本文關鍵詞：家蠶C-型凝集素11基因BmCTL11的克隆及表達分析

  更多相關文章： 家蠶 C-型凝集素 基因克隆 表達譜 微生物誘導 多克隆抗體

【摘要】：昆蟲的C-型凝集素參與先天免疫系統(tǒng)中細胞間的相互作用,家蠶C-型凝集素11(C-type lectins,CTL11)基因BmCTL11是經(jīng)家蠶微孢子蟲(Nb)感染誘導后在蠶體內(nèi)持續(xù)高量表達的基因。用生物信息學方法分析BmCTL11基因編碼有307個氨基酸的多肽,預測分子質量34.51 kD,等電點4.69,含2個串聯(lián)的典型C-型凝集素糖識別結構域,與煙草天蛾的IML-1蛋白進化距離最近。RT-PCR檢測BmCTL11基因在家蠶幼蟲時期的轉錄水平較高,并在多個組織有轉錄。將滅活的家蠶病原細菌、真菌、微孢子蟲、病毒等注射家蠶5齡幼蟲后的24 h內(nèi),qRT-PCR檢測BmCTL11基因在幼蟲脂肪體和中腸組織內(nèi)的轉錄水平均發(fā)生上調,說明該基因能夠被多種病原微生物誘導。以家蠶5齡第3天幼蟲脂肪體c DNA為模板克隆了BmCTL11基因,連接到p ET-32a載體,誘導表達后將純化的融合蛋白免疫昆明鼠制備出效價為1∶102 400的BmCTL11多克隆抗體。Western blot分析結果顯示,BmCTL11蛋白可能以二聚體形式主要分布于家蠶脂肪體、血漿、中腸、表皮等組織中,推測BmCTL11在家蠶識別病原微生物并介導引發(fā)進一步的先天免疫反應過程中有重要的作用。
【作者單位】： 家蠶基因組生物學國家重點實驗室西南大學;重慶師范大學生命科學學院;
【關鍵詞】： 家蠶 C-型凝集素 基因克隆 表達譜 微生物誘導 多克隆抗體
【基金】：國家重大基礎研究發(fā)展計劃“973”項目(No.2012CB1146-04) 國家高技術研究發(fā)展計劃“863”項目(No.2013AA1-02507) 西南大學基本科研業(yè)務費專項“創(chuàng)新團隊”項目(No.XDJK2015A010)
【分類號】：S881.2;Q78
【正文快照】： 昆蟲的先天免疫無論是細胞免疫還是體液免疫,首先需要對入侵病原微生物進行識別,在此過程中機體的免疫識別分子/受體能夠識別并結合病原表面比較保守的被稱為病原相關分子模式(PAMPs)的物質[1]。免疫識別分子/受體是昆蟲先天免疫系統(tǒng)中的關鍵因子,由參與先天免疫的細胞合成與

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本文編號：667067