七星瓢蟲是優(yōu)良的天敵昆蟲,可憑滯育特性抵御逆境脅迫,提高種群生存能力。為研究七星瓢蟲的滯育分子機制,構(gòu)建抑制性消減雜交文庫,經(jīng)反向Northern斑點雜交技術(shù)進一步篩選,得到231個差異點。blastx/n比對后,正、反向文庫分別得到差異表達基因64和54個,GO分類和PATHWAY分析表明,差異表達基因參與的生物過程涉及滯育的信號傳導(dǎo)、生物合成、初級代謝和次級代謝等。文庫中發(fā)現(xiàn)多種基因,為進一步篩選、克隆、分析滯育相關(guān)基因提供線索。著重討論了與抗寒性相關(guān)的28 k D抗干燥應(yīng)激蛋白、卵巢發(fā)育相關(guān)的Cullin 3蛋白,能量代謝相關(guān)的異檸檬酸脫氫酶的生物學(xué)功能,進而推測其與七星瓢蟲滯育的相關(guān)性。
【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 供試試劑
    1.2 供試?yán)ハx
    1.3 七星瓢蟲總RNA提取及雙鏈c DNA合成
    1.4 SSH-c DNA文庫的構(gòu)建
    1.5 反向Northern斑點雜交進一步確認(rèn)差異陽性克隆
2 結(jié)果與分析
    2.1 樣品總RNA濃度和完整性檢測報告
    2.2 文庫消減效率檢測
    2.3 抑制性消減雜交文庫插入片段的PCR鑒定
    2.4 SSH文庫反向Northern斑點雜交
    2.5 生物信息學(xué)分析
3 討論

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