發(fā)布時間：2017-08-08 17:05

  本文關(guān)鍵詞：鐵皮石斛HDS基因的克隆與初步表達(dá)分析

  更多相關(guān)文章： 鐵皮石斛 -羥基--甲基--E-丁烯基--焦磷酸合酶 基因克隆 表達(dá)分析

【摘要】：目的從鐵皮石斛Dendrobium officinale中克隆4-羥基-3-甲基-2-E-丁烯基-1-焦磷酸合成酶(4-hydroxy-3-methylbut-2-en-1-yl diphosphate synthase,HDS)基因,在大腸桿菌中誘導(dǎo)融合蛋白,并探究該基因在鐵皮石斛不同組織中的表達(dá)規(guī)律。方法采用RT-PCR和RACE等方法獲取鐵皮石斛HDS(Do HDS)的c DNA全長,利用相關(guān)軟件和在線網(wǎng)站進(jìn)行生物信息學(xué)分析,使用Real-Time PCR分析Do HDS在不同組織的表達(dá)特征,構(gòu)建原核表達(dá)載體p ET-28a(+)-Do HDS,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)。結(jié)果成功獲得Do HDS的c DNA全長序列,Gen Bank登錄號為KJ161312,全長2 666 bp,ORF為2 238 bp,編碼745個氨基酸。Do HDS在各組織中均有表達(dá),在莖中表達(dá)量最高,為原球莖的5倍;SDS-PAGE結(jié)果顯示誘導(dǎo)產(chǎn)物為1個相對分子質(zhì)量(82 700)與理論值相符的融合蛋白。結(jié)論克隆了Do HDS的c DNA全長序列,探究其在不同組織中的表達(dá)模式,建立了原核表達(dá)體系,為后續(xù)研究Do HDS的功能提供了一定的理論基礎(chǔ)。
【作者單位】： 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 鐵皮石斛 -羥基--甲基--E-丁烯基--焦磷酸合酶 基因克隆 表達(dá)分析
【基金】：安徽省教育廳自然科學(xué)重點(diǎn)項目(KJ2015A005) 江淮地區(qū)大學(xué)農(nóng)業(yè)科技服務(wù)模式關(guān)鍵技術(shù)集成與示范(2013BAD20B09)
【分類號】：S567.239
【正文快照】： 鐵皮石斛Dendrobium officinale Kimura et Migo,又名黑節(jié)草,多年生草本植物,為蘭科第2大屬植物。它是一種常用名貴中藥[1],至今已有1 500多年藥用歷史。歷代醫(yī)著如《道藏》《神農(nóng)本草經(jīng)》《本草綱目拾遺》等均有記載[2]�！吨袊幍洹�2010年版中記載鐵皮石斛具有益胃生津、滋

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 高劍平;張梁;孫莉娜;邱小明;;鐵皮石斛組培快繁關(guān)鍵技術(shù)研究概述[J];福建農(nóng)業(yè)科技;2010年04期

2 流沙;;種植鐵皮石斛疑問解答[J];農(nóng)村百事通;2011年19期

3 ;林下種石斛 生態(tài)又致富[J];林業(yè)與生態(tài);2011年11期

4 席剛俊;趙桂華;;鐵皮石斛栽培技術(shù)概況[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2011年32期

5 泮玉華;王文霞;章樂建;;樂清栽培的鐵皮石斛其有效部位化學(xué)成分的動態(tài)研究[J];海峽藥學(xué);2011年10期

6 ;黃金種植——鐵皮石斛[J];農(nóng)家之友;2012年01期

7 ;黃金種植——鐵皮石斛[J];黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué);2012年03期

8 吳慧鳳;宋希強(qiáng);劉紅霞;;鐵皮石斛種子的室內(nèi)共生萌發(fā)[J];生態(tài)學(xué)報;2012年08期

9 曾淑華;文國松;徐紹忠;查應(yīng)紅;楊生超;段承俐;;鐵皮石斛磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆及表達(dá)分析[J];中草藥;2012年04期

10 ;黃金種植——鐵皮石斛[J];村委主任;2012年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 諸燕;斯金平;張愛蓮;;人工栽培鐵皮石斛多糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)研究[A];第八屆全國藥用植物及植物藥學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2009年

2 陳立鉆;倪云霞;孫繼軍;范華芬;許安玲;;鐵皮石斛傳統(tǒng)加工品與機(jī)械加工品的多糖含量對比研究[A];全國第六屆天然藥物資源學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2004年

3 郭英英;劉京晶;斯金平;;雁蕩山不同樹種活樹附生鐵皮石斛多糖含量差異比較[A];生態(tài)文明建設(shè)中的植物學(xué)：現(xiàn)在與未來——中國植物學(xué)會第十五屆會員代表大會暨八十周年學(xué)術(shù)年會論文集——第4分會場：資源植物學(xué)[C];2013年

4 王伯初;李標(biāo);;響應(yīng)聲波加載的鐵皮石斛差異表達(dá)基因篩選及其功能初步研究[A];2008年全國生物流變學(xué)與生物力學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2008年

