【摘要】：葡萄糖-6-磷酸脫氫酶是磷酸戊糖途徑(HMP)的限速酶,在十字花科黑腐病菌8004的基因組中,有2個基因XC1977和XC4082被注釋為葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)。前期工作發(fā)現(xiàn)XC1977突變后,細(xì)胞的胞外多糖產(chǎn)量明顯降低,而XC4082突變不影響胞外多糖產(chǎn)量。為明確這兩個基因的編碼產(chǎn)物在Xcc中的生化功能,本工作表達(dá)純化了這兩個蛋白,并對這兩個蛋白的特征進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)這兩個蛋白均具有6-葡萄糖脫氫酶的活性,但是它們的最適反應(yīng)溫度、最適反應(yīng)pH、金屬離子和烷化劑的敏感性完全不同。而且,XC1977以NAD~+和NADP~+為電子受體,而XC4082只能以NADP~+為電子受體。在以NAD~+和NADP~+為受體時,XC1977的K_m值分別為0.125 mmol/L和0.927 mmol/L,而XC4082以NADP~+為受體時的K_m值為0.364 mmol/L。這表明Xcc細(xì)胞合成胞外多糖時,需要NAD~+參與能量代謝。
[Abstract]:Glucose-6-phosphate dehydrogenase is the rate-limiting enzyme of pentose phosphate pathway (HMP). In the genome of Cruciferae black rot fungus 8004, two genes XC1977 and XC4082 are annotated as glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD). It was found that the extracellular polysaccharide production decreased significantly after XC1977 mutation, but XC4082 mutation did not affect the extracellular polysaccharide yield. In order to clarify the biochemical function of the coding products of the two genes in Xcc, the two proteins were expressed and purified, and the characteristics of the two proteins were analyzed. It was found that the two proteins had the activity of 6-glucose dehydrogenase, but their optimum reaction temperature and sensitivity to pH, metal ions and alkylating agents were completely different. Moreover, XC1977 uses NAD~ and NADP~ as electron receptors, while XC4082 can only use NADP~ as electron receptors. When NAD~ and NADP~ were used as receptors, the km values of XC1977 were 0.125 mmol/L and 0.927 mmol/L, respectively, while the km values of XC4082 with NADP~ as receptors were 0.364 mmol/L.. This suggests that NAD~ is needed to participate in energy metabolism when Xcc cells synthesize extracellular polysaccharides.
【作者單位】： 廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所;廣西作物病蟲害生物學(xué)重點實驗室;廣西大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;廣西大學(xué)亞熱帶農(nóng)業(yè)生物資源保護(hù)利用國家重點實驗室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(31660506) 廣西自然科學(xué)基金(2015GXNSFBA139110) 廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技發(fā)展基金(桂農(nóng)科2016JZ07) 廣西科技計劃項目(桂科AD16380018)共同資助
【分類號】：S432.42

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 江漢民;王楠;趙換;孫德嶺;宋文芹;;花椰菜苯丙氨酸解氨酶基因的克隆及黑腐病菌脅迫下的表達(dá)分析[J];南開大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2012年04期

相關(guān)重要報紙文章 前1條

1 李大慶;黑腐病元兇百年追蹤今朝擒[N];科技日報;2005年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前7條

1 徐勇;十字花科黑腐病菌XC3605基因功能鑒定[D];廣西大學(xué);2015年

2 曹金如;十字花科黑腐病菌在限制營養(yǎng)和豐富營養(yǎng)條件下轉(zhuǎn)錄譜的對比分析[D];廣西大學(xué);2007年

3 廖潔;十字花科黑腐病菌一個與致病相關(guān)的雙組份調(diào)控系統(tǒng)基因的研究[D];廣西大學(xué);2007年

4 成春燕;一個用于鑒定十字花科黑腐病菌III型效應(yīng)物轉(zhuǎn)運與分泌的報告質(zhì)粒的構(gòu)建[D];廣西大學(xué);2013年

5 曾獻(xiàn)瑩;十字花科黑腐病菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)hrp基因致病功能分析[D];廣西大學(xué);2014年

6 張霞;全基因組篩選十字花科黑腐病菌中負(fù)向調(diào)控hrpX的基因[D];廣西大學(xué);2007年

7 李娟娟;十字花科黑腐病菌中GGDEF結(jié)構(gòu)域蛋白基因XC0831的功能研究[D];廣西大學(xué);2013年

，

本文編號：2513581