發(fā)布時間：2024-04-23 01:51

　　為了探究來源于馬鈴薯中的StBAG3基因在馬鈴薯抗性建立過程中可能具有的功能,以夏坡蒂馬鈴薯的離體葉片為試驗材料,利用馬鈴薯的瞬時表達體系對StBAG3基因的功能進行了初步的研究。結果表明,在瞬時表達StBAG3基因的馬鈴薯離體葉片上人工接種馬鈴薯晚疫病菌,24,48,72,96 h后接種位置病斑的相對面積較對照病斑顯著減少了1.92～39.15百分點,說明瞬時表達StBAG3基因后顯著提高了馬鈴薯對晚疫病菌的抗性水平。這一結果也從對接種部位壞死細胞的染色中得到了證實。H₂O₂定性和定量測定的結果表明,瞬時表達StBAG3基因后接種部位H₂0₂積累量在接種后0～48 h差異不顯著,接種后72,96 h與對照差異顯著,二者均在72 h達到最大值,分別為0.146,0.086μmol/g。ROS清除酶活性測定的結果表明,接種后瞬時表達StBAG3基因部位SOD和CAT的活性隨著接種時間推移,變化的模式有所差異,但二者在0～96 h均高于對照葉片,而POD的活性在接種后0～72 h與對照葉片沒有顯著差異,...

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【部分圖文】：

圖1馬鈴薯離體葉片瞬時表達StBAG3后接種晚疫菌的示意圖

將在黑麥培養(yǎng)基上培養(yǎng)20d的致病疫霉菌轉入裝有無菌水的離心管中,4℃下放置3h誘導游動孢子的釋放,將孢子濃度調至1×106個/mL。在葉片的右側接種10μL的孢子液,葉片的左側接種水作為對照。將接種葉片放置在光照培養(yǎng)箱中(光照16h,黑暗8h,溫度為18～22℃,....

圖2瞬時表達StBAG3后接種晚疫菌病斑的變化

為了探究StBAG3基因在馬鈴薯抵抗晚疫病菌侵染過程中的作用,以瞬時表達空載體后接種晚疫菌的葉片部位作為對照,測定了在瞬時表達StBAG3基因的馬鈴薯離體葉片上接種晚疫病菌后不同時間點病斑的大小,結果表明(圖2),接種48h后,當對照的葉片部位開始出現(xiàn)水漬狀的病斑,而瞬時表達S....

圖3瞬時表達StBAG3葉片接種晚疫菌后死亡細胞數(shù)量的檢測(臺盼藍染色)

由于臺盼藍染色可以用來定性研究壞死細胞的數(shù)量,因此,可以利用接種部位染色面積的大小和顏色定性比較病斑的大小。由圖3可知,在接種24h后,瞬時表達StBAG3基因部位的死亡細胞數(shù)量與瞬時表達空載體的對照沒有明顯的差異,然而在接種48h后,對照部位藍色的面積以及深度都要大于瞬時表....

圖4瞬時表達StBAG3基因后定量和定性檢測接種部位H2O2的積累量

過氧化氫的大量積累往往被認為是標定植物抗病水平的一個重要指標,因此,過氧化氫濃度的定量測定能夠客觀的反映接種部位的抗性水平。為了明確瞬時表達StBAG3基因后導致的病斑變化原因是否為過氧化氫積累水平,對瞬時表達目的基因和空載體后馬鈴薯離體葉片進行晚疫病菌接種,對接種后不同時間點的....

本文編號：3962443