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神經(jīng)毒素基因RjAa17f在Sf9細(xì)胞中的表達(dá)及活性分析

發(fā)布時(shí)間:2017-09-09 04:46

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  更多相關(guān)文章: 棉鈴蟲 神經(jīng)毒素基因RjAaf Sf RjAaf毒蛋白 桿狀病毒真核表達(dá)系統(tǒng)


【摘要】:【目的】在昆蟲草地貪夜蛾細(xì)胞(Sf9)中表達(dá)一種能專一阻斷昆蟲鈉、鉀離子通道的神經(jīng)毒素基因RjAa17f!痉椒ā窟\(yùn)用桿狀病毒真核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)RjAa17f毒蛋白,并用蛋白質(zhì)印跡對(duì)其進(jìn)行檢測(cè);測(cè)定RjAa17f毒蛋白引起健康棉鈴蟲中腸膜電位的變化,并對(duì)其毒力進(jìn)行測(cè)定!窘Y(jié)果】通過(guò)重組桿狀病毒質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染和Western blot檢測(cè)驗(yàn)證,神經(jīng)毒素基因RjAa17f的重組Bacmid已經(jīng)成功轉(zhuǎn)染到Sf9細(xì)胞中,且在Sf9中表達(dá)出與預(yù)測(cè)大小一致的RjAa17f目的蛋白;此毒蛋白作用于棉鈴蟲中腸3~12h后,中腸膜電位與CK相比差異顯著,且隨著作用時(shí)間的延長(zhǎng),棉鈴蟲中腸膜電位呈逐步升高的趨勢(shì),作用9h以后,升高的幅度逐漸降低,趨于平緩。RjAa17f毒蛋白對(duì)棉鈴蟲的LD50為108.12μg/g!窘Y(jié)論】在Sf9細(xì)胞內(nèi)表達(dá)出了有活性的RjAa17f毒蛋白,且該毒蛋白對(duì)棉鈴蟲中腸膜電位有顯著改變。
【作者單位】: 西北農(nóng)林科技大學(xué)植保資源利用與病蟲害治理教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】棉鈴蟲 神經(jīng)毒素基因RjAaf Sf RjAaf毒蛋白 桿狀病毒真核表達(dá)系統(tǒng)
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31170609;31270691)
【分類號(hào)】:Q78;S476
【正文快照】: 棉鈴蟲核型多角體病毒早在1973年已經(jīng)在美國(guó)環(huán)保局的批準(zhǔn)下成為第一個(gè)注冊(cè)登記的桿狀病毒商品殺蟲劑。雖然桿狀病毒具有高度的專一性、對(duì)人畜及動(dòng)物無(wú)害、對(duì)環(huán)境無(wú)污染等優(yōu)點(diǎn),但其也有一定的缺點(diǎn),如殺蟲速率相對(duì)緩慢、對(duì)高齡害蟲殺蟲力弱等[1]。因此,利用各種生物毒素對(duì)桿狀病

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 王曉遲,戚藝華,歐陽(yáng)藩;Sf9細(xì)胞的培養(yǎng)工藝[J];化工冶金;1998年03期

2 ;[J];;年期

,

本文編號(hào):818387

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