斑節(jié)對(duì)蝦谷氨酰胺合成酶基因的克隆及氨氮脅迫對(duì)其時(shí)空表達(dá)的影響
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【摘要】:根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的斑節(jié)對(duì)蝦(Penaeus monodon)c DNA文庫得到的EST序列,利用RACE技術(shù)獲得了斑節(jié)對(duì)蝦谷氨酰胺合成酶基因(Pm GS)的c DNA全長(zhǎng)序列,進(jìn)行了相關(guān)生物信息學(xué)分析,在此基礎(chǔ)上采用熒光定量的方法研究了Pm GS基因在斑節(jié)對(duì)蝦不同組織、氨氮脅迫過程中差異表達(dá)情況。該序列全長(zhǎng)1 420bp,開放閱讀框(ORF)為1 086 bp,3'非編碼區(qū)(UTR)為294 bp,包括含有27個(gè)堿基的poly(A)尾,5'非編碼區(qū)(UTR)為40 bp。ORF可編碼361個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)分子量為40.423 ku,理論等電點(diǎn)為6.19。序列含有一個(gè)谷氨酰胺結(jié)合結(jié)構(gòu)域(Gln-synt_C),8個(gè)磷酸化位點(diǎn),2個(gè)糖基化位點(diǎn)。斑節(jié)對(duì)蝦和中國明對(duì)蝦的GS基因的相似性最高,達(dá)99%。Pm GS-mRNA在斑節(jié)對(duì)蝦各組織中都有表達(dá),在淋巴組織中表達(dá)量最高,其次為鰓組織,在胸神經(jīng)中的表達(dá)量最低。96 h高濃度氨氮脅迫后,Pm GS-mRNA在肝胰腺中的表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組,但在鰓中的表達(dá)水平顯著低于對(duì)照組(P0.05)。以上結(jié)果暗示,Pm GS在氨氮代謝方面具有重要的作用,可能參與了斑節(jié)對(duì)蝦機(jī)體的急性氨氮脅迫應(yīng)答反應(yīng)。
【作者單位】: 中國水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所農(nóng)業(yè)部南海漁業(yè)資源開發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 斑節(jié)對(duì)蝦 谷氨酰胺合成酶 基因克隆 氨氮脅迫 組織表達(dá)
【基金】:蝦產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS-47) 廣東省省級(jí)科技計(jì)劃項(xiàng)目(2013B020201001) 廣東省海洋與漁業(yè)科技推廣專項(xiàng)(B201400B01,A201501A06) 海南省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(313117) 深圳市生物產(chǎn)業(yè)發(fā)展專項(xiàng)資金現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生物產(chǎn)業(yè)推廣扶持計(jì)劃項(xiàng)目(NYSW20140331010053)
【分類號(hào)】:S917.4
【正文快照】: 谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)廣泛存在于動(dòng)植物細(xì)胞中,在甲殼動(dòng)物氨氮代謝過程中發(fā)揮著重要作用[1]。谷氨酰胺合成酶通過將體內(nèi)過多的氨和谷氨酸轉(zhuǎn)換成谷氨酰胺,降低體內(nèi)氨氮的濃度,達(dá)到解毒代謝的目的。谷氨酰胺是一種中性無毒物質(zhì),容易穿透細(xì)胞膜,是氨的主要運(yùn)
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