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農(nóng)桿菌介導HaBADH基因轉(zhuǎn)化馬鈴薯的研究

發(fā)布時間:2017-09-21 23:18

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  更多相關(guān)文章: 馬鈴薯 轉(zhuǎn)化 農(nóng)桿菌 HaBADH基因 轉(zhuǎn)基因植株


【摘要】:本研究以馬鈴薯(Solanum tuberosum L.)試管薯作為轉(zhuǎn)化受體,利用農(nóng)桿菌介導法將從梭梭中獲得的甜菜堿醛脫氫酶基因(HaBADH)轉(zhuǎn)化馬鈴薯,采用正交試驗設計優(yōu)化了影響馬鈴薯轉(zhuǎn)化的4個主要因子,建立了農(nóng)桿菌介導的馬鈴薯高效轉(zhuǎn)化體系,獲得了轉(zhuǎn)基因植株。研究結(jié)果表明,轉(zhuǎn)化過程中,浸染時間15 min,菌液濃度OD600為1.0,篩選培養(yǎng)時卡那霉素濃度30 mg/L、品種為大西洋為最佳轉(zhuǎn)化方案,抗性芽分化率最高達到了35.9%;4個因子中基因型對轉(zhuǎn)化效率影響最大,菌液濃度的影響次之,卡那霉素濃度和浸染時間的影響最小。經(jīng)PCR、RT-PCR及Southern blot檢測,證明了HaBADH基因整合到馬鈴薯中,陽性轉(zhuǎn)化率為45.3%。
【作者單位】: 寧夏農(nóng)林科學院農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究中心;寧夏大學生命科學學院;寧夏農(nóng)林科學院固原農(nóng)科所;
【關(guān)鍵詞】馬鈴薯 轉(zhuǎn)化 農(nóng)桿菌 HaBADH基因 轉(zhuǎn)基因植株
【基金】:寧夏回族自治區(qū)育種專項(2014NYY201) 寧夏回族自治區(qū)自然科學基金(NZ14210;NZ14269) 寧夏農(nóng)林科學院先導資金項目(NKYJ-14-05;NKYJ-15-32;NKYG-15-06;NKYJ-15-36;NKYQ-14-07)共同資助
【分類號】:S532
【正文快照】:

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