糖代謝是植物體內(nèi)的主要代謝過程,葡萄糖只有經(jīng)過己糖激酶(HXK)催化成葡萄糖-6-磷酸后才能進入糖酵解途徑,為植物體的生長發(fā)育和代謝活動提供物質(zhì)和能量。通過高油/低油近等基因系轉(zhuǎn)錄組測序發(fā)現(xiàn)HXK9在脂肪酸代謝中有重要的作用,利用RNA干擾技術(shù)構(gòu)建RNAi載體,利用花粉介導法將RNA干擾的HXK9基因轉(zhuǎn)入甘藍型油菜品系7B中,對HXK9基因的功能進行了初步研究。研究發(fā)現(xiàn):1.整合的RNAi-HXK9基因在后代植株中可以穩(wěn)定遺傳,性狀分離符合孟德爾分離定律;2.通過q RT-PCR測定發(fā)現(xiàn)RNAi植株中HXK9基因的表達量明顯降低了,為野生型植株的23.59%-66.94%;3.在種子萌發(fā)期,與野生型植株相比RNAi植株幼苗的胚軸伸長、根長和側(cè)根數(shù)都明顯減小,出真葉的時間比野生型幼苗晚2-3天;4.在植株生長過程中RNAi植株的株型小于野生型植株,葉子形狀也更加卷曲;5.RNAi植株的現(xiàn)蕾時間與野生型相比提前了26-41天;花器官出現(xiàn)了全部或是部分敗育的情況,花粉的萌發(fā)率嚴重降低,種子的體積和千粒重減小了;6.RNAi植株葉子的表面有透明粘稠狀液體的分泌,通過苯酚-硫酸實驗證明為糖類,且...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2pCaMHXK9-RNAi質(zhì)粒的PCR檢驗M:分子量標記；P0:空質(zhì)粒；P:pCaMHXK9-RNAi質(zhì)粒

油菜HXK9基因功能初探然后種植于溫室，利用PCR擴增進行油菜植US基因的分離比如表3所示，從表3中我們10和BT2-11中顯示出GUS基因預期的3：這就意味著RNAi植物株系BT2-1，BT2-10T2-9和BT2-12中的T2RN....

圖3樣品總DNA電泳圖

0:emptyplasmid；P:pCaMHXK9-RNAiplasmid圖3樣品總DNA電泳圖M:分子量標記；W:野生型植株；1-9:擬RNAi型植株Figure3SampletotalDNAelectrophoresismapM:molecularw....

圖4PCR產(chǎn)物電泳圖

圖4PCR產(chǎn)物電泳圖M：分子量標記；P：pCaMHXK9-RNAi質(zhì)粒；W：野生型植株；1-5：RNAi植株Figure4PCRproductelectrophoresismapM：molecularweightmarker；P：pCaMHXK9-RNA....

圖5幼苗的水培生長A:WT為野生型幼苗的水培生長，BT1-20為RNAi幼苗的水培生長；B:幼苗胚軸的伸長；C：幼苗根的伸長；D：幼苗側(cè)根的數(shù)目

油菜HXK9基因功能初探24圖5幼苗的水培生長A:WT為野生型幼苗的水培生長，BT1-20為RNAi幼苗的水培生長；B:幼苗胚軸的伸長；C：幼苗根的伸長；D：幼苗側(cè)根的數(shù)目Figure5HydroponicgrowthofseedlingsA:WTis....

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