【摘要】：紅樹(shù)林是一種介于海洋與陸地之間的過(guò)渡型的生態(tài)系統(tǒng),為微生物提供了十分多樣的棲息環(huán)境,有著豐富的生物多樣性資源,包括微生物新物種的發(fā)現(xiàn),生物活性代謝產(chǎn)物的提取等等。香港米鋪紅樹(shù)林自然保護(hù)區(qū)(E114.05°,N22.49°)是國(guó)際重要濕地之一,其中蘊(yùn)藏著大量寶貴的生物資源。本實(shí)驗(yàn)對(duì)米埔紅樹(shù)林自然保護(hù)區(qū)土壤進(jìn)行采樣,利用稀釋平板法對(duì)其中的微生物分離純化,再通過(guò)16S rRNA對(duì)純化菌種進(jìn)行測(cè)序鑒定,得到共36個(gè)屬117株菌,包括3株新種細(xì)菌和1株有明顯抑菌圈的菌株,并在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中對(duì)其中一株新菌XY-L28~T進(jìn)行了新菌鑒定的研究工作和對(duì)抑菌菌株XY-K2做了植物促生潛力的研究。以四種植物致病真菌HLJ(Alternaria sp.),C-30(Rhizoctonia solani),玉米小斑(Ustilaginoidea oryzae)和玉米大斑(Exserohilumturcicum LeonardetSuggs)作為活性篩選模型,對(duì)117株菌的次級(jí)代謝產(chǎn)物進(jìn)行分離和活性研究,共篩到4株次級(jí)代謝產(chǎn)物具有較強(qiáng)抗真菌生物活性的活性菌株。以上證明了紅樹(shù)林土壤中可培養(yǎng)微生物的多樣性、新穎性和化學(xué)多樣性。對(duì)Bacillus屬的菌株XY-L28~T進(jìn)行了菌落表型,生理生化特征和系統(tǒng)發(fā)育的菌種鑒定有關(guān)研究。XY-L28~T為一株革蘭氏陽(yáng)性、桿狀、輕微嗜熱的細(xì)菌。從香港米埔內(nèi)后海灣拉姆薩爾國(guó)際重要濕地分離得到。16S rRNA序列發(fā)育分析結(jié)果表明與其最相似的標(biāo)準(zhǔn)菌為Bacillus asahii MA001~T,相似度為96.73%。適合的生長(zhǎng)條件為NaCl含量0 5%(w/v)(最適0.5%),pH值6.5 9.0(最適為pH7.5)和溫度20 45°C(最適37°C)。主要脂肪酸為iso-C_(15:0),anteiso-C_(15:0)和C_(16:1)ω7c alcohol。主要呼吸醌為甲基萘醌-7(MK-7)。主要極性脂為磷脂,磷脂酰甘油,磷脂酰乙醇胺,雙磷脂酰甘油和一種無(wú)法鑒定的脂類(lèi)。DNA中G+C的含量為37.4 mol%。根據(jù)其表型,生理生化特征和系統(tǒng)發(fā)育鑒定結(jié)果,可以確定該菌為Bacillus屬的一個(gè)新種細(xì)菌,命名為Bacillus acanthi sp.nov.。其標(biāo)準(zhǔn)菌的實(shí)驗(yàn)室編號(hào)為XY-L28~T,在德國(guó)菌種保藏中心和中國(guó)海洋微生物菌種保藏管理中心的保藏編號(hào)分別為DSM 104296~T和MCCC 1K03287~T。從樣品中分離得到一株有明顯抑菌圈的菌株,16S rRNA鑒定為bacillus屬,命名為XY-K2 bacillus sp.。發(fā)現(xiàn)XY-K2菌體對(duì)HLJ(Alternaria solani)有較強(qiáng)活性,故對(duì)其抗真菌活性進(jìn)行進(jìn)一步研究,通過(guò)生物活性追蹤實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其活性物質(zhì)為水溶性非蛋白大極性物質(zhì)。對(duì)其進(jìn)行廣譜抑菌研究,XY-K2對(duì)稻瘟菌(Magnaporthe oryzae)亦有較強(qiáng)活性,繼續(xù)用XY-K2對(duì)稻瘟菌進(jìn)行離體實(shí)驗(yàn),揭示該菌通過(guò)促使稻瘟菌孢子提前產(chǎn)生附著胞的抗菌抑制機(jī)理,同時(shí)對(duì)XY-K2進(jìn)行了植物促生菌相關(guān)特性的實(shí)驗(yàn),證明了菌XY-K2可以作為一種水稻植物促生菌并且可能作為新型天然農(nóng)藥的原料。
【學(xué)位授予單位】：深圳大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：S714.3
【圖文】：

