本文選題：綠僵菌　切入點(diǎn)：東亞飛蝗　出處：《甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)》2016年碩士論文

【摘要】：綠僵菌(Metarhizium anisopliae)是世界范圍廣泛存在的一種昆蟲病原真菌,應(yīng)用于多種害蟲的生物防治,取得了良好的防治效果。綠僵菌的侵染途徑主要有體表侵染和消化道侵染兩種方式,體表侵染途徑及毒力因子研究較多,對(duì)寄主的作用機(jī)制較清晰,但消化道侵染研究相對(duì)較少。已有研究表明,消化道侵染比體表侵染能更快發(fā)揮毒力,為明確綠僵菌消化道侵染的作用機(jī)制,本文研究觀測了綠僵菌混用抑制劑對(duì)其毒力的影響及對(duì)飛蝗中腸破壞情況的影響、測定了綠僵菌對(duì)東亞飛蝗相關(guān)酶活性的動(dòng)態(tài)變化、分析了東亞飛蝗飼喂綠僵菌后的中腸轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),為更好的明確綠僵菌胞外蛋白酶的作用機(jī)制及毒力差異、提高其對(duì)飛蝗及其它有害生物的防治效果提供了理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:1.蛋白酶抑制劑對(duì)胞外蛋白酶在綠僵菌IPPM202侵染飛蝗過程中的毒力影響東亞飛蝗分別飼喂綠僵菌IPPM202及混合TPCK、APMSF、EDTA、CII 4種抑制劑后,4種抑制劑本身對(duì)飛蝗的存活率沒有影響,TPCK和CII顯著抑制了綠僵菌的毒力,延長了綠僵菌對(duì)東亞飛蝗的致死中時(shí),EDTA和APMSF不影響綠僵菌的毒力,東亞飛蝗存活率與綠僵菌處理無差異。上述研究表明,在IPPM202侵染致死東亞飛蝗的過程中,Pr1和Pr4起主要作用。2.綠僵菌菌株IPPM202中不同胞外蛋白酶對(duì)飛蝗中腸的破壞作用東亞飛蝗飼喂綠僵菌后,中腸超微結(jié)構(gòu)受到明顯的破壞,中腸微絨毛脫落、變形,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膨脹、斷裂、線粒體基質(zhì)降解、核膜出現(xiàn)降解等一系列病變,混合抑制劑后中腸破壞情況出現(xiàn)差異,混合TPCK及CII處理組東亞飛蝗中腸超微結(jié)構(gòu)保持相對(duì)完整,而混合EDTA及APMSF處理東亞飛蝗中腸組織破壞情況嚴(yán)重,表現(xiàn)與綠僵菌處理相似。根據(jù)生測結(jié)果、電鏡結(jié)果、蛋白酶抑制劑的抑制靶標(biāo),推測綠僵菌胞外蛋白酶中的Pr1蛋白酶是主要的毒力因子,其次為Pr4,Pr2和Pr3不參與綠僵菌IPPM202中腸侵染過程,或IPPM202中不存在Pr2和Pr3基因。3.綠僵菌對(duì)飛蝗中腸相關(guān)酶系的影響東亞飛蝗飼喂混合APMSF和TPCK兩種絲氨酸類蛋白酶抑制劑的綠僵菌后,測定飛蝗中腸消化酶及解毒酶活性的動(dòng)態(tài)變化,研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),綠僵菌對(duì)東亞飛蝗中腸總蛋白酶的影響呈“U”形,類胰蛋白酶活性先上升在下降,類胰凝乳蛋白酶活性逐漸上升,對(duì)兩種保護(hù)酶的影響為先上升再下降;APMSF、TPCK對(duì)中腸的三種消化酶沒有顯著影響,APMSF對(duì)兩種解毒酶也沒有影響,但TPCK對(duì)中腸解毒酶的影響情況與綠僵菌處理相似,但低于綠僵菌的影響程度;綠僵菌分別混合兩種抑制劑后中腸的各種酶活性會(huì)與各種物質(zhì)分別單獨(dú)處理時(shí)中腸各種酶活性發(fā)生不同程度的改變。4.東亞飛蝗飼喂綠僵菌后中腸轉(zhuǎn)錄組分析采用新一代高通量測序技術(shù)對(duì)飼喂和沒飼喂綠僵菌的東亞飛蝗3齡若蟲中腸進(jìn)行了測序分析,并篩選了差異表達(dá)基因,利用生物信息學(xué)工具對(duì)轉(zhuǎn)錄組測序得到的基因進(jìn)行功能注釋、分類以及參與的信號(hào)通路展示。對(duì)所有的基因進(jìn)行差異表達(dá)分析發(fā)現(xiàn):以P0.05為標(biāo)準(zhǔn)篩選得到了194個(gè)差異表達(dá)基因,其中上調(diào)表達(dá)基因有53個(gè),下調(diào)表達(dá)基因有141個(gè);下調(diào)表達(dá)基因GO富集分析發(fā)現(xiàn):有17個(gè)GO term有富集現(xiàn)象,包括15個(gè)生物學(xué)過程和2個(gè)分子功能,上調(diào)表達(dá)基因GO富集分析發(fā)現(xiàn),包括4個(gè)生物學(xué)過程、1個(gè)細(xì)胞組分和2個(gè)分子功能;KEGG代謝通路分析將中腸轉(zhuǎn)錄組77個(gè)差異表達(dá)基因匹配到20個(gè)通路上,其中4個(gè)通路得到了富集。本研究結(jié)果為從分子水平上開展應(yīng)用綠僵菌防治東亞飛蝗的研究奠定了信息學(xué)基礎(chǔ)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S476.12;S433.2

