本文關(guān)鍵詞：殺粉蝶菌素A1生物合成基因簇中甲基轉(zhuǎn)移酶PieB2的功能

  更多相關(guān)文章： 殺粉蝶菌素A 甲基轉(zhuǎn)移酶 基因敲除 生物合成

【摘要】：【目的】研究殺粉蝶菌素A1產(chǎn)生菌中甲基轉(zhuǎn)移酶基因pieB2的功能�！痉椒ā坷媒雍限D(zhuǎn)移和同源重組雙交換的方法,構(gòu)建pieB2基因缺失突變株,以及利用接合轉(zhuǎn)移的方法,構(gòu)建回補菌株。通過高保真PCR克隆pieB2基因到表達載體pET28a上,構(gòu)建質(zhì)粒pJTU5997,轉(zhuǎn)化入大腸桿菌E.coliBL21(DE3)/pLysE中誘導表達。利用高效液相色譜檢測PieB2的體外酶活�！窘Y(jié)果】獲得了pieB2基因缺失的雙交換突變株。發(fā)酵結(jié)果顯示,該突變株不再產(chǎn)生殺粉蝶菌素A1,而是積累了一種脫甲基產(chǎn)物。N-末端融合組氨酸標簽的PieB2在大腸桿菌中獲得可溶性表達,通過體外催化證明了PieB2甲基轉(zhuǎn)移酶的功能�！窘Y(jié)論】體內(nèi)遺傳實驗和體外生化實驗證明了PieB2作為甲基轉(zhuǎn)移酶在殺粉蝶菌素A1合成中的作用。
【作者單位】： 上海交通大學生命科學技術(shù)學院微生物代謝國家重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 殺粉蝶菌素A 甲基轉(zhuǎn)移酶 基因敲除 生物合成
【基金】：國家自然科學基金(31170085) 國家“973計劃”(2012CB721004)~~
【分類號】：TQ453;Q78
【正文快照】： 殺粉蝶菌素A1(Piericidin A1,圖1)是一種具2012年,上海交通大學聯(lián)合加州大學洛杉磯分校有良好生物活性的α-吡啶酮類天然產(chǎn)物,可由多在此菌株中克隆了殺粉蝶菌素A1生物合成基因種鏈霉菌產(chǎn)生[1]。它通過結(jié)合線粒體呼吸作用復簇,初步解析了其核心結(jié)構(gòu)α-吡啶酮的生物合成合體I,

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李瀟;甲基轉(zhuǎn)移酶修復蛋白質(zhì)損傷而延長生命[J];自然雜志;2002年04期

2 陳欣;王子成;;植物DNA甲基轉(zhuǎn)移酶[J];生命的化學;2009年04期

3 劉澤軍,江海宏;DNA甲基轉(zhuǎn)移酶[J];生命科學;2002年03期

4 蘇玉;王溪;朱衛(wèi)國;;DNA甲基轉(zhuǎn)移酶的表達調(diào)控及主要生物學功能[J];遺傳;2009年11期

5 王志剛;吳建新;;DNA甲基轉(zhuǎn)移酶分類、功能及其研究進展[J];遺傳;2009年09期

6 季守平,由英,吳英,章?lián)P培;反義RNA調(diào)節(jié)腫瘤細胞O~6-甲基鳥嘌呤-DNA甲基轉(zhuǎn)移酶活性[J];中國生物化學與分子生物學報;1998年03期

7 吳春太;李維國;高新生;張曉飛;;植物DNA甲基轉(zhuǎn)移酶的生物信息學分析[J];西南大學學報(自然科學版);2010年04期

8 楊軍;O~6－甲基鳥嘌呤－DNA甲基轉(zhuǎn)移酶研究進展[J];國外醫(yī)學.遺傳學分冊;1996年02期

9 范保星,張開泰,吳德昌;真核生物的DNA甲基轉(zhuǎn)移酶與DNA甲基化[J];生命的化學;2001年05期

10 白志勇,徐國賓,武淑蘭;同位素示蹤微量法測定白血病細胞DNA-甲基轉(zhuǎn)移酶活性[J];北京醫(yī)科大學學報;2000年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李旺;劉卓靚;林卉;聶舟;陳金華;徐霞紅;姚守拙;;基于甲基化響應DNAzyme的無標比色法測定甲基轉(zhuǎn)移酶活性[A];中國化學會第27屆學術(shù)年會第03分會場摘要集[C];2010年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 李冰;哺乳動物甲基轉(zhuǎn)移酶的鑒定及功能研究[D];中國科學院研究生院（上海生命科學研究院）;2007年

2 Muhammad Abid Sheikh;DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3b新靶點的鑒定及其在神經(jīng)元分化中表達的調(diào)節(jié)及功能研究[D];東北師范大學;2013年

3 宋淵;擬南芥DNA甲基轉(zhuǎn)移酶DNMT2與組蛋白去乙酰化酶家族HD2互作及功能研究[D];蘭州大學;2010年

4 馮琛卓;甲殼動物DNA甲基轉(zhuǎn)移酶2（Dnmt2）基因的分子特征、表達分析及DNA甲基化水平檢測[D];浙江大學;2007年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 羅小娥;基于二茂鐵淬滅釕聯(lián)吡啶和超級三明治雜交電化學發(fā)光檢測DNA甲基轉(zhuǎn)移酶[D];西北大學;2013年

2 魏玲玲;渾球紅細菌鎂螯合酶和鎂原卟啉Ⅸ甲基轉(zhuǎn)移酶的重組表達與純化[D];安徽農(nóng)業(yè)大學;2012年

3 趙艷麗;水稻中DNA甲基轉(zhuǎn)移酶的原核表達及功能初步鑒定[D];東北師范大學;2010年

4 董梅;果蠅精子生成過程中新基因的鑒定及哺乳動物甲基轉(zhuǎn)移酶3a/3b作用研究[D];東北師范大學;2004年

5 朱樹亮;維吉尼亞鏈霉菌IBL-14中咖啡酰輔酶A-O-甲基轉(zhuǎn)移酶的基因功能鑒定[D];安徽大學;2012年

6 王文佳;N~6-甲基腺嘌呤甲基轉(zhuǎn)移酶新組分WTAP篩選及初步鑒定[D];中國科學院北京基因組研究所;2014年

7 王娟;IGF-1對肌肉特異性組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶SMYD1的表達調(diào)控研究[D];華東師范大學;2010年

8 董爭紅;活躍鏈霉菌中耐抗生素的rRNA甲基轉(zhuǎn)移酶NSR的表達、純化與結(jié)構(gòu)研究[D];復旦大學;2010年

，

本文編號：750893