5 丁小余;侯北偉;謝明璐;;珍稀鐵皮石斛基于微衛(wèi)星標(biāo)記的種質(zhì)鑒別與保護(hù)遺傳學(xué)研究[A];第九屆全國藥用植物及植物藥學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

6 朱波;斯金平;苑鶴;;鐵皮石斛雜交育種的初步研究[A];第九屆全國藥用植物及植物藥學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

7 李宏博;張宏宇;樸鐘云;;鐵皮石斛組織培養(yǎng)研究[A];第九屆全國藥用植物及植物藥學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

8 斯金平;;鐵皮石斛可持續(xù)發(fā)展關(guān)鍵技術(shù)研究進(jìn)展[A];第十屆全國藥用植物及植物藥學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2011年

9 金璐英;斯金平;張愛蓮;魏濤;莫伊娜;;鐵皮石斛中基本氨基酸含量變異規(guī)律[A];第十屆全國藥用植物及植物藥學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2011年

10 張治國;劉驊;夏志俊;王君暉;黃純農(nóng);;鐵皮石斛種子的超低溫保存[A];中國植物生理學(xué)會全國學(xué)術(shù)年會暨成立40周年慶祝大會學(xué)術(shù)論文摘要匯編[C];2003年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馬盼盼;國家二級保護(hù)植物瀕危中藥材——鐵皮石斛[N];中國現(xiàn)代企業(yè)報;2008年

2 周飛 段俊;鐵皮石斛種植有了新技術(shù)[N];廣東科技報;2010年

3 本報記者 蔣萍 鄭蔚;“鐵皮石斛”的近憂遠(yuǎn)慮[N];文匯報;2013年

4 元陽縣沙拉托鄉(xiāng)農(nóng)服中心 楊梅;鐵皮石斛組培快繁方法[N];云南科技報;2013年

5 謝云挺 俞平;我國成功栽培鐵皮石斛[N];經(jīng)濟(jì)參考報;2003年

6 福娣;我國鐵皮石斛栽培技術(shù)世界領(lǐng)先[N];上�？萍紙�;2000年

7 記者 呂輝;云南研發(fā)鐵皮石斛立體栽培技術(shù)成功[N];云南日報;2004年

8 葉勝榮;富陽鐵皮石斛保護(hù)與栽培研究取得突破[N];中國中醫(yī)藥報;2003年

9 嵇哲;浙大育出6顆“金種子”[N];浙江日報;2006年

10 記者　施仁潮;鐵皮石斛組培將實(shí)現(xiàn)工廠化生產(chǎn)[N];中國中醫(yī)藥報;2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 徐程;鐵皮石斛種質(zhì)資源與組培工廠化生產(chǎn)研究[D];浙江大學(xué);2006年

2 嚴(yán)亮;中國傳統(tǒng)蘭科藥用植物鐵皮石斛基因組及其生物學(xué)特性研究[D];吉林大學(xué);2014年

3 張澤錦;鐵皮石斛的光合碳同化途徑及其對環(huán)境變化的生理響應(yīng)[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

4 李標(biāo);聲波刺激對鐵皮石斛生長代謝的影響及其相關(guān)基因表達(dá)和克隆研究[D];重慶大學(xué);2007年

5 滕建北;鐵皮石斛與美花石斛莖尖生長機(jī)理及其多糖累積規(guī)律研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2009年

6 關(guān)杰敏;鐵皮石斛良種繁育與GAP種植關(guān)鍵技術(shù)研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2014年

7 何鐵光;鐵皮石斛原球莖多糖的誘導(dǎo)、提純、理化性質(zhì)及生物活性研究[D];廣西大學(xué);2007年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 諸燕;鐵皮石斛種質(zhì)資源收集與評價[D];浙江農(nóng)林大學(xué);2010年

2 辛甜;組培鐵皮石斛的品質(zhì)評價研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2011年

3 戴燕萍;鐵皮石斛生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范研究[D];浙江農(nóng)林大學(xué);2012年

4 王俊潔;鐵皮石斛體細(xì)胞無性變異的生藥學(xué)初步研究[D];云南中醫(yī)學(xué)院;2012年

5 李東賓;冷脅迫下鐵皮石斛抗寒基因的克隆與表達(dá)研究[D];浙江農(nóng)林大學(xué);2013年

6 郭洪波;鐵皮石斛（Dendrobium candidum）組培快繁及其抗癌作用的研究[D];沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

7 李霖明;鐵皮石斛菌根化育苗及重引入技術(shù)研究[D];海南大學(xué);2011年

8 徐琳娜;茂蘭喀斯特鐵皮石斛環(huán)境適應(yīng)性研究[D];貴州師范大學(xué);2008年

9 朱波;鐵皮石斛人工雜交技術(shù)與優(yōu)良家系苗期選擇[D];浙江農(nóng)林大學(xué);2011年

10 苑鶴;鐵皮石斛主要活性成分遺傳變異規(guī)律研究[D];浙江農(nóng)林大學(xué);2011年

，

本文編號：641050