本文關(guān)鍵詞：小鼠β-actin基因的RT-PCR克隆與真核表達

  更多相關(guān)文章： 小鼠 β-actin基因 RT-PCR 克隆 真核表達

【摘要】：以Trizol-異丙醇法提取小鼠肝臟總RNA,根據(jù)NCBI數(shù)據(jù)庫中小鼠β-actin基因序列設(shè)計引物,采用RT-PCR技術(shù)擴增小鼠β-actin基因編碼區(qū)并測序;以pcDNA3.1-flag為載體,構(gòu)建β-actin基因真核表達質(zhì)粒,繼而將其重組產(chǎn)物轉(zhuǎn)染于HeLa細胞,采用Western blot印跡法鑒定重組蛋白pcDNA3.1-flag/β-actin的表達水平。結(jié)果表明:克隆獲得的289 bp片段與NCBI數(shù)據(jù)庫中β-actin基因序列完全吻合,并且成功構(gòu)建的pcDNA3.1-flag/β-actin真核基因表達載體,其重組質(zhì)�？稍贖eLa細胞中有效表達約43×10~3KD融合蛋白。
【作者單位】： 遼東學(xué)院農(nóng)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 小鼠 β-actin基因 RT-PCR 克隆 真核表達
【分類號】：Q78
【正文快照】： β-actin基因編碼肌動蛋白,微絲的主要蛋白質(zhì)成分,具收縮功能,廣泛分布。由于β-actin基因在各組織細胞中的表達水平相對恒定,故檢測基因表達水平時,常作為相對定量分析的參照,而被公認(rèn)為內(nèi)參基因[1],亦稱“管家基因”[2]。β-ac-tin蛋白表達水平通常恒定[3],常作為Western bl

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張杰;彭勝民;周波;戰(zhàn)晴晴;張榮沭;馬鳳鳴;;RT-PCR克隆甜菜硝酸還原酶cDNA全長序列及分析[J];植物研究;2008年04期

，

本文編號：991996