本文關鍵詞：牛eIF5基因原核表達與蛋白純化

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【摘要】：研究應用PCR方法擴增牛e IF5基因編碼序列,通過Eco RⅠ和SalⅠ酶切位點將其定向插入p GEX-4T-1載體,構建原核表達重組質(zhì)粒p GEX-4T-1-e IF5,并轉化大腸埃希菌BL21。酶切和測序鑒定正確后,用異丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)大量誘導表達,利用GST-Sepharose 4B親和珠純化,SDS-PAGE和Western Blot鑒定。結果表明,原核表達載體p GEX-4T-1-e IF5構建成功,Western Blot證實融合蛋白大量表達,純化后獲得GSTe IF5融合蛋白,為深入研究牛e IF5蛋白功能奠定基礎。
【作者單位】： 東北農(nóng)業(yè)大學黑龍江省高校農(nóng)業(yè)生物功能基因重點實驗室;
【關鍵詞】： 牛 eIF 克隆 原核表達 純化
【基金】：國家高技術研究發(fā)展計劃(863)項目(2013AA102504-03)
【分類號】：S823;Q78
【正文快照】： Prokaryotic expression and protein purification of gene bovine e IF5/GAO Xuejun,ZANG Yanli,WEI Chengjie,LUO Chaochao(Agricultural Biological Functional GeneLaboratory of Heilongjiang Province,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China)真核生物

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 王庭柱;郭永麗;高明春;羅修鑫;安東;劉瑩;師東方;;牛IFN-ε基因克隆、表達與抗病毒活性分析[J];東北農(nóng)業(yè)大學學報;2015年12期

2 李杰;張會;張瑩瑩;雙寶;王多佳;趙寧;李勇;赫福霞;;食品級木聚糖酶黑曲霉工程菌的構建[J];東北農(nóng)業(yè)大學學報;2013年11期

3 張芳;曾祥偉;明曉波;魏萍;祝玉卿;王琳;;傳染性支氣管炎病毒(IBV)小囊膜蛋白基因的原核表達[J];東北農(nóng)業(yè)大學學報;2008年01期

4 萬永奇,朱克毅,王善治,謝維;真核生物起始因子5[J];生物化學與生物物理進展;2002年01期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 于翠平;14-3-3γ對奶牛乳腺上皮細胞乳蛋白合成和細胞增殖的調(diào)節(jié)[D];東北農(nóng)業(yè)大學;2015年

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 白妍;趙蕾;杜威威;潘龍;黃小丹;楊貴君;李廣興;;雞傳染性支氣管炎病毒HH06株囊膜蛋白多克隆抗體制備及生物學功能檢測[J];中國畜牧獸醫(yī);2016年08期

2 高學軍;臧艷麗;魏誠杰;駱超超;;牛eIF5基因原核表達與蛋白純化[J];東北農(nóng)業(yè)大學學報;2016年06期

3 李杰;吳婷;馬南;王欣;楊建樂;李健友;張會;;白曲霉酸性蛋白酶在黑曲霉中表達[J];東北農(nóng)業(yè)大學學報;2016年05期

4 何國慶;劉同杰;楊浣漪;張國華;;現(xiàn)代生物技術在食品領域的應用[J];生物產(chǎn)業(yè)技術;2015年04期

5 劉靜;;真核表達載體pGCMV/IRES/EGFP/eIF5的構建[J];科技視界;2015年12期

6 陳璐璐;江連洲;鄧晨旭;劉君;李杰;;構建食品級植酸酶黑曲霉工程菌[J];農(nóng)業(yè)生物技術學報;2014年09期

7 李杰;高博;江連洲;劉君;鄧晨旭;陳璐璐;張會;;內(nèi)切葡聚糖酶基因在黑曲霉中的同源表達[J];東北農(nóng)業(yè)大學學報;2014年09期

8 吳瓊;李杰;;黑曲霉菌絲體低溫與超低溫保藏方法比較研究[J];科技創(chuàng)新與應用;2014年19期

9 李杰;岳苗苗;江連洲;韋素真;姚楊;張會;;單寧酶基因在黑曲霉中的同源表達[J];東北農(nóng)業(yè)大學學報;2014年07期

10 鄧晨旭;江連洲;陳璐璐;劉君;高博;李杰;;豬磷脂酶A2基因在黑曲霉中的表達[J];生物技術;2014年03期

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王君偉;郭永麗;高明春;;外源重組蛋白制備鵝免疫球蛋白輕鏈特異性多克隆抗體[J];東北農(nóng)業(yè)大學學報;2012年09期

