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錦鯽Clock基因表達量分析中的內(nèi)參基因穩(wěn)定性比較

發(fā)布時間:2017-09-23 05:24

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  更多相關(guān)文章: 內(nèi)參基因 qRT-PCR 錦鯽 Ge Norm程序 Norm Finder程序


【摘要】:為研究錦鯽Clock基因表達量分析中的內(nèi)參基因穩(wěn)定性,采用qRT-PCR技術(shù)進行實時熒光定量分析,并用Ge Norm和Norm Finder軟件對5個內(nèi)參基因(RPL13,GAPDH,18 S rRNA,β-actin和RPS29)進行穩(wěn)定性評估,篩選出不同組織中最適合的內(nèi)參基因,以準確定量Clock基因的相對表達水平.實驗結(jié)果表明,5個內(nèi)參基因中,18 S rRNA在錦鯽的肌肉、心臟、肝臟中表達最穩(wěn)定,β-actin在腸中表達最穩(wěn)定,RPL13在腎中表達最穩(wěn)定;根據(jù)篩選的內(nèi)參基因定量Clock基因的相對表達水平發(fā)現(xiàn),Clock基因在錦鯽肌肉中相對表達量最高,其次依次是肝臟、腎、腸,心臟中最低.本研究準確定量Clock基因,為錦鯽生物鐘節(jié)律機制的下一步研究奠定了理論基礎(chǔ).
【作者單位】: 湖南農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院;湖南省水產(chǎn)原種場;湖南省水產(chǎn)科學研究所;中南大學基礎(chǔ)醫(yī)學院;
【關(guān)鍵詞】內(nèi)參基因 qRT-PCR 錦鯽 Ge Norm程序 Norm Finder程序
【基金】:國家自然科學基金資助項目(31372530)
【分類號】:S917.4;Q78
【正文快照】: 實時熒光定量PCR(qRT-PCR)技術(shù)因具有靈敏度高、重復性好以及定量準確等優(yōu)點,被廣泛用于生物科學的各個研究領(lǐng)域.但這一技術(shù)能否準確定量取決于很多因素,如實驗材料質(zhì)量、RNA質(zhì)量、c DNA第一鏈合成效率及內(nèi)參基因的選擇[1].其中,選擇合適的內(nèi)參基因?qū)υ囼灁?shù)據(jù)進行校正和標準化

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本文編號:903449

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