【摘要】：本研究采用選擇培養(yǎng)基從重慶市北碚區(qū)紫色土中分離出PGPR(固氮菌、溶磷菌和解鉀菌),分別測定其能力后篩選出目的菌株,再結(jié)合形態(tài)學(xué)、生理生化特征和16S rDNA分析對分離的目的菌株進(jìn)行鑒定；通過盆栽試驗(yàn)研究單一接種PGPR對小白菜的是否具有促生效應(yīng)；將PGPR與滅菌的草炭混合制成PGPR復(fù)合菌劑,研究應(yīng)用PGPR復(fù)合菌劑減少獼猴桃幼苗生長過程中化肥的施用量；再將分離的PGPR復(fù)合到發(fā)酵好的牛糞中,研究PGPR生物肥對生姜幼苗的生長和品質(zhì)的影響。通過本次研究為充分發(fā)揮紫色土的潛力,進(jìn)一步研究紫色土中微生物的分類地位和高親和性微生物肥料的開發(fā)利用,提供了理論依據(jù)。(1)通過阿須貝無氮培養(yǎng)基從紫色土中篩選得到了6株自生固氮菌,而N3具有較強(qiáng)的固氮能力,液體培養(yǎng)7天后其固氮量達(dá)91.5 mg/L,結(jié)合形態(tài)學(xué)、生理生化和分子生物學(xué)鑒定為解淀粉芽孢桿菌(B. amyloliquefaciens sp.),并命名為(B.amyloliquefaciens XD-N-3);通過溶磷菌選擇培養(yǎng)基從紫色土中篩選得到了6株無機(jī)磷溶磷菌,而P1具有較強(qiáng)的溶磷能力,液體培養(yǎng)7天后其溶磷量達(dá)128.7 mg/L,結(jié)合形態(tài)學(xué)、生理生化和分子生物學(xué)鑒定為短小芽孢桿菌(B. pumilus sp.)并命名為(B. pumilus XD-P-1);通過解鉀菌選擇培養(yǎng)基從紫色土中篩選得到了5株解鉀菌,其中K2具有較強(qiáng)的解鉀能力,液體培養(yǎng)7天后其解鉀量達(dá)23.2 mg/L,結(jié)合形態(tài)學(xué)、生理生化和分子生物學(xué)鑒定為環(huán)狀芽孢桿菌(B. circulans sp.),并命名為(B. circulans XD-K-2)。(2)PGPR對小白菜的促生效應(yīng)試驗(yàn)結(jié)果表明,接種XD-N-3、XD-P-1和XD-K-2能顯著促進(jìn)小白菜的生長。XD-N-3處理在提高小白菜莖粗、總根長等植物營養(yǎng)指標(biāo),以及提高紫色土全氮養(yǎng)分含量等方面顯著高于施全量N肥的CK5處理,分別達(dá)15.54%、166.73%和12.02%,這說明接種XD-N-3能達(dá)到施用氮肥的效果。XD-P-1處理在提高小白菜株高、葉面積等植物營養(yǎng)指標(biāo),以及提高紫色土有效磷含量等方面顯著高于施全量P肥的CK5處理,分別達(dá)25.36%、83.50%和36.69%,這說明接種XD-P-1達(dá)到了施用磷肥的效果。XD-K-2處理在提高小白菜株高、葉面積等植物營養(yǎng)指標(biāo),以及提高紫色土速效鉀含量等方面顯著高于施全量K肥的CK5處理,分別達(dá)22.61%、72.32%和34.06%,這說明接種XD-K-2達(dá)到了施用鉀肥的效果。本試驗(yàn)最為重要的是,分離的PGPR對紫色土表現(xiàn)出極高的親和能力和促生效應(yīng),有望成為生產(chǎn)紫色土專用微生物肥料的備選菌株。(3)與不施用菌劑的處理相比,施用PGPR復(fù)合菌劑的兩個(gè)處理均能顯著促進(jìn)獼猴桃幼苗的生長,增加獼猴桃根系可培養(yǎng)微生物的數(shù)量,且在半量施肥的情況下施用PGPR復(fù)合菌劑在提高獼猴桃幼苗葉片葉面積上和增加獼猴桃根系可培養(yǎng)細(xì)菌的數(shù)量方面顯著高于只施用PGPR復(fù)合菌劑的處理,分別達(dá)24.28%和59.65%。且50%NPK+PGPR處理在提高獼猴桃幼苗地上部氮、地下部磷等方面和獼猴桃根系土壤中有機(jī)質(zhì)、有效磷等含量分別均顯著高于只施用PGPR復(fù)合菌劑處理,分別達(dá)34.55%、21.99%和13.09%、7.69%。通過本次試驗(yàn)說明PGPR在低肥土壤環(huán)境中更能大量定殖,更能表現(xiàn)出對紫色土的親和性,通過自身的生命活動(dòng)及多種代謝作用促進(jìn)獼猴桃的生長,減少獼猴桃幼苗生長過程中化肥的施用量,為在實(shí)際生產(chǎn)上應(yīng)用提供一些理論依據(jù)。(4) PGPR生物肥處理在提高生姜幼苗葉面積、姜辣素含量、根系土壤中的可培養(yǎng)細(xì)菌、溶磷菌數(shù)量等方面顯著高于普通生物肥處理,分別達(dá)45.92%、15.38%、192.24%、246.48%。這表明PGPR生物肥不僅能促進(jìn)生姜幼苗的生長、增加生姜幼苗姜辣素的含量,同時(shí)還能顯著增加生姜幼苗根際土壤可培養(yǎng)微生物數(shù)量,其作用效果取決于所施生物肥的種類,而PGPR表現(xiàn)出對紫色土具有更高的親和性。PGPR生物肥處理在提高生姜幼苗地上部鉀、地下部磷等養(yǎng)分的含量和提高生姜幼苗根系土壤有效磷養(yǎng)分含量顯著高于普通生物肥處理,分別達(dá)22.22%、16.67%和91.08%。這說明施用PGPR生物肥能促進(jìn)生姜幼苗對養(yǎng)分含量的吸收同時(shí),還能提高生姜幼苗對土壤養(yǎng)分的利用率。
【圖文】：