2 李金春;楊然;李秀婷;宋煥祿;朱運平;;微生物木聚糖酶在食品工業(yè)中的應用進展[J];中國食品學報;2012年06期

3 李旭暉;吳生文;張志剛;辛秀明;;木聚糖酶在特型酒生產(chǎn)中的應用[J];釀酒科技;2011年05期

4 王凡;洪葵;;CTAB法提取野野村菌基因組DNA[J];微生物學通報;2010年08期

5 尤紀雪;朱鎏晴;連之娜;歐陽嘉;;重組木聚糖酶預處理對麥草漿漂白性能的影響[J];南京林業(yè)大學學報(自然科學版);2010年04期

6 王聰;張光杰;;木聚糖酶高產(chǎn)黑曲霉的選育及其酶學性質(zhì)研究[J];生物技術通報;2010年06期

7 張強;馬齊;徐升運;陳衛(wèi)峰;劉敏;;木聚糖酶降解玉米秸稈的工藝研究[J];食品科技;2009年06期

8 聶國興;王俊麗;明紅;;木聚糖酶的應用現(xiàn)狀與研發(fā)熱點[J];工業(yè)微生物;2008年01期

9 毛連山;余世袁;;木聚糖酶在紙漿漂白中應用的研究現(xiàn)狀[J];中國造紙學報;2006年03期

10 喬世峰;;干擾素-α對人肝癌細胞的抑制作用的研究[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志;2006年01期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 陸黎敏;MAPK1和eEF1B對奶牛乳腺上皮細胞泌乳調(diào)控作用及機理研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學;2013年

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孫軍;;淺談原核表達的技巧[J];大學時代;2006年07期

2 金元昌;李景鵬;李會東;周建紅;;重組促性腺激素釋放激素基因原核表達的影響因素[J];湘潭師范學院學報(自然科學版);2006年02期

3 韓鈺;王艷林;;小鼠精胺氧化酶的原核表達與鑒定[J];生物技術通訊;2007年01期

4 朱向前;楊靜;丁曉然;王升啟;;重組人磷脂爬行酶1的原核表達及純化[J];生物技術通訊;2011年06期

5 哲名家;張淼濤;云濤;王玢tx;劉光清;;兔巖藻糖基轉移酶基因的克隆與原核表達[J];西北農(nóng)林科技大學學報(自然科學版);2012年04期

6 謝海燕,郭霄峰;豬α-干擾素的原核表達[J];華南農(nóng)業(yè)大學學報;2004年04期

7 孫東波;馮力;劉杰;時洪艷;佟有恩;劉勝旺;童光志;;豬傳染性胃腸炎病毒n基因的原核表達及重組蛋白的免疫活性分析[J];病毒學報;2006年02期

8 孫軍;王俊杰;秦波;伏秀青;高倩倩;王興智;朱筱娟;;粘著斑激酶的原核表達、純化及抗體的制備[J];分子科學學報;2007年02期

9 戴華;鄭佳玉;陳俊華;潘志明;焦新安;;雞α干擾素基因的原核表達及其活性測定[J];中國預防獸醫(yī)學報;2009年10期

10 湯承;張兆敏;岳華;;雞熱休克蛋白70基因的克隆及原核表達[J];西南民族大學學報(自然科學版);2011年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馬文濤;閆若潛;吳志明;劉光輝;盛敏;謝彩華;;豬白細胞介素-6的原核表達及其生物學活性研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會2010年學術年會——第二屆中國獸醫(yī)臨床大會論文集(下冊)[C];2010年

2 丁夢蝶;魯?shù)?王紅寧;田浪;陽泰;張毅;樊汶樵;郭自成;;禽傳染性支氣管炎病毒多基因串聯(lián)表位抗原的原核表達研究[A];四川省動物學會第九次會員代表大會暨第十屆學術研討會論文集[C];2011年

3 林海波;張桂紅;詹國英;廖明;任濤;羅開健;曹偉勝;徐成剛;辛朝安;;豬白細胞介素-6基因的非融合原核表達研究[A];第一屆中國養(yǎng)豬生產(chǎn)和疾病控制技術大會——2005中國畜牧獸醫(yī)學會學術年會論文集[C];2005年