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張彥豐;王正浩;農(nóng)向群;曹廣春;趙莉;王廣君;張澤華;;綠僵菌侵染對(duì)東亞飛蝗中腸保護(hù)酶和解毒酶的影響[J];中國生物防治學(xué)報(bào);2015年06期

2 吳文丹;孫昊雨;席景會(huì);尹姣;張帥;曹雅忠;李克斌;肖春;;嗜菌異小桿線蟲侵染后暗黑鰓金龜和大黑鰓金龜幼蟲脂肪體和中腸組織超微結(jié)構(gòu)觀察[J];昆蟲學(xué)報(bào);2015年08期

3 王登杰;吳圣勇;雷仲仁;王海鴻;;感染球孢白僵菌的煙粉虱若蟲免疫應(yīng)答轉(zhuǎn)錄組分析[J];應(yīng)用昆蟲學(xué)報(bào);2015年01期

4 秦浩然;和紹禹;吳杰;李繼蓮;;東方蜜蜂微孢子蟲對(duì)密林熊蜂的致病機(jī)理[J];中國農(nóng)業(yè)科學(xué);2012年22期

5 祁云霞;劉永斌;榮威恒;;轉(zhuǎn)錄組研究新技術(shù):RNA-Seq及其應(yīng)用[J];遺傳;2011年11期

6 張艷梅;謝映平;薛皎亮;劉衛(wèi)敏;;油松毛蟲受球孢白僵菌感染的組織病理學(xué)變化[J];昆蟲學(xué)報(bào);2011年05期

7 曹偉平;王剛;甄偉;王容燕;杜立新;宋健;王金耀;馮書亮;;球孢白僵菌不同感染方式侵染棉鈴蟲幼蟲的毒性比較及組織病理變化[J];昆蟲學(xué)報(bào);2011年04期

8 周琳;馬志卿;馮俊濤;張興;;雷公藤總生物堿對(duì)粘蟲中腸細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)及消化酶活性的影響[J];河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2009年04期

9 宋健;王容燕;杜立新;曹偉平;張海劍;王金耀;馮書亮;張杰;宋福平;;銅綠麗金龜和黃褐麗金龜幼蟲感染Bt HBF-1菌株后的病癥及中腸組織病理變化[J];昆蟲學(xué)報(bào);2008年10期

10 呂丁丁;李增智;王成樹;;蟲生真菌分子致病機(jī)理及基因工程改造研究進(jìn)展[J];微生物學(xué)通報(bào);2008年03期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 婁延霞;綠僵菌經(jīng)口飼喂侵染東亞飛蝗的組織病理學(xué)研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2013年

，

本文編號(hào)：1659126