盤菌對丙環(huán)唑的相對敏感性基線丙環(huán)唑?qū)?2008 年和 2014 年各 75 株核盤菌菌株 EC50頻率分布見圖 2-2A，丙環(huán)唑?qū)Σ捎?008年的75株核盤菌菌株EC50值的頻率分布通過統(tǒng)計軟件SPSS（ver. 20）KS 正態(tài)性檢驗符合正態(tài)分布（P = 0.119），EC50值的分布范圍為 0.067~0.756 μg/mL，平均值為 0.338 μg/mL 0.174（SD）。丙環(huán)唑?qū)?2014 年 75 株核盤菌菌株的 EC50值通過統(tǒng)計軟件 SPSS（ver. 20）KS 正態(tài)性檢驗同樣符合單峰正態(tài)分布（P = 0.502），EC50值的分布范圍為 0.094~0.551 μg/mL，平均值為 0.315 μg/mL 0.135（SD）。t檢驗發(fā)現(xiàn)兩個年份菌株的 EC50值之間差異不顯著（P = 0.375），說明兩年的核盤菌菌株對丙環(huán)唑都是相對敏感的，沒有出現(xiàn)敏感性下降現(xiàn)象。丙環(huán)唑?qū)?2008 年和 2014年核盤菌菌株 EC50對數(shù)值的頻率分布如圖 2-2B，KS 正態(tài)性檢驗更加趨向單峰正態(tài)分布（P = 0.830，P = 0.909）。本試驗中丙環(huán)唑?qū)蓚�年份的核盤菌菌株 EC50值的頻率分布可以作為核盤菌對丙環(huán)唑的相對敏感基線。
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本文編號：2848567