本文關(guān)鍵詞：野生毛葡萄芪合成酶基因雙向啟動子活性分析

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【摘要】：【目的】研究中國野生毛葡萄‘丹鳳-2’(Vitis quinquangularis‘Danfeng-2’)芪合成酶(stilbene synthase)基因雙向啟動子的啟動活性與差異�！痉椒ā客ㄟ^染色體步移技術(shù)克隆中國野生毛葡萄‘丹鳳-2’芪合成酶基因雙向啟動子,并與Uid A基因(β-葡萄糖苷酶基因,GUS)融合,利用真空滲透法在葡萄葉片中瞬時表達,組織化學染色和GUS蛋白定量法分別檢測白粉菌接種、溫度處理、茉莉酸甲酯、脫落酸和水楊酸處理對雙向啟動子活性的影響。以毛葡萄‘丹鳳-2’和歐洲葡萄‘赤霞珠’不同成熟時期果實的c DNA為模板,通過熒光實時定量PCR的方法分析Vq STS12/Vv STS31和Vq STS33/Vv STS32的表達情況。【結(jié)果】Pvq DSTS12受到白粉菌、茉莉酸甲酯、高溫和低溫的誘導后,啟動活性增強,對水楊酸和脫落酸處理不敏感;Pvq DSTS33在茉莉酸甲酯處理下啟動活性增強,在高溫和低溫的處理下啟動活性降低,對水楊酸、脫落酸和白粉病處理不敏感。熒光實時定量PCR結(jié)果顯示,在果實發(fā)育的6個時期中,‘丹鳳-2’Vq STS12和Vq STS33的表達量均高于‘赤霞珠’Vv STS31和Vv STS32。4個基因的基本表達趨勢為:漿果轉(zhuǎn)色期之前持續(xù)增長,轉(zhuǎn)色后期下降,漿果半熟期達到最高峰,漿果成熟期表達降低。其中毛葡萄‘丹鳳-2’Vq STS12的表達量在轉(zhuǎn)色后期并未降低且增加到上一時期的2.3倍;歐洲葡萄Vv STS32基因在成熟期表達量升高為前一時期的1.42倍�！窘Y(jié)論】雙向啟動子活性的研究為利用植物天然雙向啟動子提供依據(jù)。
【作者單位】： 西北農(nóng)林科技大學園藝學院;旱區(qū)作物逆境生物學國家重點試驗室;農(nóng)業(yè)部西北地區(qū)園藝作物生物學與種質(zhì)創(chuàng)制重點試驗室;
【關(guān)鍵詞】： 中國野生毛葡萄 芪合成酶 雙向啟動子 GUS
【基金】：國家自然科學基金(No.31372039)
【分類號】：S663.1
【正文快照】： 葡萄(Vitis L.)是多年生漿果類果樹,有很高的經(jīng)濟學和生物學效益。芪合成酶(stilbene synthase)是苯丙氨酸途徑中的催化合成白藜蘆醇的關(guān)鍵酶[1]。白藜蘆醇(resveratrol)作為植物中抵御真菌的植保素,對人體健康也有重要的醫(yī)療保健作用[2]。我國野生葡萄資源十分豐富,其中野生

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本文編號：548243