本文關(guān)鍵詞：絲瓜過(guò)氧化氫酶基因CAT1的克隆及表達(dá)分析

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【摘要】：采用RT-PCR和RACE技術(shù)從普通絲瓜果肉中分離到1條長(zhǎng)達(dá)1 755 bp的cDNA序列,并對(duì)其進(jìn)行序列分析。結(jié)果表明,該序列包含1個(gè)1 479 bp的開(kāi)放讀碼框(ORF);預(yù)測(cè)編碼492個(gè)氨基酸,理論分子量為56.98 kD,等電點(diǎn)為7.126;編碼的蛋白與黃瓜(Cucumis sativus)、擬南芥(Arabidopsis thaliana)和蘿卜(Raphanus sativus)同源蛋白的相似性均在92%以上,顯示其高度的保守性,將基因命名為L(zhǎng)c CAT1,Gen Bank登錄號(hào)為:KP222260。Wolf Psort預(yù)測(cè)其亞細(xì)胞定位于過(guò)氧化物酶體(Peroxisomal)內(nèi);Motif Scan分析顯示,蛋白氨基酸序列344~352位和54~70位分別為過(guò)氧化氫酶近端血紅素—配體及血紅素活性位點(diǎn)特征序列,推測(cè)其屬于典型過(guò)氧化氫酶類(lèi)(typical catalase,t CAT)。熒光定量PCR分析顯示,Lc CAT1具有組織表達(dá)特異性,在普通絲瓜品種‘福絲3號(hào)’葉片中表達(dá)量最高,將近為花、果實(shí)、根和莖中表達(dá)量的5倍。Lc CAT1在所選的6個(gè)絲瓜品種的果肉中呈差異表達(dá),普通絲瓜中的表達(dá)量均高于有棱絲瓜;在普通絲瓜品種‘福絲3號(hào)’鮮切及采后儲(chǔ)藏褐變過(guò)程中隨時(shí)間增加而呈現(xiàn)上調(diào)表達(dá)趨勢(shì),且與其酶活性的變化趨勢(shì)基本一致。Lc CAT1可能在絲瓜果肉褐變產(chǎn)生過(guò)程中發(fā)揮著一定的調(diào)控作用。
【作者單位】： 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究中心福建省蔬菜工程技術(shù)研究中心;
【關(guān)鍵詞】： 絲瓜 褐變 CAT 基因克隆 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
【基金】：福建省屬公益類(lèi)科研院所基本科研專(zhuān)項(xiàng)(2014R1026-11,2015R1026-9,2014R1026-6) 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)PI項(xiàng)目(2016PI-40);福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院青年人才創(chuàng)新基金項(xiàng)目(2015QC-6)
【分類(lèi)號(hào)】：S642.4
【正文快照】： 絲瓜分為有棱絲瓜(Luffa acutangula Roxb.)和普通絲瓜(L.cylindrical Roem.)兩個(gè)栽培種,前者主要分布在廣東、廣西、海南等地區(qū),其他地區(qū)則以普通絲瓜為主(蘇小俊,2009)。有棱絲瓜果肉在烹飪過(guò)程中保持翠綠,不易褐變,口感也好(宋波,2008)。普通絲瓜果肉在其鮮切后及烹飪過(guò)程，

本文編號(hào)：741874