目的:分子靶向治療由于其安全性和有效性等特點(diǎn),已被應(yīng)用在包括非小細(xì)胞肺癌(Non small cell lung cancer,NSCLC)在內(nèi)的多種腫瘤的臨床治療中。吉非替尼是第一個(gè)獲批上市的表皮生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶抑制劑,臨床應(yīng)用取得了較好的療效,已成為EGFR基因突變的晚期NSCLC患者的一線治療方案。但是多數(shù)患者會(huì)在接受吉非替尼治療一段時(shí)間后出現(xiàn)耐藥的現(xiàn)象。MicroRNA能夠通過(guò)沉默其靶基因參與幾乎所有的生理或病理性生物學(xué)功能的調(diào)控。近期的研究發(fā)現(xiàn),多種microRNAs參與了NSCLC中吉非替尼耐藥性的形成和維持。本研究擬構(gòu)建NSCLC吉非替尼耐藥的microRNA-靶點(diǎn)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。并明確miR-342-3p在NSCLC細(xì)胞對(duì)吉非替尼耐藥性的形成和調(diào)節(jié)中的作用以及相關(guān)的分子機(jī)制,從而為闡明NSCLC的分子靶向治療耐藥的機(jī)制提供新依據(jù)。方法:1.整合分析NSCLC表達(dá)譜的數(shù)據(jù)集,鑒定差異表達(dá)基因。2.對(duì)差異表達(dá)基因進(jìn)行GO功能注釋及KEGG富集分析。3.構(gòu)建NSCLC吉非替尼耐藥的microRNA-靶點(diǎn)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。4.A549和PC9以及吉非替尼耐藥的A549/GR和PC9/G...

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮略語(yǔ)
第一部分 :綜合網(wǎng)絡(luò)分析法鑒定非小細(xì)胞肺癌潛在的與吉非替尼耐藥性相關(guān)的micro RNAS及其靶點(diǎn)
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 研究對(duì)象
        2.2 生物信息學(xué)分析方法
            2.2.1 差異表達(dá)基因(differentially expressed gene,DEG)的鑒定
            2.2.2 功能及富集分析
            2.2.3 Micro RNA-靶點(diǎn)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建
    3 結(jié)果
        3.1 吉非替尼耐藥的NSCLC中上調(diào)的差異表達(dá)基因的鑒定及功能研究
        3.2 MICRORNA-靶點(diǎn)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分 :MIR-342-3P靶向沉默CAP4 基因增強(qiáng)肺癌細(xì)胞對(duì)吉非替尼的耐藥性
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料
            2.1.1 實(shí)驗(yàn)用細(xì)胞株
            2.1.2 主要試劑
            2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
            2.1.4 生物信息學(xué)和計(jì)算機(jī)分析軟件包
            2.1.5 常見(jiàn)試劑配制
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.2.2 建立NSCLC吉非替尼耐藥細(xì)胞株
            2.2.3 實(shí)時(shí)定量PCR
            2.2.4 細(xì)胞轉(zhuǎn)染及實(shí)驗(yàn)分組
            2.2.5 藥物敏感性實(shí)驗(yàn)
            2.2.6 雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)
            2.2.7 Western Blotting
        2.3 實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)方法
    3 結(jié)果
        3.1 MIR-342-3P促進(jìn)A549/GR和 PC9/GR細(xì)胞對(duì)吉非替尼的耐藥性
        3.2 CPA4在NSCLC細(xì)胞中是MIR-342-3P的一個(gè)靶基因
        3.3 MIR-342-3P通過(guò)沉默CPA4 提高A549/GR和 PC9/GR細(xì)胞對(duì)吉非替尼的耐藥性
    4 討論
    5 結(jié)論
本論文創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3956690