4 隋桂琴;左玲;王桂云;;人堿性成纖維細胞生長因子的原核表達[A];中國眼底病論壇·全國眼底病專題學術研討會論文匯編[C];2008年

5 黃斯勇;梁英民;韓驊;李國輝;伍艷蘭;康志杰;何飛;張萍;徐恒;劉利;;人Detla-like4ext-93-217原核表達、純化及蛋白活性檢測[A];第12屆全國實驗血液學會議論文摘要[C];2009年

6 張紅;劉志國;屈伸;;人源受體相關蛋白的原核表達優(yōu)化及功能檢測[A];湖北省暨武漢生物化學與分子生物學學會第八屆會員代表大會和第十五次學術年會論文摘要匯編[C];2004年

7 袁志棟;王志亮;劉雨田;吳曉東;劉海生;;水貂朊蛋白前體基因的克隆與原核表達[A];中國畜牧獸醫(yī)學會畜牧獸醫(yī)生物技術學分會暨中國免疫學會獸醫(yī)免疫分會第六次研討會論文集[C];2005年

8 王士友;張耀洲;;一個新的家蠶基因的克隆、原核表達及純化[A];華東六省一市生物化學與分子生物學學會2006年學術交流會論文集[C];2006年

9 伍艷蘭;黃斯勇;牛曉麗;張麗;陳茹菲;何飛;張萍;梁英民;劉利;;人Delta-like4ext-93-217原核表達、純化及蛋白活性檢測[A];第12屆全國實驗血液學會議論文摘要[C];2009年

10 馬文濤;閆若潛;吳志明;劉光輝;盛敏;謝彩華;;豬白細胞介素-6的原核表達及其生物學活性研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物傳染病學分會第四次豬病防控學術研討會論文集[C];2010年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 張曉鳴;人IL-16的原核表達與其功能的初步研究[D];中國科學院研究生院（上海生命科學研究院）;2000年

2 曹秀利;楊樹PtCDD基因的原核表達及酶活分析[D];南京林業(yè)大學;2008年

3 黃新河;小鼠TAp63γ的原核表達、純化、結構及功能初步研究[D];四川大學;2007年

4 張大鵬;VP60蛋白的原核表達、抗體制備及VP60基因轉化的研究[D];西北農(nóng)林科技大學;2012年

5 張少斌;豌豆肌動蛋白異型體（PEAc1）的原核表達及其藻熒光探針的研制[D];中國農(nóng)業(yè)大學;2004年

6 尹國華;利用Red重組系統(tǒng)構建dsRNA原核表達體系抗煙草花葉病毒的研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學;2009年

7 韓凌霞;豬圓環(huán)病毒2型基因的原核表達與單克隆抗體的制備及感染性分子克隆的動物接種試驗[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2003年

8 于揚;重組人源GPx4及其模擬物的原核表達、結構與功能的研究[D];吉林大學;2013年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周鵬;結核分枝桿菌特異性蛋白的原核表達、純化及免疫原性分析[D];安徽醫(yī)科大學;2015年

2 高小磊;六種結核分枝桿菌特異性抗原的原核表達及16 KD-38 KD和Ag85A血清學診斷效果的研究[D];蘭州大學;2015年

3 彭傳林;家蠅抗真菌肽MAF-1原核表達體系優(yōu)化與活性分析[D];貴陽醫(yī)學院;2015年

4 鐘樹懷;豬囊尾蚴膜聯(lián)蛋白的原核表達及其免疫反應性分析[D];貴陽醫(yī)學院;2015年

5 孫明潭;豬繁殖與呼吸綜合征病毒河北地方株ORF7基因的原核表達及ELISA方法的建立[D];河北農(nóng)業(yè)大學;2015年

6 張良斌;天祝白牦牛KAP家族基因克隆、原核表達及其在皮膚中的表達分析[D];西北民族大學;2015年

7 達小強;牦牛轉鐵蛋白基因克隆與原核表達[D];西北民族大學;2015年

8 高翠娥;飛蝗2個CYP450轉基因果蠅品系對殺蟲劑的敏感性及原核表達[D];山西大學;2015年

9 吳雨航;布氏桿菌病間接ELISA方法的建立及吉林省梅花鹿主要養(yǎng)殖地區(qū)鹿布病血清學調(diào)查[D];吉林農(nóng)業(yè)大學;2015年

10 姜旭;百合無癥病毒16kDα基因的克隆、原核表達及亞細胞定位[D];大連理工大學;2015年

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