本文關(guān)鍵詞：三種檢測(cè)內(nèi)源性基因修飾方法比較

  更多相關(guān)文章： 基因組編輯 Surveyor核酸酶 T Endonuclease I 高分辨率熔解曲線(HRM)

【摘要】：為獲得準(zhǔn)確的突變信息,除直接測(cè)序外,實(shí)驗(yàn)初步確定了3種人工核酸酶生物學(xué)活性檢測(cè)方法。利用Surveyor nuclease、T7E1(T7 Endonuclease 1)和HRM(High resolution melt),均以變性退火突變型和野生型DNA序列形成扭曲的雙螺旋DNA(distorted duplex DNA)為基礎(chǔ)的3種人工核酸酶生物學(xué)活性檢測(cè)方法,確定目標(biāo)位點(diǎn)是否發(fā)生突變。實(shí)驗(yàn)成功檢測(cè)出作用于綿羊MNST基因第一外顯子的CRISPR/Cas9和第三外顯子的TALEN目標(biāo)位點(diǎn)發(fā)生突變,并對(duì)3種檢測(cè)方法的結(jié)果和特點(diǎn)進(jìn)行了分析比較,得出3種檢測(cè)方法的優(yōu)缺點(diǎn),為實(shí)驗(yàn)室分析確定細(xì)胞利用非同源末端連接修復(fù)DNA雙鏈斷裂結(jié)果提供參考。
【作者單位】： 新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)綿羊繁育生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 基因組編輯 Surveyor核酸酶 T Endonuclease I 高分辨率熔解曲線(HRM)
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31360276) 兵團(tuán)院士資金專項(xiàng)(2007JC19) 兵團(tuán)國際合作項(xiàng)目(2013BC004) 新疆兵團(tuán)綿羊繁育生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目(2013KLS01) 優(yōu)質(zhì)轉(zhuǎn)基因肉羊新品種培育項(xiàng)目(2013ZX08008-003)
【分類號(hào)】：Q78
【正文快照】： 基因突變已成為當(dāng)今生命科學(xué)研究的熱點(diǎn)之一,其檢測(cè)方法也隨之迅速發(fā)展,變性高效液相色譜分析,單鏈構(gòu)象異構(gòu)多態(tài)分析技術(shù),毛細(xì)管電泳,直接測(cè)序,變性梯度凝膠電泳與化學(xué)或酶促裂解等突變檢測(cè)方法中,酶錯(cuò)配切割(Enzyme mismatchcleavage,EMC)方法臨床應(yīng)用簡單,具有一定的優(yōu)越性

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張建佚;馮潔;楊澤;霍正浩;;高分辨率熔解曲線小擴(kuò)增子法結(jié)合混樣法在線粒體13928G>C突變分析中的應(yīng)用[J];中國醫(yī)藥生物技術(shù);2009年06期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 王s，

本文編號(hào)：769836