圖３．１邋Ａ邋Ｎ３菌株芽孢染色（１００ｘ１６）邋Ｂ邋Ｎ３菌株革蘭氏染色（１００ｘ１６）逡逑Ｆｉｇ３．１邋Ｇｅｍｍａ邋ｓｔａｉｎ邋ｒｅｓｕｌｔ邋ｏｆＮ３邋ｓｔｒａｉｎ邋（Ａ）邋ａｎｄ邋ｇｒａｍ邋ｓｔａｉｎ邋ｒｅｓｕｌｔ邋ｏｆＮ３邋ｓｔｒａｉｎ邋（Ｂ）逡逑固氮菌（Ｎ３）的芽孢染色和革蘭氏染色結(jié)果見圖３．１。Ｎ３在阿須貝無氮培養(yǎng)逡逑基上的菌落形態(tài)為白色半透明狀，光滑濕潤，圓形微隆起，邊緣整齊。革蘭氏染逡逑色菌體（Ｂ）為陽性，孢子呈橢圓，抱子囊未見膨脹，生長位置為中生，莢膜肥厚。逡逑培養(yǎng)１－２邋ｄ，菌落直徑２－３邋ｍｍ，培養(yǎng)３－５邋ｄ，菌落直徑６－８邋ｍｍ。逡逑１８逡逑

逡逑圖３．２邋Ａ邋ＰＩ菌株芽抱染色（１００ｘ１６）邋Ｂ邋Ｐ１在溶碌菌選擇培養(yǎng)基上形成的溶a惾﹀義希疲椋紓常插澹牽澹恚恚徨澹螅簦幔椋鑠澹潁澹螅酰歟翦澹錚駑澹校懾澹螅簦潁幔椋鑠澹ǎ粒╁澹幔睿溴澹簦瑁邋澹穡瑁錚螅穡瑁幔簦澹螅錚歟酰猓椋歟椋椋睿玨澹猓幔悖簦澹潁椋徨澹潁澹歟澹幔螅椋睿玨澹悖椋潁悖歟邋義希校懾澹瑁幔觶邋澹媯錚潁恚澹溴澹錚鑠澹簦瑁邋澹螅澹歟澹悖簦椋觶邋澹恚澹洌椋酰礤澹ǎ攏╁義先躠惥ǎ校桑┑難挎呷舊峁跡常插澹ǎ粒�，邋ＰＩ灾R躠惥≡衽嘌夏芐五義銑擅饗緣娜芰茲跡常插澹ǎ攏渚湫翁笸該鰨巖蘊(yùn)羝穡咴嫡�。革辶x俠際先舊邐糶裕咦映釋衷殘�，孢子囊未见膨胀，生长位謮舄中生，奸啢辶x戲屎瘛Ｅ嘌保插澹�，菌落直径２－_澹恚恚嘌常靛澹�，菌落直径�(dān)跺澹恚懟ｅ義希摺蹂義賢跡常沖澹鈴澹耍簿暄挎呷舊ǎ保埃埃保叮╁澹洛澹耍蒼誚餳鼐≡衽嘌閑緯傻慕餳厝﹀義希疲椋紓常沖澹牽澹恚恚徨澹螅簦幔椋鑠澹潁澹螅酰歟翦澹錚駑澹耍插澹螅簦潁幔椋鑠澹ǎ粒╁澹幔睿溴澹簦瑁邋澹穡錚簦幔螅螅椋酰恚螅錚歟酰猓椋歟椋椋睿玨澹猓幔悖簦澹潁椋徨澹潁澹歟澹幔螅椋睿玨澹悖椋潁悖歟邋義希桑茫插澹瑁幔觶邋澹媯錚潁恚澹溴澹錚鑠澹簦瑁邋澹螅澹歟澹悖簦椋觶邋澹恚澹洌椋酰礤澹ǎ攏╁義轄餳鼐ǎ耍玻┑難挎呷舊峁跡常沖澹ǎ粒澹耍蒼誚餳鼐≡衽嘌閑緯懾義系慕餳厝跡常沖澹ǎ攏�，其菌落形态为湿润托M穡嗜榘咨咴嫡�。稿d際先懼義仙邐糶裕咦映釋衷殘�，孢子念U饗耘蛘�，生长位謮舄中生滇u味松�，，荚辶x夏し屎�。培养１－２邋�

本文編號：2584280