本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)基因柑橘外源基因拷貝數(shù)的實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)

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【摘要】：為分析轉(zhuǎn)基因柑橘中外源基因整合拷貝數(shù),基于實(shí)時(shí)熒光定量PCR法,建立通用、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便的轉(zhuǎn)基因柑橘外源基因拷貝數(shù)檢測(cè)體系,利用該體系成功檢測(cè)了150個(gè)轉(zhuǎn)基因柑橘單株系外源基因整合拷貝數(shù)。結(jié)果表明,轉(zhuǎn)基因柑橘中外源基因整合最低拷貝數(shù)為1,最高達(dá)5個(gè),其中1、2和≥3拷貝的單株數(shù)分別占總數(shù)的40.0%、18.0%和42.0%;采用Southern blot技術(shù)進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果基本一致,極少數(shù)單株經(jīng)實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析的拷貝數(shù)比Southern blot檢測(cè)的數(shù)值高。說(shuō)明本研究建立的實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)轉(zhuǎn)基因柑橘外源基因整合拷貝數(shù)更加準(zhǔn)確可靠�？截悢�(shù)為1~2的轉(zhuǎn)基因株系可作為將來(lái)開(kāi)展轉(zhuǎn)基因目標(biāo)性狀研究及轉(zhuǎn)基因生物安全性評(píng)價(jià)有利用價(jià)值的試驗(yàn)材料。
【作者單位】： 西南大學(xué)/中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院柑桔研究所 國(guó)家柑桔工程技術(shù)研究中心 國(guó)家柑桔品種改良中心;
【關(guān)鍵詞】： 柑橘 實(shí)時(shí)熒光定量PCR 轉(zhuǎn)基因 拷貝數(shù) Southern blot
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31272150) 國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金項(xiàng)目(CARS-27) 國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2012BAD19B06) 重慶市基礎(chǔ)與前沿研究計(jì)劃項(xiàng)目(cstc2015jcyj A80042) 中央高校基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)(XDJK2014C129);中央高�；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)(XDJK2014A018) 重慶市集成示范重點(diǎn)項(xiàng)目(cstc2015jcsf-kjfp80027)
【分類號(hào)】：S666
【正文快照】： 隨著規(guī)模化、實(shí)用化轉(zhuǎn)基因柑橘技術(shù)的發(fā)展,陸續(xù)得到了大量各類柑橘的轉(zhuǎn)基因材料。外源功能基因在基因組中的整合分析是轉(zhuǎn)基因柑橘材料進(jìn)行生物安全性評(píng)價(jià)中必不可少的研究?jī)?nèi)容。研究表明,多拷貝外源基因,多數(shù)轉(zhuǎn)基因轉(zhuǎn)錄后沉默,而單拷貝外源基因很少發(fā)生沉默(Tang et al.,2007;

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 胡加誼;羅志文;范鴻雁;李向宏;劉志昕;何凡;;菠蘿凋萎相關(guān)病毒 2實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)方法的建立[J];園藝學(xué)報(bào);2014年06期

2 周朋;余乃通;章紹延;胡加誼;劉志昕;;應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR研究BBTV DNA1在香蕉不同組織中的含量[J];熱帶作物學(xué)報(bào);2014年07期

3 高葦;李寶聚;王萬(wàn)立;郝永娟;石延霞;;土壤中黃瓜棒孢葉斑病病原菌實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)技術(shù)研究[J];華北農(nóng)學(xué)報(bào);2014年02期

4 張金平;何曉明;江彪;謝大森;彭慶務(wù);王永飛;馬三梅;;鐮刀菌酸脅迫下節(jié)瓜實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析內(nèi)參基因的選擇[J];廣東農(nóng)業(yè)科學(xué);2014年10期

5 ;[J];;年期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 胡加誼;三種菠蘿凋萎相關(guān)病毒實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)方法的建立[D];海南大學(xué);2014年

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本文編號(hào)：798003