本文關(guān)鍵詞：豬病毒性腹瀉檢測基因芯片的兩種樣品標記技術(shù)比較

  更多相關(guān)文章： 豬腹瀉病毒 基因芯片 直接標記 間接標記 比較

【摘要】：對豬病毒性腹瀉檢測芯片的兩種樣品標記方法進行比較。分別選取豬流行性腹瀉病毒(PEDV)的S和M基因,豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)的N和S基因,A型豬輪狀病毒(GAR)的VP7和NSP4基因設計引物,用PCR擴增制備靶基因,純化后制備豬病毒性腹瀉聯(lián)合檢測基因芯片。提取樣品核酸,采用Cy3直接標記法和間接標記法進行PCR擴增標記,標記的樣品再與芯片雜交、掃描和數(shù)據(jù)分析,同時對兩種標記方法的特異性、敏感性等進行了比較。結(jié)果表明,兩種方法標記的樣品均能與基因芯片特異性雜交,但直接法的中位信號值(median)均高于間接法的中位信號值,直接法的芯片雜交信噪比是用間接法的5倍以上。兩種標記方法制備樣品特異性好,豬藍耳病毒、豬瘟病毒、豬乙型腦炎病毒、豬偽狂犬病毒驗證檢測為陰性;直接法和間接法的最低檢測濃度分別為10~5和10~7 copies·μL~(-1),前者的靈敏性是后者的100倍。應用優(yōu)化的直接標記法處理56份臨床樣品,進行芯片的檢測應用,結(jié)果與RT-PCR一致。本研究結(jié)果表明直接法熒光標記樣品可明顯提高病毒性腹瀉檢測芯片的檢測效果。
【作者單位】： 四川農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院豬病研究中心與基因芯片實驗室;四川省崇州市農(nóng)村發(fā)展局;
【關(guān)鍵詞】： 豬腹瀉病毒 基因芯片 直接標記 間接標記 比較
【基金】：公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項項目(201203056)
【分類號】：S858.28
【正文快照】： 豬流行性腹瀉病(porcine epidemic diarrhea,PED)、豬傳染性胃腸炎(transmissible gastroenteri-tis of swine,TGE)和A型豬輪狀病毒病(group Aporcine rotavirus,GAR)是分別由豬流行性腹瀉病毒(PEDV)、豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)以及A型豬輪狀病毒(GAR)引起的一類高度接觸性腸

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 時進先;;豬病毒性腹瀉病的防治[J];安徽農(nóng)學通報;2006年08期

2 陳芳正;;淺談豬病毒性腹瀉的預防和治療[J];青海畜牧獸醫(yī)雜志;2007年05期

3 安正華;山懷林;李志凌;;淺談冬春季節(jié)豬病毒性腹瀉的防治[J];云南畜牧獸醫(yī);2009年06期

4 王山宏;;豬病毒性腹瀉的診斷與防治[J];養(yǎng)殖技術(shù)顧問;2011年10期

5 蔡武;;豬病毒性腹瀉的診治[J];中國畜牧獸醫(yī)文摘;2012年07期

6 林曉紅;;淺談春季豬病毒性腹瀉病的治療及預防措施[J];中國畜牧獸醫(yī)文摘;2013年01期

7 付木水;中成藥“維迪康”治療豬病毒性腹瀉[J];中國動物檢疫;1995年03期

8 李傳新;;冬季豬病毒性腹瀉病的防控(上)[J];農(nóng)家致富;2012年22期

9 李傳新;;冬季豬病毒性腹瀉病的防控(下)[J];農(nóng)家致富;2012年23期

10 何少瑜,林斌;豬病毒性腹瀉疫苗的研究現(xiàn)狀和展望[J];福建畜牧獸醫(yī);2000年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 劉昱;唐利;;秋冬季節(jié)豬病毒性腹瀉病的控制[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物傳染病學分會第三屆豬病防控學術(shù)研討會論文集[C];2008年

2 鄭德興;;冬季新生乳豬病毒性腹瀉防控對策探討[A];“生泰爾”杯全國養(yǎng)豬技術(shù)征文大賽——中國畜牧獸醫(yī)學會養(yǎng)豬學分會五屆三次理事會暨生豬產(chǎn)業(yè)科技創(chuàng)新發(fā)展論壇論文集[C];2012年

3 田小艷;孫華;鄧雨修;蘇潤環(huán);李春梅;招麗嬋;王東東;宋延華;;3種豬病毒性腹瀉感染的多重PCR檢測[A];中國畜牧獸醫(yī)學會家畜傳染病學分會第七屆全國會員代表大會暨第十三次學術(shù)研討會論文集（下冊）[C];2009年

4 何文香;;淺談仔豬病毒性腹瀉的防制[A];2013年福建省畜牧獸醫(yī)學術(shù)年會論文集[C];2013年

5 高林;;豬病診治問答[A];2005遼寧省畜牧獸醫(yī)學會養(yǎng)豬研究會學術(shù)年會論文集[C];2005年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 石家莊市行唐縣河合農(nóng)協(xié)會 馬樹平;豬病毒性腹瀉應以預防為主[N];河北農(nóng)民報;2008年

2 聞文;冬季謹防豬病毒性腹瀉[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2005年

3 高懷濤;冬季謹防生豬病毒性腹瀉[N];河南科技報;2013年

4 吳海山;冬季豬病毒性腹瀉的預防與治療[N];駐馬店日報;2008年

5 上海恒豐強動物藥業(yè)有限公司技術(shù)部 高懷濤;一例豬病毒性腹瀉的診治[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2012年

6 海恒豐強動物藥業(yè)有限公司技術(shù)部 高懷濤;謹防冬春季生豬病毒性腹瀉[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2013年

7 ;如何防治豬病毒性腹瀉[N];吉林農(nóng)村報;2008年

8 稼穡;冬季謹防豬病毒性腹瀉[N];駐馬店日報;2005年

9 侯和菊;冬季謹防豬病毒性腹瀉[N];農(nóng)民日報;2003年

10 上海恒豐強動物藥業(yè)有限公司技術(shù)部 王冬梅;豬病毒性腹瀉的預防[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2012年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 劉艷成;內(nèi)蒙古豬病毒性腹瀉流行病學調(diào)查及豬流行性腹瀉病毒M、S基因序列分析[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2015年

2 張坤;豬病毒性腹瀉多重RT-PCR診斷方法的建立和應用及豬輪狀病毒的分離[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2010年

，

本文編號：815405