圖 1.1 番茄早疫�。ˋlternaria solani）部分癥狀（拍攝于本實(shí)驗(yàn)室，2017至 2017 年年底，防治番茄早疫病主要有三種方式：增進(jìn)栽培方式，種和使用真菌殺菌劑。單單增進(jìn)栽培技術(shù)并不能完全控制早疫病害種往往有效周期不長(zhǎng)，真菌殺菌劑通常又會(huì)造成環(huán)境污染并且附帶著成本。所以，新興的生物防治技術(shù)是如今生態(tài)農(nóng)業(yè)所積極倡導(dǎo)與努力友好型防治方式，也是目前在番茄早疫病這一塊研究的熱門(mén)方向[48水稻古往今來(lái)一直是我國(guó)的主要農(nóng)作物，歷朝歷代水稻都提供了大部所需的糧食�？伤镜纳a(chǎn)也一直受到各種病害威脅，尤其是稻瘟導(dǎo)，因稻瘟病而減產(chǎn)的水稻，每年可以達(dá)到 10%，這些減產(chǎn)的水稻足 萬(wàn)人[49]。稻瘟病的病原菌為 Magnaportheoryzae，也是通過(guò)分生孢子孢子先粘附在寄主的表面，然后孢子萌發(fā)，形成萌芽管，萌芽管伸長(zhǎng)

圖 2.1 紅樹(shù)林土壤可培養(yǎng)細(xì)菌抗真菌活性（48h）. XY-J102（Streptomyces albolongus）脂溶性次級(jí)代謝產(chǎn)物對(duì)玉米小斑菌活性，1mL PDB + 1102 粗浸膏溶液；b. XY-J102 對(duì) C-30 菌活性，1mL PDB + 1μL XY-J102 粗浸膏溶液；c. C-30組，1mL PDB + 1μL DMSO 溶液；d. C-30 菌無(wú)活性菌株（XY-J72 Streptomyces hydrogenans）1mL PDB + 1μL XY-J72 粗浸膏溶液結(jié)論1）從紅樹(shù)林土壤樣品中分離得到屬于 75 個(gè)種 36 個(gè)屬的 117 株菌，且 株新種細(xì)菌，揭示了其豐富的可培養(yǎng)微生物的多樣性、新穎性和潛在的價(jià)值。

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前9條

1 高風(fēng)正;趙元暉;趙劍光;曾名ng;;聚球藻7002嗜鐵素的檢測(cè)與分離[J];微生物學(xué)通報(bào);2015年02期

2 劉艷萍;滕松山;趙蕾;;高產(chǎn)嗜鐵素惡臭假單胞菌A3菌株的鑒定及其對(duì)黃瓜的促生作用[J];植物營(yíng)養(yǎng)與肥料學(xué)報(bào);2011年06期

3 辛琨;譚鳳儀;黃玉山;孫娟;藍(lán)崇鈺;;香港米埔濕地生態(tài)功能價(jià)值估算[J];生態(tài)學(xué)報(bào);2006年06期

4 陳紹興;趙翔;沈萍;謝志雄;;高靈敏假單胞菌鐵載體的平板檢測(cè)方法[J];微生物學(xué)通報(bào);2006年03期

5 閆莉萍,洪葵,胡申才,劉麗華;海南近海30株抗B16細(xì)胞活性放線菌的16SrDNA多樣性分析[J];微生物學(xué)報(bào);2005年02期

6 李琳,李槿年,余為一;細(xì)菌染色體DNA G+C mol%含量測(cè)定方法研究進(jìn)展[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2003年01期

7 林福呈,李德葆;稻瘟病菌分生孢子發(fā)芽和附著胞形成的影響因素研究[J];中國(guó)水稻科學(xué);2001年04期

8 林鵬;中國(guó)紅樹(shù)林研究進(jìn)展[J];廈門(mén)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2001年02期

9 張喬民,隋淑珍;中國(guó)紅樹(shù)林濕地資源及其保護(hù)[J];自然資源學(xué)報(bào);2001年01期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 代玉立;枯草芽孢桿菌菌株RSS-1對(duì)油菜菌核病菌的生防作用及其機(jī)制研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

1 高鑫;太平洋海綿桿菌(Spongiibacterium pacificum sp. nov.)等6株南太平洋新菌的分類(lèi)鑒定及相關(guān)特性分析[D];中國(guó)海洋大學(xué);2015年

2 徐友林;八門(mén)灣紅樹(shù)林土壤可培養(yǎng)真菌的多樣性和分布[D];海南大學(xué);2012年

3 王彥杰;番茄早疫病病原菌鑒定及抗病種質(zhì)資源篩選[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

本文編號(hào)：2727854