本文關(guān)鍵詞：利用RNA干擾技術(shù)沉默稻縱卷葉螟幾丁質(zhì)合成酶A基因

  更多相關(guān)文章： RNA干擾 稻縱卷葉螟 幾丁質(zhì)合成酶A基因 雙鏈RNA

【摘要】：稻縱卷葉螟(Cnaphalocrocis medinalis)是一種主要的水稻害蟲(chóng),幾丁質(zhì)合成酶是昆蟲(chóng)體內(nèi)幾丁質(zhì)合成通路中的一個(gè)關(guān)鍵酶,在昆蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育中具有重要作用,是控制害蟲(chóng)的理想靶標(biāo)。本文采用RNA干擾(RNAi)技術(shù),以稻縱卷葉螟幾丁質(zhì)合成酶A基因(CmCHSA)為靶標(biāo),設(shè)計(jì)兩個(gè)靶位點(diǎn)CmCHSA-I和CmCHSA-II,在體外分別合成其雙鏈RNA(dsRNA),用顯微注射法導(dǎo)入3齡幼蟲(chóng)體內(nèi),然后通過(guò)表型觀察和熒光定量PCR(RT-q PCR)檢測(cè)干擾效應(yīng)。結(jié)果表明,注射兩種dsRNA后縱卷葉螟對(duì)水稻的取食明顯下降,生長(zhǎng)發(fā)育阻滯,蟲(chóng)體變小變黑和畸形,有的出現(xiàn)死亡。RT-q PCR表明,注射CmCHSA-I和CmCHSA-II兩種dsRNA在96 h后,CmCHSA的表達(dá)量相比對(duì)照分別下降了59%和64%。注射CmCHSA-I和CmCHSA-II兩種dsRNA 7 d后,稻縱卷葉螟的死亡率分別為80%和83.33%,與對(duì)照組相比,分別增加了66.67%和70%。本研究用注射法RNAi技術(shù)成功實(shí)現(xiàn)了對(duì)稻縱卷葉螟幾丁質(zhì)合成酶A基因的沉默,為利用該技術(shù)研究昆蟲(chóng)基因的功能,以及通過(guò)轉(zhuǎn)基因RNAi技術(shù)防治稻縱卷葉螟奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 貴州大學(xué)昆蟲(chóng)研究所貴州山地農(nóng)業(yè)病蟲(chóng)害重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)實(shí);貴州大學(xué)昆蟲(chóng)資源開(kāi)發(fā)利用特色重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： RNA干擾 稻縱卷葉螟 幾丁質(zhì)合成酶A基因 雙鏈RNA
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目“利用RNAi技術(shù)防治稻縱卷葉螟的研究”(31360443) 貴州省科技創(chuàng)新人才團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目“貴州省節(jié)肢動(dòng)物資源開(kāi)發(fā)利用科技創(chuàng)新人才團(tuán)隊(duì)”(黔科合人才團(tuán)隊(duì)[2014]4001號(hào))
【分類(lèi)號(hào)】：S435.112.1
【正文快照】： 水稻(Oryza sativa)是人類(lèi)的一種主要糧食作物,世界上有一半以上的人口以稻米為主食。我國(guó)是世界上最大的大米生產(chǎn)國(guó)和消費(fèi)國(guó),有65%以上的人口以大米為主食。因此,水稻高產(chǎn)豐收對(duì)我國(guó)糧食安全至關(guān)重要。然而,蟲(chóng)害則是造成水稻減產(chǎn)的主要原因之一。稻縱卷葉螟(Cnaphalocrocis m

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 王高峰;馮欣;彭德良;孫建華;;RNA干擾技術(shù)在植物線蟲(chóng)基因功能研究及蟲(chóng)害防治方面的應(yīng)用[J];生物技術(shù)通報(bào);2008年05期

2 ;[J];;年期

，

本文編號(hào)：772225