本文關鍵詞：粘蟲顆粒體病毒增效蛋白基因片段優(yōu)化及功能

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【摘要】：【目的】研究轉宿主粘蟲顆粒體病毒(Pseudaletia unipuncta granulovirus,Pu GV-Ps)增效蛋白基因截短片段優(yōu)化及其增效作用,探索增效蛋白基因的合理利用途徑�！痉椒ā可镄畔W分析增效蛋白結構域,構建增效蛋白基因截短片段原核表達載體,分析目的基因片段表達產物的表達水平、圍食膜蛋白降解效能和增強活性,進一步明確Pu GV-Ps增效蛋白基因的功能區(qū)域�！窘Y果】Pu GV-Ps增效蛋白含有M60-like結構域、鋅離子催化域和糖蛋白結合域,并包含13個潛在的糖基化位點。以此為依據設計P69(短截M60-like結構域)和P77(短截糖蛋白結合域)2個截短片段,構建了表達載體p ET15b-P69和p ET15bP77,原核表達量明顯高于全長基因P104。表達產物純化蛋白圍食膜降解活性表明,P69對斜紋夜蛾圍食膜大分子蛋白降解程度高于P77,但兩者均低于P104。病毒增強蘇云金桿菌(Bt)實驗表明,截短片段的表達產物提高了Bt對小菜蛾的毒力,但增強活性顯著低于P104�！窘Y論】研究結果表明,Pu GV-Ps增效蛋白基因N端M60-like結構域和C端糖蛋白結合域對其增效作用的發(fā)揮都具有一定功能,這些結構對維持增效蛋白的構象也發(fā)揮了一定的作用,截短片段P69有利于保持Pu GV-Ps增效蛋白的活性、提高表達水平。該研究結果對增效蛋白的工業(yè)化生產具有一定的指導意義。
【作者單位】： 江蘇里下河地區(qū)農業(yè)科學研究所;揚州大學園藝與植物保護學院;
【正文快照】： 桿狀病毒(Baculovirus)是一類在自然界中僅感染節(jié)肢動物的病毒,絕大多數都來自于昆蟲綱,且集中在鱗翅目昆蟲[1]。桿狀病毒是當前重要的生物控制因子,主要分為Alpha-,Beta-,Gamma-,Delta-baculovirus 4種[2]。轉宿主粘蟲顆粒體病毒(Pu GV-Ps)屬于Beta-baculovirus,由美洲粘蟲顆

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