目的了解多重耐藥(MDR)銅綠假單胞菌armA基因與可移動(dòng)遺傳元件的攜帶情況及其相關(guān)性;分析armA基因的周邊環(huán)境,探討armA基因轉(zhuǎn)移的可能機(jī)制。方法收集MDR銅綠假單胞菌98株,瓊脂稀釋法測(cè)定MIC,PCR方法檢測(cè)16S rRNA甲基化酶基因armA、I型整合子、可移動(dòng)元件IS26及重要耐藥基因側(cè)翼基因環(huán)境,測(cè)序并拼接PCR產(chǎn)物明確耐藥基因座位排列,并對(duì)armA基因進(jìn)行周邊序列分析。結(jié)果 98株MDR銅綠假單胞菌檢出5株armA基因PCR擴(kuò)增陽(yáng)性,攜帶armA基因的菌株對(duì)慶大霉素和阿米卡星全耐藥;檢出20株攜帶I型整合子,17株攜帶可移動(dòng)元件IS26;armA基因擴(kuò)增陽(yáng)性的菌株均攜帶I型整合子和IS26;序列測(cè)序顯示armA定位于Tn1548相關(guān)區(qū)域,位于插入序列ISCR1的下游,該序列含多種移動(dòng)元件。結(jié)論大連市氨基糖苷類高水平耐藥基因armA廣泛分布在MDR銅綠假單胞菌中,均對(duì)慶大霉素和阿米卡星高度耐藥;該基因定位在轉(zhuǎn)座子Tn1548的質(zhì)粒上,提示16S rRNA甲基化酶基因armA的廣泛播散可能是可移動(dòng)元件ISCR1-armA-IS26結(jié)構(gòu)參與其中。

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圖1銅綠假單胞菌armA基因擴(kuò)增電泳結(jié)果

表298株多重耐藥銅綠假單胞菌對(duì)慶大霉素的藥敏結(jié)果及armA基因檢出情況菌株抗菌藥物MIC(mg/L)藥物敏感性(%)MICrangeMIC50SR總數(shù)(n=98)慶大霉素64～128>12878.621.4阿米卡星1～128>12886.....

圖2銅綠假單胞菌ISCR1基因擴(kuò)增電泳結(jié)果

98株MDR銅綠假單胞菌中有20株ISCR1基因擴(kuò)增產(chǎn)物電泳可見約475bp的擴(kuò)增片段(圖2),有17株IS26元件基因擴(kuò)增可見387bp的片段(圖3),其中5株armA基因陽(yáng)性菌株ISCR1和IS26元件基因擴(kuò)增均為陽(yáng)性結(jié)果。圖3銅綠假單胞菌IS26基因擴(kuò)增電泳結(jié)果

圖3銅綠假單胞菌IS26基因擴(kuò)增電泳結(jié)果

圖2銅綠假單胞菌ISCR1基因擴(kuò)增電泳結(jié)果2.4armA基因周邊結(jié)構(gòu)分析

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