【摘要】：褐腐病是水果上的重要病害之一,能引起多種水果果實(shí)腐爛,影響水果生產(chǎn),帶來(lái)經(jīng)濟(jì)損失。該病害主要由鏈核盤菌屬(Monilinia)中關(guān)系較近的三個(gè)種-美澳型核果鏈核盤菌Monilinia fructicola、果生鏈核盤菌Monilinia fructigena和核果鏈核盤菌Monilinia laxa引起,本研究對(duì)山西省褐腐病病原菌種群結(jié)構(gòu)及致病性進(jìn)行了研究。從2011年至2014年,采集褐腐病病果。采樣過(guò)程中發(fā)現(xiàn)褐腐病在山西省主要發(fā)生在管理粗放的果園,在管理精細(xì)的果園鮮有發(fā)生,在套袋果上極少發(fā)生。通過(guò)分離共獲得93株褐腐病菌菌株的純培養(yǎng)物,對(duì)其進(jìn)行了形態(tài)學(xué)和分子鑒定,并對(duì)其中的81株菌的致病性進(jìn)行了測(cè)定。1.形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果表明：果生鏈核盤菌M. fructigena有69株,核果鏈核盤菌M. laxa有15株,美澳型核果鏈核盤菌M. fructicola有3株,其中6株不能通過(guò)形態(tài)進(jìn)行準(zhǔn)確判斷。2.分別用三對(duì)褐腐病菌的特異引物ITS 1 Mfcl/ITS4Mfcl、ITS1Mfgn/ITS4Mfgn和ITS1Mlx/ITS4Mlx對(duì)供試褐腐病菌菌株進(jìn)行PCR擴(kuò)增,93個(gè)供試菌株中,有79株擴(kuò)增出了特異性單一條帶,7株擴(kuò)增出兩條條帶,7株不能有效擴(kuò)增。利用真菌ITS通用引物對(duì)7株未能進(jìn)行種特異性擴(kuò)增的菌株進(jìn)行擴(kuò)增和測(cè)序,測(cè)序結(jié)果在GeneBank核酸數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行BLAST比對(duì)和同源性分析。形態(tài)學(xué)鑒定和分子生物學(xué)鑒定結(jié)果表明,供試菌株中,M. fructigena有75株,M. laxa有15株,M. fructicola有3株,分別占供試菌株數(shù)的80.7%、16.1%、3.2%。3.81株褐腐病菌在接種蘋果和梨果實(shí)后,均能引起發(fā)病,但病斑大小有顯著差異。對(duì)病斑直徑進(jìn)行方差分析,將褐腐病菌菌株劃分為弱、中、強(qiáng)三種致病性類型。接種蘋果時(shí)弱、中、強(qiáng)三種類型分別占菌株總數(shù)的29.6%、46.9%、23.5%,接種梨時(shí)三種類型分別占菌株總數(shù)的18.5%、50.6%、30.9%�？傮w來(lái)說(shuō),不同地區(qū)來(lái)源的菌株間致病力存在分化,同一致病力類群在各地區(qū)所占比例不同。
[Abstract]:Brown rot is one of the important diseases on fruit, which can cause many kinds of fruit decay, affect fruit production and bring economic loss. The disease was mainly caused by three species of Sclerotinia (Monilinia), Monilinia fructicola, Monilinia fructigena and Monilinia laxa, which are closely related to Sclerotinia sclerotinia Sclerotinia and Sclerotinia pyrenoides Monilinia laxa. In this study, the population structure and pathogenicity of brown rot pathogens in Shanxi Province were studied. From 2011 to 2014, the fruit of brown rot was collected. In the process of sampling, it was found that brown rot mainly occurred in orchards with extensive management, rarely occurred in orchards with fine management, and rarely occurred on bagged fruits. A total of 93 strains of brown rot bacteria were isolated and purified, and their morphology and molecular identification were carried out, and the pathogenicity of 81 of them was determined. The results of morphological identification showed that there were 69 strains of M. fructigena, 15 strains of M. laxa and 3 strains of M. fructicola, 6 of which could not be accurately judged by morphology. Three pairs of specific primers ITS1 Mfcl/ITS4Mfcl,ITS1Mfgn/ITS4Mfgn and ITS1Mlx/ITS4Mlx were used to amplify the tested strains of brown rot bacteria by PCR. Among the 93 tested strains, 79 strains amplified specific single bands and 7 strains amplified two bands. 7 strains could not be amplified effectively. Seven strains which could not be specifically amplified by species were amplified and sequenced by using universal primers of fungal ITS. BLAST comparison and homology analysis were carried out in GeneBank nucleic acid database. The results of morphological identification and molecular biological identification showed that 75 strains of, M. fructigena, 15 strains of, M. fructicola and 3 strains of, M. fructicola accounted for 80.7% and 16.1% of the tested strains, respectively. 3.2%. 3.81 strains of brown rot bacteria could cause the disease after inoculating apple and pear fruit, but the size of disease spot was significantly different. According to the variance analysis of the diameter of the disease spot, the strains of brown rot bacteria were divided into three pathogenic types: weak, medium and strong. When inoculated with apple, the three types accounted for 29.6%, 46.9% and 23.5% respectively, and the three types accounted for 18.5%, 50.6% and 30.9%, respectively. Generally speaking, there was differentiation of pathogenicity among strains from different regions, and the proportion of pathogenicity groups was different from that of consistent pathogenicity groups in different regions.
【學(xué)位授予單位】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S432.4

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