載脂蛋白(Apolipoprotein,APO),是組成血漿脂蛋白的重要成分,主要在肝臟和小腸中合成,能夠結(jié)合并運(yùn)輸血脂到機(jī)體各組織進(jìn)行代謝及利用。除此之外,載脂蛋白在病原體的防御中也發(fā)揮著一定的作用。在漫長(zhǎng)的演化史中,載脂蛋白多基因家族的進(jìn)化歷程以及其原始功能特征知之甚少。因此,鑒定七鰓鰻中的載脂蛋白分子LAL1和LAL2將對(duì)明確脊椎動(dòng)物載脂蛋白家族分子的進(jìn)化歷程具有重要意義,此外,探究七鰓鰻載脂蛋白分子LAL2的結(jié)構(gòu)與功能不僅還原載脂蛋白最原始的特征,且為七鰓鰻血清免疫學(xué)研究奠定基礎(chǔ)。本論文的主要研究?jī)?nèi)容包括以下幾個(gè)方面:應(yīng)用細(xì)胞轉(zhuǎn)染在HEK293T細(xì)胞中過(guò)表達(dá)lal2基因,完成了真核轉(zhuǎn)錄組測(cè)序和轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)結(jié)果的分析。通過(guò)對(duì)差異表達(dá)基因聚類,差異表達(dá)基因功能富集GO分類,KOG分類與KEGG分類分析,預(yù)測(cè)了LAL2潛在的生物學(xué)功能,結(jié)果表明LAL2可能在七鰓鰻生長(zhǎng)發(fā)育中發(fā)揮著重要作用,參與病原體入侵的免疫應(yīng)答,以及脂質(zhì)合成和代謝。在雷氏七鰓鰻基因組數(shù)據(jù)庫(kù)中找到了七鰓鰻血漿載脂蛋白LAL2和LAL1,利用Genomicus在線網(wǎng)站、MEGA7.0軟件、MEME在線網(wǎng)站對(duì)LAL2、LA...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1脂蛋白代謝途徑和相關(guān)載脂蛋白的示意圖[20]

遼寧師范大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文51.2七鰓鰻血清載脂蛋白LAL2的研究現(xiàn)狀及重要意義M.Pontes等[37]對(duì)海七鰓鰻血漿進(jìn)行超速離心，在“高密度脂蛋白組分”中，發(fā)現(xiàn)了兩種小而含量豐富的分子，經(jīng)序列比對(duì)發(fā)現(xiàn)兩者均與哺乳動(dòng)物的APOA4類似，將其命名為血漿載脂蛋白LAL1、LAL....

圖2.1轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析流程圖

遼寧師范大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文15(cellularcomponent)、基因的分子功能(molecularfunction)、參與的生物過(guò)程(biologicalprocess)�？v軸則表示此分類中差異基因個(gè)數(shù)(右)占被注釋上基因總數(shù)的百分比(左)。其中不同的分類用不同顏色代表....

圖2.2pEGFP-N1-lal2重組質(zhì)粒的構(gòu)建與pEGFP-N1空載質(zhì)粒（A）lal2目的片段PCR回收產(chǎn)物；M：DL2000Marker；1：lal2目的片段；（B）pEGFP-N1

脊椎動(dòng)物載脂蛋白起源進(jìn)化和七鰓鰻LAL2抗菌功能研究162.2.1RNA的提�。�1）真核質(zhì)粒的構(gòu)建以實(shí)驗(yàn)室前期構(gòu)建的pET32a-lal2重組質(zhì)粒[36]為模板，擴(kuò)增出帶有XhoI、BamHI酶切位點(diǎn)的lal2目的片段576bp，將真核表達(dá)載體pEGFP-N1質(zhì)粒進(jìn)行雙酶切，兩者....

圖2.3pEGFP-N1空載質(zhì)粒和pEGFP-N1-lal2重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的HEK293T細(xì)胞Fig.2.3HEK293TcellsweretransfectedwithpEGFP-N1plasmidandrecombinantpEGFP-N1-lal2

脊椎動(dòng)物載脂蛋白起源進(jìn)化和七鰓鰻LAL2抗菌功能研究162.2.1RNA的提取（1）真核質(zhì)粒的構(gòu)建以實(shí)驗(yàn)室前期構(gòu)建的pET32a-lal2重組質(zhì)粒[36]為模板，擴(kuò)增出帶有XhoI、BamHI酶切位點(diǎn)的lal2目的片段576bp，將真核表達(dá)載體pEGFP-N1質(zhì)粒進(jìn)行雙酶切，兩者....

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