發(fā)布時(shí)間：2020-05-17 15:06

【摘要】：轉(zhuǎn)基因作物的商業(yè)化種植為人類(lèi)帶來(lái)了巨大的經(jīng)濟(jì)效益,同時(shí)轉(zhuǎn)基因作物的種植也引起了人們對(duì)生態(tài)環(huán)境安全性的關(guān)注。轉(zhuǎn)基因作物環(huán)境安全評(píng)價(jià)的一項(xiàng)重要內(nèi)容是對(duì)田間天敵昆蟲(chóng)的影響。龜紋瓢蟲(chóng)是棉田優(yōu)勢(shì)捕食性天敵,也是轉(zhuǎn)基因作物安全評(píng)價(jià)的重要指示性非靶標(biāo)昆蟲(chóng)。本文研究了Cry1B和Cry1Fa兩種新型Bt蛋白對(duì)龜紋瓢蟲(chóng)的安全性。主要結(jié)果如下:1.明確了Cry1B和Cry1Fa蛋白對(duì)龜紋瓢蟲(chóng)生物學(xué)特征的影響。和對(duì)照相比,飼喂0.5 mg·mL~(-1)的Cry1B和Cry1Fa蛋白后龜紋瓢蟲(chóng)各個(gè)齡期的發(fā)育歷期、羽化率和羽化后蟲(chóng)重均無(wú)顯著差異。說(shuō)明龜紋瓢蟲(chóng)取食Cry1B和Cry1Fa蛋白對(duì)生物學(xué)特征沒(méi)有明顯影響。2.明確了龜紋瓢蟲(chóng)取食Cry1B和Cry1Fa蛋白對(duì)酶活的影響。與對(duì)照相比,龜紋瓢蟲(chóng)取食0.25 mg·mL~(-1)、0.5 mg·mL~(-1)的Cry1B和Cry1Fa蛋白后對(duì)谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、過(guò)氧化物酶(POD)的活性均沒(méi)有顯著影響;取食1.0 mg·mL~(-1)的Cry1B蛋白后谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶(GST)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、過(guò)氧化物酶(POD)的活性都顯著升高;取食1.0 mg·mL~(-1)的Cry1Fa蛋白后過(guò)氧化氫酶(CAT)和過(guò)氧化物酶(POD)活性均顯著升高。3.明確了龜紋瓢蟲(chóng)取食Cry1B和Cry1Fa蛋白對(duì)解毒、代謝相關(guān)基因的影響。不同濃度(0.25mg·mL~(-1)、0.5 mg·mL~(-1)、1.0 mg·mL~(-1))的Cry1B蛋白和Cry1Fa蛋白分別處理龜紋瓢蟲(chóng)2齡和3齡幼蟲(chóng)12 h、24 h、48 h后,與對(duì)照相比,龜紋瓢蟲(chóng)某些解毒、代謝相關(guān)基因的表達(dá)量無(wú)顯著影響,某些解毒、代謝相關(guān)基因的表達(dá)量發(fā)生顯著影響。4.明確了龜紋瓢蟲(chóng)取食Cry1B和Cry1Fa蛋白對(duì)體內(nèi)共生菌的影響。0.25 mg·mL~(-1)、0.5mg·mL~(-1)、1.0 mg·mL~(-1)的Cry1B和Cry1Fa蛋白分別處理龜紋瓢蟲(chóng)2齡和3齡幼蟲(chóng)12 h、24 h、48 h后,2齡幼蟲(chóng)體內(nèi)的優(yōu)勢(shì)菌門(mén)為厚壁菌門(mén)Firmicutes、變形菌門(mén)Proteobacteria、擬桿菌門(mén)Bacteroidetes、放線(xiàn)菌門(mén)Actinobacteria、疣微菌門(mén)Verrucomicrobia和綠彎菌門(mén)Chloroflexi,與對(duì)照組一致;3齡幼蟲(chóng)的優(yōu)勢(shì)菌門(mén)為厚壁菌門(mén)Firmicutes、變形菌門(mén)Proteobacteria、放線(xiàn)菌門(mén)Actinobacteria、擬桿菌門(mén)Bacteroidetes、酸桿菌門(mén)Acidobacteria,與對(duì)照組一致。
【圖文】：

圖 2.1 Cry1B 蛋白、Cry1Fa 蛋白、蔗糖和 E-64 對(duì)龜紋瓢蟲(chóng)各齡期歷期的影響（h）re.2.1 Effects of Cry1B protein, Cry1Fa protein, sucrose and E-64 on the duration of each instars of prjaponica (h)Cry1B 蛋白和 Cry1Fa 蛋白對(duì)龜紋瓢蟲(chóng)羽化率分析

9圖 2.2. Cry1B 蛋白、Cry1Fa 蛋白、蔗糖和 E-64 對(duì)龜紋瓢蟲(chóng)羽化率的影響（%）gure 2.2. Effects of Cry1B protein, Cry1Fa protein , sucrose and E-64 on eclosion rate of propylea japonica（羽化率是昆蟲(chóng)的生物學(xué)指標(biāo)之一，所以研究取食 Bt 蛋白后龜紋瓢蟲(chóng)羽化率的變化對(duì)轉(zhuǎn)的環(huán)境安全評(píng)價(jià)有重要意義。與蔗糖空白對(duì)照組相比，，Cry1B 蛋白和 Cry1Fa 蛋白對(duì)龜蟲(chóng)的羽化率并沒(méi)有產(chǎn)生任何不利影響，它們的羽化率均接近 100%。E-64 蛋白酶抑制劑羽化率與蔗糖組相比，明顯低于蔗糖組。說(shuō)明 Cry1B 蛋白和 Cry1Fa 蛋白對(duì)龜紋瓢蟲(chóng)幼率沒(méi)有影響，結(jié)合發(fā)育歷期進(jìn)一步說(shuō)明了本實(shí)驗(yàn)中的處理方案有效（圖 2.2）。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：S476.2

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本文編號(hào)：2668748