目的:研究ATP2B1基因沉默對人臍靜脈內(nèi)皮細胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)胰島素敏感性的影響,并探討所涉及的基礎機制,尋找增強內(nèi)皮細胞胰島素敏感性的方法,為臨床上治療胰島素抗抵患者的新藥研發(fā)提供部分理論支持,降低胰島素抵抗患者發(fā)生心血管疾病的風險。方法:將對數(shù)生長期的HUVEC細胞用0.25%胰蛋白酶消化計數(shù)后按0.5×10 6cells/孔的密度接種在6孔板中,采用riboFECTTMCP轉(zhuǎn)染試劑盒分別將陰性SiRNA(Si-Neg)和ATP2B1基因沉默特異性SiRNA(Si-ATP2B1)轉(zhuǎn)染到HUVEC細胞中,轉(zhuǎn)染濃度均為100nM。此后,實驗分三個部分進行干預和指標檢測。第一部分,轉(zhuǎn)染48h后,收集細胞,用Western Blot檢測HUVEC細胞內(nèi)質(zhì)膜鈣離子ATP酶-1(Plasma Membrane Calcium ATPase-1,PMCA1)蛋白表達水平、Fluo-3 AM鈣離子熒光探針法測定HUVEC細胞內(nèi)Ca²⁺濃度。第二部分,轉(zhuǎn)染32h后,血清饑餓培養(yǎng)過夜(16h),分別用以...

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學位級別】：碩士

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中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
英漢縮略詞對照表
血管內(nèi)皮細胞胰島素抵抗分子機制研究進展(綜述)
    參考文獻
致謝



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